Este capítulo analiza la estructura y mecanismo de la citrato sintasa. La enzima citrato sintasa que cataliza la reacción en la entrada al ciclo del ácido cítrico, forma un sistema excepcional para la investigación de mecanismos enzimáticos, interacciones enzima–sustrato, cambio conformacional, plegamiento de proteínas, ensamblaje cuaternario de estructuras biológicas y selección de orgánulos. La citrato sintasa proporciona un sistema en el que se puede estudiar el ejemplo más simple de ensamblaje estructural cuaternario a un oligómero activo. En los eucariotas, la enzima es un dímero en el que cada subunidad aporta grupos funcionales al sitio activo de la otra. El dímero se puede desnaturalizar reversiblemente a monómeros inactivos. La enzima no requiere cofactores inusuales ni iones metálicos para su actividad; es una de las pocas enzimas que puede catalizar la síntesis de un enlace carbono–carbono, y lo hace a una velocidad que se acerca al límite de difusión. La citrato sintasa se ha descubierto en prácticamente todos los organismos examinados. La enzima cataliza la condensación reversible de acetil-CoA para formar citril-CoA, que posteriormente se hidroliza para producir citrato y coenzima A. Por lo tanto, la enzima cierra el ciclo del ácido cítrico, regenerando el citrato compuesto de seis carbonos a partir del oxaloacetato compuesto de cuatro carbonos.