miRNAs na previsão do prognóstico no Carcinoma de células renais transparente

Abstract

carcinoma de células renais (RCC) é o tipo mais comum de malignidade urinária. O carcinoma de células renais claro (ccRCC) é o subtipo RCC predominante, representando 70-80% do RCC. Nos últimos anos, verificou-se que as miRNAs estão estreitamente associadas ao resultado dos doentes com ccRCC. Nesta revisão, resumimos os recentes avanços na pesquisa explorando o papel da miRNAs na previsão de prognósticos em pacientes com ccRCC.

1. Os carcinomas das células renais (CCRCC) são doenças malignas derivadas das células epiteliais tubulares renais, das quais o carcinoma das células renais claro (ccRCC) é o subtipo patológico predominante. Uma vez que o ccRCC não é sensível à radioterapia tradicional ou quimioterapia, e as terapias direcionadas ao mRCC são geralmente caras, o ccRCC é mais frequentemente tratado com nefrectomia radical ou parcial . Na fase inicial da doença, ccRCC não causa sinais ou sintomas específicos, e aproximadamente um terço dos pacientes têm metástases distantes no momento do diagnóstico . Embora a ressecção cirúrgica possa efetivamente resolver o ccRCC, 20 a 40% dos pacientes ainda desenvolvem recorrência local ou metástases distantes após a cirurgia.

MicroRNAs (miRNAs) são pequenos RNAs não codificantes de 20-22 nucleótidos. Nos tecidos ccRCC, foi observada a expressão aberrante de algumas miRNAs . Medir a expressão destas miRNAs pode distinguir ccRCC do tecido normal , prever prognósticos e destacar potenciais alvos terapêuticos . Um estudo anterior caracterizou uma assinatura miRNA de 22 miRNAs que, entre 147 perfis miRNA de 411 pacientes ccRCC, foi independentemente correlacionada com os resultados ccRCC . Recentemente, miRNAs tem atraído cada vez mais atenção devido às suas associações especiais com o prognóstico do ccRCC. Nesta revisão, discutimos o envolvimento de miRNAs no ccRCC nos aspectos, nomeadamente, grau patológico ou estágio, recorrência e metástase, e sobrevivência.

2. A predição pré-operatória do grau ou estágio patológico pode facilitar a formulação e implementação de um plano de tratamento individualizado. Nos últimos anos, as miRNAs têm sido associadas ao grau patológico e ao estágio. Ishihara et al. detectaram níveis notavelmente baixos de miR-23B e miR-27B nos tecidos do ccRCC, que devem ser associados ao estádio patológico avançado (definido como o estádio 3 ) e ao grau avançado (grau 3 ) do ccRCC . A expressão anormal do miR-23B e do miR-27B foi correlacionada com a sobrevivência global desfavorável, e a restauração destas anomalias resultou na inibição do crescimento do ccRCC e metástases. O aglomerado miR-23B / 27B foi, portanto, um marcador prognóstico preciso dos resultados patológicos no ccRCC. Verificou-se uma regulação da miR-29b tanto no tecido renal maligno como nas linhagens celulares RCC cultivadas in vitro . Elevação em miR-29b expressão foi associado com desfavorável a fase clínica () e sobrevida global () em pacientes com ccRCC, considerando que o miR-29b acelerou o crescimento e a migração da RCC células através de transcrição regulamento de KIF1B.

17,5 dobra da elevação, miR-125b expressão foi encontrado para ser correlacionada com um maior Fuhrman grau () e avançado do tumor-nodo-metástase (TNM) fase (III + IV versus I + II ) em 276 casos de ccRCC . A análise da Cox multivariada demonstrou que o miR-125b é um factor de prognóstico independente (HR 1, 860, IC 95% 1, 059–3, 269,) do ccRCC. Além disso, a combinação de miR-125b e a TNM fase (índice 0.715, 95% CI 0.656–0.773) melhorou o ccRCC prognóstico precisão da previsão TNM sozinho (índice 0.664, 95% CI 0.614–0.715), refletindo o sinérgica capacidade de previsão a dois parâmetros.Esta evidência pode fornecer um importante suporte teórico para a previsão e avaliação do prognóstico do ccRCC. As MiRNAs isoladas ou particularmente em combinação com outras características clinicopatológicas representam ferramentas valiosas para a estratificação prognóstica de doentes com CCR. No entanto, os possíveis mecanismos pelos quais estes miRNAs estão envolvidos no desenvolvimento e progressão do ccRCC permanecem em grande parte desconhecidos. Estes problemas não resolvidos podem ser superados pela otimização da cirurgia de ressecção renal e melhor detecção de várias miRNAs no futuro.

3. Recorrência e metástase

a análise de 111 amostras de CCR revelou um grau de metilação significativamente mais elevado nas ilhas Mir-124-3 CpG do que nos tecidos normais, o que foi associado à ocorrência de metástases distantes (), alto grau patológico (), e aumento do risco de recorrência da doença () . Estes dados sugeriram miR-124-3 como um biomarcador candidato ideal para a estratificação de risco de pacientes com CCR. Além disso, níveis elevados de miR-27a-3p demonstraram estar envolvidos na progressão do CCR . Em um multivariada de Cox proporção de perigo modelo, alta miR-27a-3p expressão conferiu uma 2.71 vezes maior risco de ccRCC recorrência de RH (2.71, IC 95% 1.23–6.42, ), indicando miR-27a-3p como um fator prognóstico independente para prever ccRCC de recorrência. No estudo realizado por Huang et al. , pacientes com ccRCC metastático hematogêneo tiveram níveis mais baixos de miR-30a, maior densidade de microvessel tumoral, e níveis mais elevados de expressão DLL4 do que aqueles sem metástase ou com apenas metástase linfática. Os dados de acompanhamento de 3 anos de 65 doentes com ccRCC sem metástases síncronas demonstraram que os doentes com níveis elevados de miR-30a apresentavam uma menor probabilidade de propagação hematógena e sobrevivência livre de metástases mais longa do que os doentes com níveis baixos de miR-30a. Assim, a miR-30a é preditiva independente da metástase hematógena ccRCC, que pode facilitar a terapia individualizada para reduzir a mortalidade específica da metástase. Similarmente, a expressão miR-646 diminuiu com a progressão ccRCC de não-metástase ou metástase linfática para metástases distantes . Dados de acompanhamento de cinco anos de 70 doentes com ccRCC sem metástases mostraram que os doentes com ccRCC com níveis elevados de miR-646 atingiram um melhor tempo de sobrevivência livre de metástases (). A expressão reduzida miR-646 foi identificada como um preditor independente da metástase distante ccRCC. O mecanismo subjacente pode envolver a via da proteína cinase activada pelo mitogénio (MAPK), visando a nin uma proteína de ligação (NOB1), como evidenciado por uma alteração concomitante e inversa no nível NOB1. Outro miRNA identificado como associado a metástase ccRCC é miR-30c . verificou-se que o miR-30c foi desparafinado em lesões primárias e metastáticas. Além disso, a sobreexpressão do miR-30c diminuiu a migração e a capacidade de invasão de células ccRCC cultivadas in vitro. Estes dados sugerem que as alterações na expressão miR-30c predizem metástases distantes precoces do ccRCC, e a restauração de seus níveis ajuda a reduzir a invasividade do ccRCC.

Fu et al. os níveis elevados de miR-125b foram correlacionados com a baixa taxa de Sobrevivência () e menor sobrevivência livre de recorrência () entre 276 doentes em ccRCC submetidos a nefrectomia . Globalmente, os doentes com ccRCC com níveis elevados de miR-125b apresentavam um risco elevado de recorrência do ccRCC (HR 2, 396, IC 95% 1, 365–4.778, ), mas a estratificação por estágio clínico revelou que este marcador só foi preditiva por aqueles em estágio clínico avançado (T2–4, FC 6.366, 95% CI 2.754–25.508, ) e não em um estágio inicial (T1, RH 1.507, 95% CI 0.614–3.857, ). Estes dados novamente confirmam o Significado de miRNA e suas alterações na previsão precoce da recorrência e sobrevivência de pacientes com ccRCC após nefrectomia. MiR-122 e miR-514 também foram validados como marcadores miRNA expressos diferencialmente na recorrência do ccRCC após nefrectomia radical . A expressão de miR-514 é significativamente re-regulada enquanto que miR-122 é re-regulada em lesões primárias e metastáticas. No entanto, apenas miR-514 permaneceu como um fator independente prevendo a recorrência do tumor no modelo de regressão final da Cox.

tomados em conjunto, miRNAs desempenham um papel na previsão da ocorrência de ccRCC e recorrência pós-operatória e metástase. Assim, as miRNAs são ferramentas úteis para facilitar a seleção de terapia personalizada e o cronograma de acompanhamento individualizado. No entanto, a evidência actual é escassa e provém em grande parte de um número limitado de eventos ou experiências in vitro. O papel preciso das miRNAs no ccRCC, e os mecanismos moleculares específicos envolvidos, merece uma investigação mais aprofundada. Essa investigação pode permitir melhorar a sobrevivência e a qualidade de vida desses doentes.

4. Sobrevivência

anomalias no miRNA, sub-regulação ou sub-regulação, prever a sobrevivência global (ou) ou a sobrevivência livre de doença (DFS). Foi relatado que a expressão miR-194 diminui gradualmente à medida que os tecidos renais normais se desenvolvem em ccRCC primário e diminui ainda mais nas lesões metastáticas . Os níveis de expressão mais baixos do miR-194 estão associados a DFS () e OS () desfavoráveis. Análise multivariada sugere ainda que o miR-194 independente do marcador molecular para OS RH (DE 0,51, IC 95% 0.37–de 0,71, em particular para lesões ≤ 4 cm de RH (DE 0,43, IC 95% 0,3–de 0.62, ). Assim, miR-194 ajuda a distinguir pequenas malignidades agressivas com pior prognóstico de tumores indolentes, uma vez que eles devem ser tratados diferentemente. Verificou-se que a expressão de miR-126 foi aumentada em espécimes ccRCC. Khella et al. verificou-se que a sobre-expressão do miR-126 estava associada a um SO mais longo em ambos os casos 481 ccRCC () e 268 doentes com lesões maiores (>4 cm, ) . O envolvimento do miR-126 na carcinogênese e progressão baseou-se em uma série de alvos, tais como SPRED1, IGF1R, BCL2, CRK, CCNE2, PIK3R2, e várias vias incluindo HIF–1, VEGF, mTOR, e PI3 K-Akt vias de sinalização. Em comparação com o tecido renal normal, o mir-210 foi sub-regulado no tecido ccRCC . Os pacientes com elevados níveis de mir-210 tinha um de 1,82 vezes maior risco de recaída (HR 1.82, 95% CI 1.11–3.00 ) e 2.46 vezes maior risco de curto OS (HR-SE 2,46, IC 95% 1.20–5.04, ). As curvas de sobrevivência Kaplan-Meier mostraram que os doentes com mir-210 upregulados tinham DFS () e OS () mais baixos. Foram obtidos resultados semelhantes para OS doentes com dimensão tumoral > 4 cm. Verificou-se que outro miRNA, miR-203, está envolvido na carcinogénese e na progressão do ccRCC. É desprovida de regulamentação em células RCC cultivadas in vitro e em espécimes ccRCC . o miR-203 é um fator de prognóstico independente para os doentes com RCC (HR 3, 071, 95% IC 1, 719–6.374), uma vez que a expressão baixa do miR-203 prevê um SO mais curto (). Experiências in vitro mostraram que o miR-203 inibiu o crescimento e a migração das células RCC, através do direcionamento direto do FGF2, como evidenciado pela atenuação parcial do efeito supressivo do tumor num modelo de sobre-expressão do FGF2. Do mesmo modo, os baixos níveis de miR-497 foram um potencial factor independente para a previsão de um SO curto em doentes com ccRCC .

foram estudados vários miRNAs para previsão pós-operatória. A regulamentação do miR-630 foi independentemente correlacionada com uma menor taxa de sobrevivência global (HR 3, 021; IC 95% 2, 074–5.726,) em 92 doentes com ccRCC submetidos a nefrectomia, e a baixa regulação do miR-217 foi associada à baixa sobrevivência dos doentes com ccRCC . A taxa de sobrevivência de cinco anos dos doentes com níveis elevados de miR-217 foi superior à dos doentes com expressão baixa de miR-217. Comparando a expressão miR-187 em amostras de ccRCC pós-operatória e tecido normal histologicamente compatível (T/N), A expressão miR-187 foi reduzida em amostras de ccRCC e diminuiu gradualmente com o avanço do grau e estágio tumoral . Todos os doentes com níveis elevados de miR-187 (T/n > 1) sobreviveram 5 anos após cirurgia.; em contraste, apenas 42% dos indivíduos com baixo nível de miR-187 sobreviveram neste momento (T/n < 0, 42), sugerindo um papel supressivo de miR-187 na progressão do ccRCC. Experiências in vitro demonstraram que a sobreexpressão do miR-187 inibiu o crescimento das células tumorais e diminuiu a motilidade através da direct targeting B7 homolog 3 (B7-H3). Chen et al. reported that miR-129-3p expression was downregulated in ccRCC specimens . Baixos níveis de miR-129-3p também foram associados com desfavorável DFS (HR 3.119, 95% CI 1.060–9.175, ) e OS (HR 3.199, 95% CI 1.075–9.521, ). 87.5% dos doentes com ccRCC com um nível de miR-129-3p acima da mediana sobreviveram 43 meses, em contraste com apenas 54, 2% dos doentes com um nível abaixo da mediana. O envolvimento do miR-129-3p em metástases ccRCC baseou-se na regulamentação de um número de genes relacionados com metástases, incluindo SOX4, p-FAK, MMP2 e MMP-9. Além disso, o ccRCC pode ser discriminado do tecido renal normal de acordo com os níveis de miR-129-3p com uma precisão de 73,5%.

a regulação do miR-21 foi relatada como estando correlacionada com a sobrevivência específica do cancro dos doentes com ccRCC. O limiar ΔΔCt 1.61 revelou uma sensibilidade de 66% e uma especificidade de 81% . A diminuição da regulamentação do miR-126 foi também associada à sobrevivência específica do cancro. Um limiar ΔΔCt de 0,57 produziu uma sensibilidade e especificidade de 36% e 100%, respectivamente. A combinação dos dois marcadores consegue um desempenho preditivo sinérgico para a sobrevivência específica do cancro com maior sensibilidade e especificidade (88% e 75%, resp.). Além disso, com uma pontuação de risco combinada de 6, 82 com base nos dois miRNAs, previu uma taxa de sobrevivência específica de 5 anos de cancro de 96% para doentes de baixo risco e de 48% para doentes de alto risco.

outro estudo demonstrou que a razão de miR-21 para miR-10B (mir 21/10B) foi independentemente correlacionada com a sobrevivência () e o estágio TNM, com melhor desempenho preditivo do que o miRNA singular . Análise de pacientes sem metástase mostrou que os pacientes com baixo miR21/10B tinha mais específico para a doença de sobrevivência ( meses) e mais de 5 anos e 10 anos, as taxas de sobrevivência (84.2%) do que aqueles com alta miR21/10B, que tinha uma doença específica de sobrevivência de meses e 5 anos (51.6%) e 10 anos (49.1%) taxa de sobrevivência. Com o valor de corte definido na mediana, um modelo de regressão proporcional de risco Cox indicou que miR21/10B era um fator prognóstico independente (95% IC = 1, 201–5, 736,). Assim, miR21 / 10B poderia possivelmente ser usado para estratificação do risco pós-operatório de pacientes sem metástase.

miR-141-3p e miR-145-5p como reguladores pós-transcritionais são relatados para suprimir a migração e invasão de células tumorais, visando NRP2 ou SLC16A3. Curiosamente, a sobreexpressão simultânea de ambas miRNAs inibe a migração através da supressão da expressão HS6ST2 e LOX, a última das quais foi um forte fator de prognóstico para OS no ccRCC.

Vergho et al. comparou doentes com ccRCC () e doentes com ccRCC com um trombo tumoral (TT) estendendo-se para a veia cava inferior, o que indicava geralmente um mau prognóstico . Os resultados mostraram que o miR-21, o miR-126 e o miR-221 podiam prever de forma independente a morte relacionada com o cancro em doentes com ccRCC. Uma pontuação combinada baseada em três miRNAs foi calculada de acordo com a fórmula (4.592 × ΔCt miR-21) + (-3.892 × ΔCt miR-126) + (-1.938 × ΔCt miR-221). Com um valor de corte de 18,7. A especificidade da pontuação de risco para doentes de alto risco foi de 90%, enquanto para os doentes de baixo risco foi de 87%.

tomados em conjunto, os miRNAs específicos podem ser marcadores potenciais para prever a sobrevivência de doentes no ccRCC. A combinação de múltiplos miRNAs ou miRNAs com parâmetros clínicos, por exemplo, estágio TNM ou tamanho do tumor, alcançou melhor desempenho preditivo com maior precisão, sensibilidade e especificidade do que miRNAs singulares. Uma pontuação combinada baseada em dois ou mais miRNAs é conveniente e confiável para a estratificação do risco de pacientes com ccRCC.

5. Evidências acumuladas prospectivas

mostraram que miRNAs, especialmente em um grupo, são biomarcadores sensíveis e específicos novos não invasivos para a previsão de grau patológico, recorrência/metástase, e sobrevivência para pacientes ccRCC. miRNA pode ser uma ferramenta útil para identificar pacientes com alto risco de mau prognóstico e, assim, facilitar a terapia personalizada e o esquema de acompanhamento (Figura 1). Atualmente, a detecção da miRNA depende da PCR quantitativa em tempo real (qRT-PCR). No entanto, a interpretação do impacto da expressão de miRNA continua a ser um desafio em contextos clínicos.

Figura 1

O prognóstico de significância de miRNAs em ccRCC. miRNAs predizem o prognóstico do ccRCC em aspectos de grau e estágio patológico, recorrência e metástase, e sobrevivência.

Além disso, como compreender o mútuo e complicado regulamento de miRNAs e genes alvo é outra questão, pois cada gene pode ser afetada por diferentes miRNAs, e em cada miRNA pode segmentar vários genes. A investigação sobre o envolvimento da miRNAs no ccRCC está ainda numa fase preliminar e exige uma investigação mais aprofundada antes da aplicação clínica. E nós resumimos todas as miRNAs como foram mencionadas em nosso manuscrito, alguns achados (Tabelas 1 e 3) e mecanismo funcional (Tabela 2).

conflitos de interesses

os autores declaram que não têm conflitos de interesses.