明細胞腎細胞癌の予後予測におけるmiRNA

概要

腎細胞癌（RCC）は、最も一般的なタイプの尿悪性腫瘍である。 明細胞腎細胞癌（ccRCC）は、rccの70-80％を占める優勢なRCCサブタイプです。 近年、ｍｉＲＮＡは、ＣＣＲＣＣ患者の転帰と密接に関連していることが見出されている。 このレビューでは、ccRCC患者の予後予測におけるmirnaの役割を探る研究の最近の進歩を要約します。

1. はじめに

腎細胞癌（RCC）は、腎尿細管上皮細胞に由来する悪性腫瘍であり、そのうちの明細胞腎細胞癌（ccRCC）が病理学的サブタイプである。 CcRCCは伝統的な放射線療法または化学療法に敏感ではなく、mRCC標的療法は通常高価であるため、ccRCCは根治的または部分的な腎摘出術で治療されること この疾患の初期段階では、ccRCCは特定の徴候または症状を引き起こさず、診断時に患者の約三分の一が遠隔転移を有する。 外科的切除はccRCCを効果的に解決することができるが、患者の20-40％は依然として手術後に局所再発または遠隔metastasisを発症する。

マイクロRna(mirna)は、20-22ヌクレオチドの小さな非コードRnaである。 CcRCC組織では、いくつかのmiRNAの異常な発現が観察されている。 これらのmiRNAの発現を測定することで、ccRCCを正常組織と区別し、予後を予測し、潜在的な治療標的を強調することができる。 以前の研究では、411ccRCC患者から147miRNAプロファイルの中で、独立してccRCCアウトカムと相関していた、22mirnaのmiRNAの署名を特徴としました。 最近、mirnaはccRCCの予後との特別な関連のためにますます注目を集めています。 本レビューでは，ｃｃｒｃｃにおけるｍｉＲＮＡの病理学的グレードまたは病期，再発および転移および生存の側面における関与について議論した。

2. 病理学的等級または病期

病理学的等級または病期の術前予測は、個別化された治療計画の策定および実施を容易にすることができる。 近年、miRNAは病理学的等級および病期と関連していることが見出されている。 石原ら ccRCCの進行した病理学的段階（ステージ3と定義される）および進行したグレード（グレード3）に関連するccRCC組織において、著しく低いレベルのmiR-23BおよびmiR-27B MiR-23BおよびmiR-27Bの異常な発現は、好ましくない全生存と相関し、これらの異常の回復は、ccRCC成長および転移の阻害をもたらした。 したがって、miR-23B/27Bクラスターは、ccRCCにおける病理学的転帰の正確な予後マーカーであった。 MiR-29bのアップレギュレーションは、悪性腎組織およびin vitro培養RCC細胞株の両方で見出されている。 Mir-29b発現の上昇は、ccrcc患者における好ましくない臨床段階（）および全生存（）と関連していたが、miR-29bはKIF1Bの転写調節を介してRCC細胞の増殖および遊走を加速した。

miR-125b発現の17.5倍の上昇は、ccRCCの276例において、より高いフールマングレード（）および進行した腫瘍-節転移（TNM）段階（III+IV対I+II、）と相関していることが判明した。….. 多変量Cox解析では、miR-125bがccRCCの独立した予後因子（HR1.860、95％CI1.059–3.269）であることが示された。 さらに、miR-125bとTNMステージの組み合わせ（-指標0.715、95％CI0.656-0.773）は、TNM単独のccRCC予後予測精度（-指標0.664、95％CI0.614–0.715）を改善し、2つのパラメータの相乗的予測能

まとめると、この証拠はccRCC予後の予測と評価のための重要な理論的支持を提供する可能性がある。 単独でまたは特に他のclinicopathological特徴を伴ってmirnaはRCCの患者の予後の成層のための貴重な用具を表します。 しかし、これらのmiRNAがccRCCの発生および進行に関与する可能性のあるメカニズムは、ほとんど未知のままである。 これらの未解決の問題は、将来的には腎切除手術の最適化と様々なmirnaの検出の改善によって克服される可能性があります。

3. 再発および転移

111rcc標本の分析は、遠隔metastasisの発生（）、高い病理学的グレード（）、および疾患再発のリスクの増加（）に関連していた正常組織よりもmir-124-3CpGアイラン これらのデータは、rcc患者のリスク層別化のための最適な候補バイオマーカーとしてmiR-124-3を示唆した。 また、高レベルのｍｉＲ−２ ７ａ−３ｐがＲＣＣ進行に関与していることが示されている。 多変量Cox比率ハザードモデルでは、miR-27a-3pの発現が高いとccRCC再発のリスクが2.71倍増加し（HR2.71、95％CI1.23-6.42）、miR–27a-3pがccRCC再発を予測する独立した Huangらによって行われた研究では。 、血行性転移性ccRCCを有する患者は、転移のないまたはリンパmetastasisのみを有するものよりもmiR-30aの低レベル、高い腫瘍微小血管密度、およびDLL4発現の高レベ 同期転移のない65ccRCC患者からの3年間のフォローアップデータは、miR-30aの高レベルの患者は、低miR-30aレベルの患者よりも血行性の広がりと長いmetastasis-free生存の低確率を示したことを示した。 したがって、ｍｉＲ−３ ０ａは、ＣＣＲＣＣの血行性転移を独立して予測し、転移特異的死亡率を減少させるための個別化された治療を促進することができる。 同様に、ｍｉＲ−６ ４ ６発現は、非転移またはリンパ転移から遠隔転移へのＣＣＲＣＣ進行とともに減少した。 転移のない70ccRCC患者からの五年間のフォローアップデータは、高レベルのmiR-646を有するccRCC患者がより良い転移のない生存時間を達成することを示した（）。 減少したmiR-646発現は、ccRCC遠隔転移の独立した予測因子として同定された。 基礎となるメカニズムは、nob1レベルの付随、逆の変化によって証明されるように、nin one結合タンパク質（NOB1）を標的とすることにより、マイトジェン活性化プロテインキナーゼ（MAPK）経路を含む可能性があります。 ＣＣＲＣＣ転移に関連すると同定された別のｍｉＲＮＡは、ｍｉＲ−３ ０ｃである。 miR-30cは、原発性および転移性病変の両方でダウンレギュレートされることが判明した。 さらに、miR-30cの過剰発現は、in vitro培養ccRCC細胞の遊走および侵入能力を減少させた。 これらのデータは、miR-30c発現の変化がccRCCの早期遠隔転移を予測し、そのレベルの回復がccRCCの侵襲性を低下させるのに役立つことを示唆している。

腎摘出術を受けている276ccRCC患者の中で、高いmiR-125bレベルが生存率が低い（）および再発のない生存率が短い（）と相関していることが判明した。 全体として、miR-125bレベルが高いccRCC患者は、ccRCC再発のリスクが高かった（HR2.396、95％CI1.365–4。778,)しかし、臨床段階による層別化により、このマーカーは進行した臨床段階（T2–4、HR6.366、95％CI2.754–25.508）でのみ予測的であり、早期段階（T1、HR1.507、95％CI0.614–3.857）ではないことが明らかになった。 これらのデータは、腎摘出後のccRCC患者の再発および生存の早期予測におけるmiRNAの意義およびそれらの変化を再び確認する。 また、mir-122およびmiR-514は、根治的腎摘出後のccRCC再発における差動的に発現されるmiRNAマーカーとしても検証されている。 Mir-514の発現は有意に下方制御され、一方、miR-122は原発性および転移性病変において上方制御される。 しかし、唯一のmiR-514は、最終的なCox回帰モデルで腫瘍再発を予測する独立した因子として残った。

まとめると、mirnaはccRCCの発生および術後の再発および転移を予測する役割を果たす。 従って、mirnaは個人化された療法の選択および個別化されたフォローアップのスケジュールを促進する有用な用具である。 しかし、現在の証拠はまばらであり、主にイベントやin vitro実験の限られた数から来ています。 CcRCCにおけるmirnaの正確な役割、および関与する特定の分子メカニズムは、さらなる調査に値する。 そのような研究は、そのような患者の生存および生活の質を改善することを可能にする可能性がある。

4. 生存

miRNAの異常、アップレギュレーションまたはダウンレギュレーションは、全生存（OR）または無病生存（DFS）を予測します。 正常な腎組織が原発性ccRCCに発達するにつれてmiR-194発現が徐々に減少し、転移性病変ではさらに減少することが報告されている。miR-194発現は、正常な腎組織が原発性ccRCC より低いｍｉＲ−１ ９ ４発現レベルは、好ましくないＤＦＳ（）およびＯＳ（）と関連している。 多変量解析はさらに、miR-194がOS（HR0.51、95％CI0.37–0.71）、特に4cm以上の病変（HR0.43、95％CI0.3–0.62）の独立した分子マーカーであることを示唆している。 したがって、miR-194は、予後が悪い積極的な小悪性腫瘍を、差動的に治療すべきであるため、無痛性腫瘍と区別するのに役立つ。 MiR-126の発現は、ccRCC標本で増加することが見出された。 Khella et al. miR-126の過剰発現は、481ccRCC症例（）およびより大きな病変を有する268患者（>4cm、）の両方において、より長いOSと関連していたことがわかった。 発癌および進行におけるmiR-126の関与は、SPRED1、IGF1R、BCL2、CRK、CCNE2、PIK3R2、およびHIF-1、VEGF、mTOR、およびPI3K–Aktシグナル伝達経路を含むいくつかの経路などの多くの標的に依存していた。 正常な腎組織と比較して、ｍｉｒ−２ １ ０は、ＣＣＲＣＣ組織中で上方制御された。 高レベルのmir-210を有する患者は、再発リスクが1.82倍増加し（HR1.82、95％CI1.11-3.00）、osが短くなるリスクが2.46倍増加した（HR2.46、95％CI1.20–5.04）。 Ｋａｐｌａｎ−Ｍｅｉｅｒ生存曲線は、アップレギュレートされたｍｉｒ−２ １ ０を有する患者が、より低いＤＦＳ（）およびＯＳ（）を有していたことを示した。 腫瘍サイズ>4cmの患者では、OSについても同様の結果が得られた。 別のｍｉＲＮＡであるｍｉＲ−２ ０ ３は、ＣＣＲＣＣの発癌および進行に関与することが見出されている。 それはin vitro培養されたRCC細胞およびccRCC標本でダウンレギュレートされる。 miR–203はRCC患者のOSの独立した予後因子であり（HR3.071、95%CI1.719-6.374）、miR-203の発現が低いほどOSは短くなる（）。 In vitro実験は、fgf2過剰発現モデルにおける腫瘍抑制効果の部分的な減衰によって証明されるように、fgf2を直接標的とすることにより、miR-203がRCC細胞 同様に、低レベルのｍｉＲ−４ ９ ７は、ＣＣＲＣＣ患者における短いＯＳを予測するための潜在的な独立した因子であった。

術後の予測のために多くのmiRNAが研究されている。 MiR-630のアップレギュレーションは、全生存率の低下と独立して相関していた（HR3.021、95%CI2.074–5。726,)腎摘出術を受けている92ccRCC患者では、miR-217のダウンレギュレーションは、ccRCC患者の貧しい生存にリンクされていました。 高レベルのｍｉＲ−２ １ ７を有する患者の５年生存率は、低ｍｉＲ−２ １ ７発現を有する患者の５年生存率よりも大きかった。 術後ccRCC標本と組織学的に一致した正常組織（T/N）におけるmiR-187発現を比較することにより、miR-187発現はccRCC標本でダウンレギュレートされ、腫瘍のグレードと病 高レベルのmiR-187（T/N>1）を有するすべての患者は、手術後5年生存した; 対照的に、低レベルのmiR-187を有する者の42％のみがこの時点で生存しており（T/N<0.42）、ccRCC進行におけるmiR-187の抑制的な役割を示唆している。 In vitro実験では、miR-187の過剰発現が腫瘍細胞増殖を阻害し、直接B7ホモログ3（B7-H3）を標的とすることを介して運動性を低下させることが示された。 Chen et al. ccrcc標本でmiR-129-3p発現がダウンレギュレートされたことを報告した。 低レベルのmiR–129–3pも、好ましくないDFS（HR3.119、95％CI1.060-9.175）およびOS（HR3.199、95％CI1.075-9.521）と関連していた。 87.中央値を上回るmiR-129-3pレベルを有するccRCC患者の5％は43ヶ月生存したが、中央値を下回るレベルを有する患者の54.2％のみとは対照的であった。 CcRCC転移におけるmiR-129-3pの関与は、SOX4、p-FAK、MMP2、およびMMP-9を含む多くの転移関連遺伝子のダウンレギュレーションに依存していた。 さらに、ccRCCは、73.5％の精度でmiR-129-3pレベルに従って正常な腎組織と区別することができた。

miR-21のアップレギュレーションは、ccRCC患者の癌特異的生存と相関することが報告されている。 Δ Δ Ct閾値は1である。61は66％の感度と81％の特異性をもたらした。 MiR-126のダウンレギュレーションはまた、癌特異的生存と関連していた。 0.57のΔ Δ Ct閾値は、それぞれ36％と100％の感度と特異性をもたらした。 二つのマーカーの組み合わせは、改善された感度および特異性（88％および75％、resp.). また、2つのmiRNAに基づいて6.82のカットオフでのリスクスコアを組み合わせて、低リスク患者では96％、高リスク患者では48％の5年癌特異的生存率を予

別の研究では、miR-21とmiR-10Bの比（miR21/10B）は生存率（）およびTNM期と独立して相関し、特異的miRNAよりも優れた予測性能を示した。 転移のない患者の分析は、mir21/10Bが低い患者は、mir21/10Bが高い患者よりも疾患特異的生存率（月）が長く、5年および10年生存率（84.2％）が高く、5年生存率（51.6％）および10年生存率（49.1％）が高かったことを示した。 カットオフ値を中央値に設定した場合、Cox比例ハザード回帰モデルは、miR21/10Bが独立した予後因子であることを示した（95％CI=1.201–5.736）。 したがって、mir21/10Bは、おそらく転移のない患者の術後リスク層別化のために使用することができます。＜７ ６ ０＞＜１ ０ ６ １＞転写後調節因子としてのｍｉＲ−１ ４ １−３ｐおよびｍｉＲ−１ ４ ５−５ｐは、ＮＲＰ２またはＳＬＣ１ ６Ａ３を標的とすることにより、腫瘍細胞の遊走および浸潤を抑制する 興味深いことに、両方のmirnaの同時過剰発現が協力してHS6ST2とLOX発現を抑制することにより、移行を阻害し、後者はccRCCにおけるOSのための強力な予後因子

Vergho et al. ｃｃｒｃｃ患者（）と下大静脈内に拡張した腫よう血栓（Ｔ ｔ）を有するｃｃｒｃｃ患者（）とを比較したところ，一般に予後不良を示した。 結果は、ｍｉＲ−２ １、ｍｉＲ−１ ２ ６およびｍｉＲ−２ ２ １が、ＣＣＲＣＣ患者における癌関連死を独立して予測することができることを示した。 ３つのｍｉＲＮＡに基づく複合スコアを、式（４）に従って算出した。592×Δ Ct miR-21)+(-3.892×Δ Ct miR-126)+(-1.938×Δ Ct miR-221)。 カットオフ値は18.7です。 高リスク患者のリスクスコアの特異性は90％であったが、低リスク患者のリスクスコアは87％であった。

まとめると、特定のmirnaはccRCC患者の生存を予測するための潜在的なマーカーである可能性があります。 複数のmirnaまたはmirnaと臨床パラメータ、例えば、TNM病期または腫瘍サイズとの組み合わせは、単一のmirnaよりも高い精度、感度、および特異性で優れた予測パフォーマ 二つ以上のmirnaに基づく組み合わせスコアは、ccRCC患者のリスク層別化のために便利で信頼性があります。

5. プロスペクティブ

蓄積された証拠は、特にグループ内のmirnaがccRCC患者の病理学的グレード、再発/転移、および生存の予測のための敏感で特異的な新規非侵襲的バイオマーカーであることを示している。 miRNAは、予後不良のリスクが高い患者を特定するための有用なツールであり、したがって、個別化された治療とフォローアップスケジュールを容易にす 現在、ｍｉＲＮＡの検出は、定量的リアルタイムＰＣＲ（ｑＲＴ−ＰＣＲ）に依存している。 しかし、miRNA発現の影響を解釈することは、臨床現場では困難なままです。

図1

ccRCCにおけるmiRNAの予後的意義。 mirnaは病理学の等級および段階、再発および転移および存続の面のccRCCの予想を予測します。

さらに、各遺伝子は異なるmiRNAによって影響を受ける可能性があり、各miRNAは複数の遺伝子を標的とすることができるため、miRNAと標的遺伝子の相互および複雑な調節をどのように理解するかは別の問題である。 CcRCCにおけるmirnaの関与に関する研究はまだ予備段階にあり、臨床応用の前にさらなる調査を必要とする。 そして、私たちの原稿で言及されているように、すべてのmirna、いくつかの知見（表1および3）および機能メカニズム（表2）をまとめました。

利益相反

著者らは、利益相反がないことを宣言しています。