o Blog da Genotipia

Inma Besante Alcayna, Genotipia

no dia 5 de Julho do ano 1996 nascia em Edimburgo a ovelha Dolly, o primeiro mamífero clonado a partir de uma célula adulta. Desde aquele 5 de Julho transcorreram 23 anos e hoje a clonagem, concretamente uma das suas variantes, a clonagem terapêutica, apresenta-se como um processo que poderia ter inúmeros benefícios para a saúde humana. Por isso, na nossa publicação de hoje vamos conhecer todos os detalhes sobre este processo.

Qué o que é Clonagem?

começaremos estabelecendo o significado do termo clonagem. A palavra Clonagem procede do grego, seu significado etimológico é “broto” ou “ramo” e faz referência a todos aqueles processos cujo fim último é a obtenção, de maneira assexuada (isto é, sem intervenção de sexo), de cópias geneticamente idênticas de uma entidade biológica, que pode ser, desde uma célula, até um organismo completo.

Qué Que tipos de clonagem existem?

existem diferentes tipos de clonagem, desde a experimentada de maneira natural por algumas bactérias, plantas e fungos como modo de reprodução, até a clonagem terapêutica, graças à qual podemos gerar quase todos os tipos celulares e deste modo chegar inclusive a regenerar tecidos danificados.

Principalmente, existem três tipos de clonagem:

o tipo de clonagem mais utilizado atualmente é a clonagem genética. A clonagem genética consiste em inserir o fragmento de DNA de interesse em um vetor (bactéria, vírus, plasmídeo) e induzir sua multiplicação para obter o número desejado de cópias ou clones. Este tipo de clonagem é utilizado habitualmente com o objetivo de obter muitas cópias de genes que se deseja estudar.

a clonagem reprodutiva, que tem como objetivo principal a obtenção de um indivíduo idêntico completo, e a clonagem terapêutica, que tem como objetivo último a obtenção de células-tronco pluripotentes para uso terapêutico, são os outros dois tipos de clonagem que existem atualmente.

apesar de a clonagem terapêutica e a clonagem reprodutiva diferirem quanto aos seus objetivos, apresentam certas semelhanças entre si quanto ao uso de técnicas com as quais se realiza o processo.

a técnica de clonagem usada tanto na clonagem reprodutiva quanto na terapêutica é a transferência Nuclear de Células Somáticas (TNCS). Trata-se de uma estratégia de laboratório que consiste em tomar um oócito enucleado, ou seja, ao qual previamente foi extraído o núcleo, e implantar um núcleo doador de uma célula somática.

tendo em conta que os processos de clonagem terapêutica e reprodutiva apresentam semelhanças quanto à técnica empregada (ambos os tipos de clonagem utilizam a técnica de transferência Nuclear de Células Somáticas), também apresentam algumas diferenças, pelo que, a seguir vamos explicar com detalhe em que consiste cada um dos processos.

na clonagem reprodutiva, os pesquisadores extraem o núcleo de uma célula somática madura do animal que se deseja clonar. Posteriormente, a transferência do núcleo é realizada pela técnica TNCS explicada acima. Uma vez efetuada a transferência, deixa-se que a célula se divida e finalmente se obtém um embrião que se implanta o ventre de uma fêmea adulta, a qual, após o desenvolvimento do organismo dará à luz a um indivíduo com a mesma composição genética que o organismo doador da célula somática.

abaixo podemos observar uma ilustração do processo de clonagem reprodutiva.

 processo de clonagem reprodutiva. Ilustração: Rubén Megía
processo de clonagem reprodutiva. Ilustração: Genotipia.

na clonagem terapêutica, por sua vez, o processo consiste em três etapas, a primeira delas, consiste na enucleação ou extração do núcleo da célula (oócito) que vai ser empregada como célula receptora. Uma vez obtido o oócito enucleado procede-se à transferência do núcleo de interesse desde a célula dadora. Posteriormente, ocorre a ativação do oócito e a reprogramação da expressão gênica celular. O resultado final é a obtenção de células-tronco embrionárias capazes de dar origem a células pluripotentes com a capacidade de gerar qualquer tipo de célula. O que, entre outras coisas, permite gerar células com o objetivo de regenerar e/ou substituir tecidos danificados.

 processo de clonagem terapêutica. Ilustração: Ruben Megia-Genotipia.
processo de clonagem terapêutica. Ilustração: Rubén Megía – Genotipia

em resumo, os objetivos da clonagem terapêutica e reprodutiva são diferentes, no caso da clonagem reprodutiva é a geração de um indivíduo completo idêntico, enquanto no caso da terapêutica é a obtenção de células-tronco pluripotentes.

Qué o que é uma célula-tronco pluripotente?

uma célula-tronco pluripotente é uma célula capaz de dar origem a qualquer outro tipo de célula. Ou seja, são células indiferenciadas capazes de dar origem a células correspondentes aos três tipos de linhagem embrionária (ectoderma, mesoderma e/ou endoderma). Em seguida, vamos lembrar o processo de diferenciação celular em seus diferentes estágios.

 fases da diferenciação celular.
Etapas da diferenciação celular. Ilustração: Rubén Megía-Genotipia.

¿existem alternativas para a obtenção de células-tronco pluripotentes?

Existe um modo alternativo de obter células estaminais pluripotentes, que consiste na indução da pluripotência em células adultas. Para obter células-tronco pluripotentes induzidas em primeiro lugar, é realizada a cultura das células adultas a serem usadas. Posteriormente, efetua-se a transferência de genes exógenos provenientes de células estaminais às células iniciais mediante a utilização de vectores retrovirais. Por último, procede-se à cultura das células transfectadas e expressão dos genes e fatores de transcrição correspondentes com o objetivo de reprogramar o mecanismo celular e induzir pluripotência.

as diferentes etapas da técnica iPS são especificadas abaixo:

Etapas do processo de obtenção de células iPS
Etapas do processo de obtenção de células iPS 1-isolamento e cultura de células adultas. 2-Transferência de genes exógenos por meio de vetores retrovirais e obtenção de células transfectadas. 3-seleção das células transfectadas. 4-expressão dos genes e indução pluripotência. Ilustração: Rubén Megía-Genotipia.

¿a clonagem é usada atualmente? Qual é a sua utilidade?:

para responder a estas perguntas, devemos voltar a fazer uma distinção entre Clonagem genética, clonagem reprodutiva e clonagem terapêutica.

no que diz respeito à clonagem genética, é utilizada habitualmente em muitos laboratórios e centros de investigação, isto sim, submetida a um exaustivo controlo e regulação.

a clonagem reprodutiva tem sido utilizada apenas em casos pontuais, como é o caso da ovelha Dolly. No entanto, não se realiza de maneira habitual e está totalmente restrito seu uso para fins de clonagem humana, entre outras coisas pelas implicações éticas que isso supõe.

no caso da clonagem terapêutica, podemos concluir que este processo pode apresentar inúmeros benefícios como a possibilidade de regenerar tecidos e/ou produzir órgãos com o potencial de realizar transplantes de maneira mais segura, evitando a rejeição dos mesmos. Além disso, a clonagem terapêutica, utilizada de maneira consciente e regulada, constitui uma ferramenta de elevado potencial fundamentalmente no desenvolvimento de terapias eficazes dirigidas a patologias para as quais, a dia de hoje, ainda não existe tratamento, como é o caso de algumas doenças hereditárias e / ou doenças de maior prevalência na atualidade.

bibliografia:

  • Instituto Nacional de pesquisa do Genoma Humano-Clonagem

https://www.genome.gov/about-genomics/fact-sheets/Clonacion

  • Therapeutic Clonning

Therapeutic Cloning

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