tässä ehdotuksessa käsitellään K-vitamiinista riippuvaisten veren hyytymisproteiinien rakenne-funktiosuhdetta kiinnittäen erityistä huomiota gammakarboksiglutaamihappoon. Tämä ohjelma, johon kuuluu neljä erillistä mutta siihen liittyvää projektia, on kehittynyt edellisellä kaudella kehitetystä aiemmasta työstä. Hankkeessa #1 tutkitaan tekijä IX: n ja protrombiinin rakenne-funktiosuhdetta. Näiden proteiinien mutanttimuodot, jotka on saatu potilailta, joilla on näiden proteiinien perinnöllisiä rakenteellisia ja toiminnallisia poikkeavuuksia, puhdistetaan konformaatiospesifisillä vasta-aineilla, jotka pirstoutuvat proteolyysillä, ja mutanttipeptidit sekvensoidaan. Jokaisen mutanttiproteiinin molekyylivirhe määritetään ja korreloidaan toiminnallisten vikojen kanssa. Hankkeessa #2, äskettäin löydetty KC4 verihiutaleiden kalvoproteiini on täysin tunnettu ja lokalisoitu tiettyihin solunsisäisiin organelleihin. Tämän proteiinin toiminta ja sitoutumisominaisuudet, ilmaistuna vain aktivoiduilla verihiutaleilla, määritetään. Projekti #3 määrittelee GLA: n roolin protrombiinissa. Protrombiinin Gla: n, metallin ja kalvojen yhteisvaikutusta arvioidaan uudella mallilla, jossa käytetään immunokemiallisia ja spektroskooppisia lähestymistapoja. Osittain karboksyloitujen protrombiinien sarjan kalvosidontaominaisuuksien ja GLA-jakautumisen pitäisi antaa tietoa tästä ongelmasta. Projekti #4 on suora kliininen sovellus immunokemiallisista tutkimuksistamme. Käyttämällä vasta-aineita, jotka ovat spesifisiä täysin karboksyloidulle protrombiinille (NPT) ja Des-gamma-karboksiprotrombiinille (APT), jatkamme kliinistä tutkimusta näiden määritysten arvioimiseksi parannettuna menetelmänä oraalisen antikoagulanttihoidon seurannassa. Vastasyntyneiden ja heidän äitiensä K-vitamiinin puutosta tutkitaan, ja toiveena on kehittää yksinkertaisia järkeviä lähestymistapoja vastasyntyneen verenvuototaudin poistamiseksi. Lisäksi tutkitaan aktivoituneille verihiutaleille spesifistä KC4-antigeenin määritystä pretromboottisen tilan osoittamismenetelmänä. Näiden perusluonteisten ja kliinisten hankkeiden on edistettävä tämän proteiiniryhmän ymmärtämistä, tarjottava uusia menetelmiä pretromboottisen tilan ja K-vitamiinin difienenssin diagnosoimiseksi ja kehitettävä lisätietoja, joiden perusteella NPT-määrityksen käyttö protrombiiniaikana vähentää merkittävästi oraaliseen antikoagulanttihoitoon liittyvää sairastuvuutta/kuolleisuutta.