Oncology Letters

Introduction

Lung cancer on maailmanlaajuisesti yleisin syöpä rinta‑ja paksusuolisyövän jälkeen (1). Keuhkosyöpäkuolleisuus on samantapainen kuin tästäsairaudesta johtuva suuri kuolleisuus keuhkosyöpään. Kansainvälisen onCancer – tutkimuskeskuksen tietojen mukaan vuosittaisten keuhkosyöpäkuolemien odotetaan kasvavan noin 10 miljoonaan vuoteen 2030 mennessä (2).Histologisesti yleisin keuhkosyöpä onadenokarsinooma, jonka osuus kaikista keuhkosyövistä on lähes 50% (3).

histologisesti keuhkosyöpää on kahta päätyyppiä, pienisoluista keuhkosyöpää (SCLC) ja ei-SCLC: tä (NSCLC). Lyhytkestoisten syöpätapausten osuus on noin 20 prosenttia kaikista keuhkosyöpätapauksista, kun taas lyhytkestoisten syöpätapausten osuus on lähes 80 prosenttia keuhkosyöpätapauksista (4). Keuhkosyöpää on kolme histologista alatyyppiä: I) okasolusyöpä (SCC), ii) adenokarsinooma, andiii) suurisoluinen keuhkosyöpä, joista kunkin osuus on 25, 40 ja 15% kaikista Ei-PIENISOLUISISTA keuhkosyöpätapauksista (5).

huolimatta siitä, että keuhkosyöpä tunnustetaan yhdeksi aggressiivisimmista syöpätyypeistä, kliinisten tulosten kehitys on hidasta, vaikka käytössä on suuri määrä uusia lääkkeitä. Tärkeimmät kysymykset tämän haittapuolen keuhkosyövän kliinisessä käsittelyssä on validoitujen kasvainmerkkiaineiden puuttuminen, jotka ovat hyödyllisiä sekä taudin diagnosoinnissa että taudinmäärityksessä (6). Monentyyppisiä maligniteetti aiheuttaa keuhkopussin effuusioita, ja syöpiä, jotka useimmin etäpesäkkeitä keuhkopussin ovat keuhkojen ja rintojen karsinoomat ja lymfoomat. Vaikka pleuraleffuusion sytologista tutkimusta pidetään tavanomaisena diagnoosimenetelmänä, sen herkkyys on tyypillisesti vain 50-70% (7,8).

useat kasvainmarkkerit, mukaan lukien karsinoembryoniantigeeni (CEA), hiilihydraattiantigeeni 125 (CA125) ja SYTOKERATIININ 19 fragmentti KYFRA21-1 (ck19), on useissa tutkimuksissa arvioitu paremmiksi ja tarkemmiksi kasvainmarkkereiksi seerumissa sekä keuhkopussin nesteessä (7,8). On myös havaittu, että kahden tai useamman merkin yhdistelmä on voimakkaampi kuin yksittäinen merkki. Näiden merkkiaineiden todellista diagnostista ennustettavuutta ei kuitenkaan arvioitu monissa näissä tutkimuksissa, koska kasvainsolujen sytologinen läsnäolo havaittiin potilaiden keuhkopussin effuusioissa (9-11). Monien edellä mainittujen merkkiaineiden todettiin olevan koholla syöpäpotilaiden keuhkopussitulehduksissa verrattuna hyvänlaatuisiin keuhkopussitulehduksiin (7). Pleuraleffuusiosta johdettujen ihmisen keuhkosyöpäsolujen havaittiin olevan enemmän invasive ja metastaattinen kuin syöpäsoluja primaarisista leesioista ja tämä ero voi liittyä epiteeli-mesenkymaalinen siirtyminen (EMT).

EMT, jolla on yleensä tärkeä rooli bryonisen kudoksen morfogeneesissä ja vamman jälkeisessä fibroosissa (12,13), aktivoituu epäsopivasti aikuisena tietyissä patologisissa tiloissa, kuten syövässä, ja edistää kasvaimen etäpesäkkeitä (13). EMT: n tiedetään välittävän kasvainarkkitehtuurissa tapahtuvia moninaisia muutoksia ja niistä johtuvaa fenotyyppimodulaatiota. EMT: lle on ominaista intersellulaarinen adheesiohäiriö, kohonnut kasvainsolujen motiliteetti, heikentynyt susikyky anoikisille ja apoptoosille sekä solujen vapautuminen epiteelikudoksesta (9-11). Vapautuneet kasvainsolut, jotka ovat vastustuskykyisiä anoikisille, olettavat mesenkymaalisen kaltaisen fenotyypin, joka soveltuu muuttoliikkeeseen, invaasioon ja leviämiseen, kaikki edistävät metastasoitunutta etenemistä. Monissa tapauksissa syöpäsolujen EMT-aste määrittää syövän vakavuuden (14). EMT: n on myös osoitettu osallistuvan anoikis-resistenssiin, joka on kriittinen syövän etäpesäkkeiden estämisessä erilaisissa kiinteissä kasvaimissa (15).

Sytokeratiinit (CKS) ovat yleisiä kasvainmarkkereita ja ovat epiteelisoluissa olevan sytoskeletonin tärkeimmät rakenneosat, ja rakenteellisten ominaisuuksien CKs perusteella alatyyppejä on 20. Näistä CK19 on liukoinen ja hapan tyyppi I CK, ja se ilmentyy keuhkoputken epiteelikerroksessa, ja sen tiedetään yliekspressoituvan keuhkosyöpäkudoksissa (16). CK19: n pilkkoutuminen lisääntyneestä caspaasi-3: n aktiivisuudesta johtuen on kohonnutta ja proteolyyttiset fragmentit, erityisesti CYFRA21-1, vapautuvat vereen. CK19: n katsotaan olevan beklosely yhteydessä keuhkosyöpään; kuitenkin jotkut tutkimukset raportoivatck19: n ilmentymisen olevan negatiivinen tietyissä keuhkosyövissä (9-11). Ck19-ekspressio joissakin keuhkosyöpäsolulinjoissa väheni transformoivan kasvutekijän (TGF)-β-indusoidun EMT: n (17) seurauksena. Verenkierrossa olevat CK19-fragmentit, mukaanlukien CYFRA21-1, heijastavat todennäköisesti sytoskeletinmuodostuksen laajuutta syöpäsoluissa ja saattavat myös liittyä tumorin erilaistumisasteeseen levyepiteeliin (16).

tässä tutkimuksessa käytettiin 111 keuhkosyöpäpotilaan kasvainnäytteitä, ja tutkittiin CK19-negatiivisten ilmentymien esiintyvyyttä eri keuhkosyöpätyypeissä sekä sitä, aiheuttaako EMT: n induktio ensisijaisissa fokusoluissa CK19: n ilmentymistä. Selvitimme myös, olivatko 19-negatiiviset keuhkosyövät invasiivisempia ja metastasoituneempia.

potilaat ja menetelmät

yleinen

kaikki 111 potilasta valittiin American Joint Committee onCancer and Union for International Cancer Control-järjestön vuonna 2007 (9-11) kuvaaman 7thversion TNM-lavastuksen mukaan. Lungcancer-potilaat, joilla diagnosoitiin IV. vaiheessa erityyppinen keuhkosyöpä ja joita hoidettiin tyrosiinikinaasin estäjillä tai platinaan(75 mg/m2) ja dosetakseliin (75 mg/m2) perustuvalla lääkityksellä, otettiin mukaan tähän tutkimukseen. Potilaat toimitettiin Subei-Kansansairaalaan tammikuun 2013 ja joulukuun 2014 välisenä aikana.

tutkimuksen hyväksyi Subei People ’ s Hospitalin eettinen komitea. Jokaiselta osallistujalta saatiin kirjallinen tietoon perustuva suostumus. Tämä tutkimus noudattaa maailman Lääkäriliiton eettisiä sääntöjä (Helsingin julistus, 1964).111 potilaasta 90 oli miehiä (44-82-vuotiaita) ja 21 naisia(40-75-vuotiaita). Potilaiden ominaisuudet on esitetty taulukossa I. yhteensä todettiin 56 adenokarsinooma -, 21scc -, 32 SCLC-ja 2 adenosquamous-karsinoomatapausta.Tutkimukseen otetut potilaat täyttivät seuraavat kriteerit:: Karnofskyscore, jonka elinajanodote oli >60 vuotta >3 kuukautta, ei immuunisairauksia, normaali elektrokardiogrammi, normaali maksan ja lasten toiminta, eikä saanut syöpälääkitystä kuukauden kuluessa ennen tutkimusta. Tyrosiinikinaasi-inhibiittoreilla hoidetut tapaukset olivat sylkirauhaskarsinoomatyyppisiä.

kaikilta potilailta otettiin verinäytteet, ja seerumit eroteltiin ja jäädytettiin myöhempään analyysiin asti.Pleuraeffuusionäytteet kerättiin hyväksyttyjä menettelyjä noudattaen, ja ne tutkittiin sytologisesti ja käsiteltiin immunohistokemiaksi.

immunohistokemia

kasvainkudosnäytteitä (primaaripesäkkeitä) käsiteltiin immunohistokemiaa varten CK19: n, e-kadheriinin ja vimentiinin osoittamiseksi. Primaarikudosnäytteet kiinnitettiin formaliiniin ja yhdistettiin parafiinilohkoihin. Immunohistokemiallisessa analyysissä käytettiin useita osia (4 µm) kustakin näytteestä. Näytteissä oli hematoksyliinia ja eosiinia. Anti-CK19, anti-e-cadheriini jaanti-vimentin vasta-aineet ostettiin TIYO Biotechnologycorporationilta (Shanghai, Kiina). Anti-ck19 kanin polyklonaalinen vasta-aine(luettelonumero. Z98123) käytettiin laimennoksessa 1: 50; anti-e-cadheriini CK19-kanin polyklonaali (luettelonumero. Z86603) vasta-ainetta käytettiin laimennoksessa 1:100; ja anti-vimentin CK19rabbit polyklonaalinen vasta-aine (luettelonumero. Z40651) käytettiin adiluutiossa 1: 500, jonka jälkeen inkuboitiin sipuliperoksidaasi-konjugoidulla anti-IgG: llä (Beijing Cellchip Biotechnology Co., Ltd., Peking, Kiina) laimennuksella 1:100. Värikehitys toteutettiin 3,3 ’ – diaminobentsidiinisubstraatilla.

tan-hiukkasten esiintymistä solukalvossa ja sytoplasmaa pidettiin positiivisena CKl9: lle, e-kadheriinille ja vimentiinille. Kaksi patologia vahvisti immunohistokemialliset tulokset kaksoissokkoutetulla menetelmällä.

Markkerianalyysit

Roche E601 Cobas-automaattista kemiluminescenceimmunoassay-analysaattoria (Roche Diagnostics, Basel, Sveitsi) käytettiin seerumin CEA: n, CA125: n, neuronispesifisen enolaasin (NSE),α-fetoproteiinin (AFP) ja CYFRA21-1: n mittaamiseen potilasseerumeissa ja keuhkopussileffuusioissa. CYFRA21-1 >3, 3 ng/ml, NSE >15, 2 ng/ml, CEA >5, 0 ng/ml, CA125 >35, 0 ng/ml ja AFP >7 ng / ml pidettiin positiivisina arvoina.

TGF-β1: n indusoima EMT-vaikutus keuhkojen kasvainsoluissa

tuumorisolut eristettiin potilailta saaduista ensisijaisista tarkennuskudoksista. Primaarisolut eristettiin saman potilaan alkukasvainkudoksesta ja pleuraeffuusiosta, ja niitä viljeltiin. Solut eristettiin kahdessa vaiheessa: I) sentrifugoimalla lymfosyyttien erotusväliaineen avulla (ominaispaino 1.077), minkä jälkeen viljellään 2 päivän ajan rpmi-1640-välineessä, jossa on 20% sikiön naudan seerumia (Beijing LabLead BiotechnologyCorporation, Beijing, Kiina). ii)myöhemmin 40/20%Percoll (Beijing Solarbio Science & Technology Co., Ltd., Peking, Kiina) käytettiin toisen vaiheen sentrifugointi foreparating solut. Kerätyt solut viljeltiin uudelleen rpmi-1640-viljelyaineessa, joka sisälsi 20% sikiäin-naudan seerumia, ja inkuboitiin 37°C: ssa 5%: n CO2-ilmakehän alla 70-80%: n konfluenssiin asti. Solut käsiteltiin TGF-β1: llä (ostettu Shanghai Kexing Biotech Co., Ltd., Shanghai, Kiina) 5 ng/ml: ssa 24 tunnin ajan. tämän jälkeen solut pestiin ja käsiteltiin. E-cadherinin, CK19: n ja vimentinin immunohistokemiallinen alanalyysi tehtiin ennen TGF-β1-hoitoa ja sen jälkeen edellä kuvatulla tavalla. Näiden merkkiaineiden orabsenssi pisteytettiin positiiviseksi tai negatiiviseksi.

tilastoanalyysi

P< 0, 05 katsottiin tilastollisesti merkittäväksi.

tulokset

potilasominaisuudet

111 potilaaseen kuului 90 miestä ja 21 naista, joiden ikäjakauma oli samanlainen (40-80 vuotta). Potilailla diagnosoitiin IV. asteen keuhkosyöpä. Histologisesti suurin osa tapauksista oli adenokarsinoomatyyppisiä, ja niitä seurasivat SCLC ja SCC sekä mies – että naispotilailla (TableI). Tässä potilasnäytteessä oli vain kaksi adenosquamous-karsinoomatapausta. Suurin osa potilaista sai platina – ja dosetakselipohjaiseen solunsalpaajahoitoon perustuvaa hoitoa, kun taas epidermaalisen kasvutekijän reseptorinlisäysfunktiovaikutuksen saaneille potilaille annettiin tyrosiinikinaasin estäjähoitoa (gefitinibi). Vain pieni osa potilaista (5 miestä ja 1 nainen)ei saanut näitä hoitoja taloudellisten rajoitusten vuoksi.

primaarikasvain

111 potilaan Kasvainkudokset tutkittiin kimmonohistokemiallisesti CK19-ekspression varalta. Joissakin keuhkosyövissä havaittiin kohonnutta Ck19-ekspressiota, mutta CK19: n häviäminen liittyy todennäköisesti EMT: hen (17). Tässä tutkimuksessa CK19-ilmentymä puuttui monista pienisoluisen keuhkosyövän kasvaimista,>50% miehillä ja 100% naisilla. Sellaisenaan, CK19 expression wasrelatively vähentynyt SCLC kasvaimia verrattuna muihin lungcancers (Kuva. 1). Adenokarsinoomista noin 31% miespuolisten potilaiden kasvaimista oli negatiivisia CK19: lle, mikä oli paljon pienempi naisilla (7%).Kaiken kaikkiaan SCLC-tuumorikudokset osoittivat enemmän EMT-ominaisuuksien todennäköisyyttä (taulukko I). CK19-negatiivisten expresserprimaaristen kasvainten sekä pleuraeffuusiosolujen osuus Tkiterapian jälkeen väheni selvästi verrattuna hoitamattomiin tai kemoterapialla hoidettuihin potilaisiin kaikissa keuhkosyöpätyypeissä (Kuva. 2).

CYFRA21-1-tasot

seerumi-ja pleuraeffuusio CYFRA21-1-tasot ovat tärkeitä syöpäsairauden markkereita monentyyppisissä syöpätyypeissä, erityisesti keuhkosyövässä. Koska CYFRA21-1 on afragment CK19, tutkimme seerumin ja keuhkopussin effusionCYFRA21-1 tasot funktiona menetys CK19 expression inpleural effuusio soluja. Tulokset osoittivat, että kun CK19 ilmentyi voimakkaasti ensisijaisessa fokuksessa ja pleuraeffuusiosoluissa, CYFRA21-1-tasot olivat korkeat ja kun ck19-ilmentymä menetettiin alkukasvaimissa ja/tai pleuraeffuusiosoluissa, CYFRA21-1-tasot vähenivät merkittävästi kaikissa syöpätyypeissä (Kuva. 3). Lisäksi CYFRA21-1-tasot olivat paljon korkeammat seerumissa ja pleuraeffuusiossa potilailla, joilla olick19-positiivisia SCC-kasvaimia verrattuna muihin kasvaintyyppeihin (Kuva. 2). CK19: n voimakas esiintyminen positiivisissa kasvaimissa johtuu todennäköisesti runsaasta syfra21-1-pitoisuudesta SCC-potilasseerumeissa ja pleuraeffuusiossa (Kuva. 1). Tulokset viittasivat myös siihen, ettäserum CYFRA21–1-tasot olivat koholla vain niukasti keuhkorakkuloissa verrattuna hyvänlaatuisiin emästasoihin (1, 3-2, 6 ng/ml) lukuun ottamatta SCC: tä, jossa nousu oli paljon normaalia vaihteluväliä suurempi (kuva. 3). CYFRA21–1-tasot olivat kuitenkin lungcancer-potilaiden pleuraeffuusiossa huomattavasti koholla hyvänlaatuisen alueen yläpuolella (6, 5-35 ng/ml)(18), mikä viittaa siihen, että cyfra21-1: n pleuraeffuusion mittaus on optimaalinen kasvainmarkkeri.

muut seerumimarkkerit

kasvaimen maligniteetin markkerit, mukaan lukien CA125,CEA, NSE ja AFP, mitattiin muutamien potilaiden seerumista, ja potilaiden ja pitoisuuksien välillä oli huomattavaa vaihtelua.Näin ollen ADC-potilaiden keskimääräiset CA125 -, CEA -, NSE-ja AFPwas-arvot 23.6±10.9, 48.3±39.7, 10.1±2.4, 2, 1±0, 6. SCC: n saaneille potilaille CA125: n, CEA: n, NSE: n ja AFP: n keskiarvo oli 57.1±31.5, 5.6±2.7, 20.8±2.5, vastaavasti 2, 6±0, 4 yksikään merkkiaineista ei eronnut merkittävästi normaalista vaihteluvälistä (Kuva. 4).

TGF-β1

TGF-β1: n induktio primaaritarkennuksessa aiheutti monissa tapauksissa EMT: n kannalta merkittäviä muutoksia. Siten inalmost 40% adenokarsinooma kasvaimia, CK19-positiivinen ensisijainen focusells indusoitiin menettää CK19 expression ja tehdään EMT byTGF-β1. Tämä osuus kasvaimista oli 28% SCC: llä ja 50% SCLC: llä(Kuva. 5). Näin ollen SCLC: n primaariset fokusellit ovat helpommin indusoitavissa TGF-β1: n EMT: hen. Kuten edellä mainittiin, SCLC: n primaarisoluissa EMT: n taso on korkeampi jopa ilman TGF-β1: n (TableI) induktiota.

toinen joukko EMT: n tärkeitä markkereita on ofe-cadherinin menetys ja vimentinin ilmaisun voitto. E-cadherinin todettiin olevan negatiivinen lähes 37,5%: ssa adenokarsinooman primaarisista kasvainsoluista,52,3%: ssa SCC: n kasvainsoluista ja 22%: ssa SCLC: n kasvainsoluista (Fig. 6) ennen TGF-β1-hoidon aloittamista. Bycontrast, vimentin expression näissä kasvaimissa oli positiivinen 23.2% adenokarsinooma kasvainsolujen, 33.3% SCC kasvainsolujen ja 31.3%SCLC kasvainsolujen (Kuva. 7). TGF-β1: n ensisijaisten keskittymissolujen hoidon jälkeen E-cadherinin ekspression häviö liittyi aina invimentinin ekspression lisääntymiseen (Kuva. 8). SCC-kasvainten prosentuaalinen osuus, joka osoitti tämän vasteen TGF-β1: lle (40% muutos e-cadherinin ilmentymisessä ja 57% vimentinin ilmentymisessä) washigher kuin adenokarsinooman ja SCLC: n osalta (Kuva. 6).

Keskustelu

CK19: n vertaileva ilmentymistila primarylung-syöpäkudoksissa ja keuhkopussin effuusioissa voi olla hyödyllinen arvioitaessa näiden syöpäsolujen metastasoivaa kykyä. Jos potilaan pleuraeffuusiosoluissa on suurempi ck19: n negatiivinen ilmentymä verrattuna saman potilaan primarylung-syöpäkudoksiin, oletetaan, että negatiivinen Ck19-ilmentymä liittyy invaasioon ja etäpesäkkeisiin (19). Näin ollen tässä tutkimuksessa suurella osalla potilaista, joilla oli SCLC-kasvaimia, oli kasvainkudosta, jossa ei ilmennyt CK19: ää, ja näiden potilaiden pleuraeffuusiosoluista puuttui CK19-ilmentymä, mikä osoittaa, että tämäntyyppisessä keuhkosyövässä, joka on SCLC: n tyypillinen ominaisuus (20), oli korkea metastaasi. Ck19-ilmentymän häviämiselle on esitetty useita syitä, kuten muuttunut ilmentymä ja lisääntynyt proteolyyttinen hajoaminen (21).

koska CYFRA21-1 on CK19: n fragmentti, cyfra21-1-pitoisuuksia seerumissa jaleuraalieffuusiossa pidetään tärkeinä maligniteetin merkkeinä monille syöpätyypeille, erityisesti keuhkosyövälle (7,21). Syöpädiagnoosista on kuitenkin vaikea olla varmoja verenkierrossa olevien CYFRA21-1-pitoisuuksien perusteella, koska on keuhkosyöpätapauksia, joissa CYFRA21-1-tasot ovat laskeneet, kun taas muissa tapauksissa ne ovat lisääntyneet (7,21).Kuitenkin nykyisten havaintojen, seerumin CYFRA21-1 tasot laski lisääntynyt mahdollisuus EMT, kuten havaittu byloss ck19 expression pleuraeffuusiot verrattuna thecorvasting primaarikasvainkudokseen. Siten seerumin CYFRA21-1 tasojalong kanssa ck19 expression tila syöpäsolujen primaryfocus ja keuhkopussin effusions voi positiivisesti tunnistaa invaasioon ja etäpesäke kyky keuhkosyöpäsolujen. Muut merkit, kuten CA125, CEA, AFP ja NSE, joita käytetään yleisesti syöpädiagnoosissa, eivät olleet yhdenmukaisia tässä arvioinnissa.

metastasioitumiskyky on annettu EMT: n kautta ensimmäisiin syöpäsoluihin, ja yksi tärkeimmistä tekijöistä, jotka voivat indusoida EMT: tä, on TGF-β1. Vaikka TGF-β1 toimii normaalisti epiteelisolujen proliferaation estäjänä, TGF-β1 tehostaa syöpäsolujen, myös keuhkosyöpäsolujen(22) proliferaatiota monien syöpäsolujen muuntuneiden signalointireittien vuoksi. Syöpäsolujen kasvun tehostamisen lisäksi TGF-β1: n tiedetään edistävän EMT: tä syöpäsoluissa ja siten edistävän syöpäsolujen invaasiota ja etäpesäkkeitä. On esitetty, että primäärikasvainkehityksen alkuvaiheessa epiteelikudoksissa TGF-β1 estääkuumorin kasvua solusyklin pysähtymisen ja apoptoosin kautta (23,24).Kuitenkin, koska kasvaimen etenemistä tapahtuu, aikana myöhemmissä vaiheissa oftumor kehitys, on joko inaktivointi TGF-ß1signaling reitti tai poikkeava säätely solusyklin ja thecancer solut tulevat vastustuskykyisiä kasvun estyminen TGF-β1 (23,24). Näissä olosuhteissa syöpäsolut käyttävät TGF-β1: tä kasvun edistäjänä (25). MRNA: n ja TGF-β1: n proteiinin ilmentyminen oli suuresti koholla monissa syöpätyypeissä, mukaanlukien haima -, paksusuoli -, vatsa -, keuhko -, endometrium -, eturauhas -, rinta -, aivo-ja luu – (26).

koska sytokiinin, kuten TGF-β1: n, käyttöalttiutta EMT: hen lisätään, minkä tiedetään olevan suurentunut keuhkosyöpäpotilailla, tutkimme TGF-β1: n primaaristen fokussolujen Emtinduktiivisuutta ex vivo.Käytetystä EMT-merkkiaineesta riippuen SCLC – ja SCC-kasvaimilla oli suurempi kyky läpikäydä TGF-β1-indusoitu EMT. SCLC: n primaariset fokusellit indusoituvat helpommin TGF-β1: n EMT: hen, jos ck19-ilmentymän häviäminen vähenee. On itse asiassa korkeampi EMT: n aste ck19: n puuttumisen suhteen SCLC: n primaarisissa kasvainsoluissa. Bycontrast, SCC kasvaimen primaarisolut reagoivat menetys e-cadherinand kohonnut vimentin ilmauksia. E-cadherinin alasääntely yhdessä N-cadherinin yläsääntelyn kanssa luonnehtii EMT-prosessia ja nämä muutokset näiden proteiinien ilmentymisessä liittyvät apoptoosin ja anoikisin resistenssin hankintaan (27,28).

yhteenvetona tämän tutkimuksen tulokset viittaavat siihen, että keuhkokasvainsolujen invaasio ja etäpesäke voidaan arvioida ottamalla täydellinen kuva seerumin CYFRA21-1: stä yhdessä primaaritarkennussolujen ck19-ilmentymistilan ja keuhkopussin leikkauksen kanssa. Tätä arviointia voidaan edelleen parantaa tarkastelemalla eristettyjen primaaritarkennussolujen taipumusta gf-β1: n indusoimaan EMT: hen soluviljelmässä.

kiitokset

kirjoittajat haluavat tunnustaa tohtori Yong Chenin ja tohtori Jixin Jiangin teknisen avun.

	Jemal A, Bray F, Center MM, Ferlay J, WardE ja Forman D: Global cancer statistics. CA Cancer J Clin.61:69–90. 2011. Katso artikkeli: Google Scholar: PubMed/NCBI
	Haghgoo SM, Allameh A, Mortaz E, GarssenJ, Folkerts G, Barnes PJ and Adcock IM: Pharmacogenomics andtargeted therapy of cancer: Focusing on non-small cell lung cancer.Eur J Pharmacol. 754:82–91. 2015. Katso artikkeli: Google Scholar: PubMed/NCBI
	Morales-Oyarvide V ja Mino-Kenudson M:High-grade keuhkojen adenokarsinoomat micropapillary ja / tai solidpatterns: tarkastelu. Olen Pahoillani. 20:317–323. 2014.Katso artikkeli: Google Scholar: PubMed/NCBI
	Burdett S, Stewart LA and rydzewska L: asystematic review and meta-analysis of the literature: Chemotherapyand surgery versus surgery alone in non-small cell lung cancer. JThorac Oncol. 1:611–621. 2006. Katso artikkeli: Google Scholar: PubMed/NCBI
	Travis WD: keuhkosyövän patologia. Paras Lääke. 2365–81. (viii) 2002. Katso artikkeli: Google Scholar: PubMed/NCBI
	Bastawisy AE, Azzouny ME,Mohammed G, Allah AA ja Behiry E: Serum cytokeratin 19 fragment in advancedlung cancer: voisimmeko lopulta saada seerumin kasvainmarkkerin?Ecancermedicalscience. 8:3942014.PubMed/NCBI
	Hsieh TC, Huang WW, Lai CL, Tsao SM ja SuCC: Diagnostic value of tumor markers in lungadenocarcinoma-associated cytological negative pleural effusions.Cancer Cytopatol. 121:483–488. 2013. Katso Artikkeli: Google Scholar : PubMed/NCBI
	Liang QL, Shi HZ, Qin XJ, Liang XD, JiangJ ja Yang HB: Diagnostic accuracy of tumour markers for malignantpleural effusion: a meta-analysis. Rintakehä. 63:35–41. 2008.Katso artikkeli: Google Scholar: PubMed/NCBI
	Miedouge M, Rouzaud P, Salama G, et al:Evaluation of seven tumour markers in pleural fluid for thediagnosis of malign effusions. BRJ Syöpä. 81:1059–1065. 1999.Katso Artikkeli: Google Scholar : PubMed/NCBI
	Huang WW, Tsao SM, Lai CL, Su CC ja TsengCE: Diagnostic value of Her-2 / neu, Cyfra 21-1, and carinoembryonicantigen levels in malign pleuraeffusions of lungadenocarcinoma. Patologia. 42:224–228. 2010. Katso artikkeli: Google Scholar: PubMed/NCBI
	Riantawan P, Sangsayan P, Bangpattanasiirik ja Rojanarawewong P: keuhkopussin fluidikarcinoembryonisen antigeenitason rajoitettu lisäarvo pahanlaatuisessa pleuraeffuusiossa.Hengitys. 67:24–29. 2000. Katso Artikkeli: Google Scholar : PubMed/NCBI
	Hey ED: mesenkymaalisolu, sen rooli alkiossa ja merkittävät signalointimekanismit, jotka luovat sen.Dev Dyn. 233:706–720. 2005. Katso artikkeli: Google Scholar: PubMed/NCBI
	Guarino M, Micheli P, Pallotti F ja Giordano F: epiteelin ja mesenkymalfenotyypin plastisuuden patologinen merkitys. Pathol Res Pract. 195:379–389. 1999.Katso artikkeli: Google Scholar: PubMed/NCBI
	Guarino M, Rubino B ja Ballabio G: Epiteelin-mesenkymaalin siirtyminen syöpäpatologiassa.Patologia. 39:305–318. 2007. Katso artikkeli: Google Scholar: PubMed/NCBI
	Chunhacha P, Sriuranpong V andChanvorachote P: Epiteelis – mesenkymaalinen siirtymämediatesanoikis resistenssi ja parantaa invaasiota keuhkopussin johdetuissa ihmisen keuhkosyöpäsoluissa. Onkol Lett. 5:1043–1047.2013.PubMed/NCBI
	Kosacka M ja Jankowska R: Vertailu cytokeratiini 19 expression tuumorikudoksessa ja seerumin CYFRA 21–1 tasot ei-pienisoluisessa keuhkosyövässä. Pol Arch Med Wewn. 119:33–37.2009.PubMed/NCBI
	Xu GP, Li QQ, cao XX, Chen Q,Zhao ZH, Diao ZQ ja Xu ZD: TGF-β1: n ja Smad7: n geeninsiirron vaikutus rotan alveolaaristen epiteelisolujen fenotyyppisiin muutoksiin. Cell MolBiol Lett. 12:457–472. 2007. Katso artikkeli: Google Scholar: PubMed/NCBI
	Romero S, Fernández C, Arriero JM, EspasaA, Candela a, Martín C ja Sánchez-Payá J: Cea, CA 15–3 ja CYFRA21-1 seerumissa ja pleuranesteessä potilailla, joilla on pleuraeffuusioita.EUR Respir J. 9:17-23. 1996. Katso artikkeli: Google Scholar: PubMed/NCBI
	Fujisue M, Nishimura R, Okumura Y, TashimaR, Nishiyama Y, Osako T, Toyozumi Y ja Arima N: Ck19-negatiivisen rintasyövän kliininen merkitys. Syöpätaudit (Basel).5:1–11. 2012. Katso artikkeli: Google Scholar: PubMed/NCBI
	Pietanza MC, Byers LA, Minna JD ja RudinCM: pienisoluinen keuhkosyöpä: Johtaako viimeaikainen edistys paranemaan? Clin Cancer Res. 21: 2244-2255. 2015. Katso artikkeli: Google Scholar: PubMed/NCBI
	Ono a, Takahashi T, Mori K,Akamatsu H, Shukuya T, Taira T, Kenmotsu H, Naito T, Murakami H, Nakajima T, etal: Prognostic impact of serum CYFRA 21-1 in patients with advancedlung adenocarcinoma: a retrospective study. BMC-syöpä. 13:3542013.Katso artikkeli: Google Scholar: PubMed/NCBI
	Bachman ke ja Park BH: Duel luonto ofTGF-beta signalointi: Tuumorisuppressori vs. kasvaimen promoottori. Curr OpinOncol. 17:49–54. 2005. Katso artikkeli: Google Scholar: PubMed/NCBI
	Wakefield lm and Roberts AB: TGF-ßsignaling: positive and negative effects on tumorigenesis. CurrOpin Genet Dev. 12:22–29. 2002. Katso artikkeli: Google Scholar: PubMed/NCBI
	Akhurst RJ ja Derynck R: TGF-β signalingin syöpä – kaksiteräinen miekka. Trends Cell Biol. 11: S44–S51.2001. Katso artikkeli: Google Scholar: PubMed/NCBI
	Jakowlew SB: Transforming growthfactor-beta syövän ja etäpesäkkeiden. 25:435-457. 2006. Katso artikkeli: Google Scholar: PubMed/NCBI
	Gold LI: rooli muuntamisessa growthfactor-beta (TGF-beta) ihmisen syöpä. Crit Rev Oncog. 10:303–360.1999.PubMed/NCBI
	Guadamillas MC, Cerezo A ja Del Pozo MA: voittaminen anoikis-pathways to anchorage-independent growth incancer. J Cell Sci. 124:3189–3197. 2011. Katso Artikkeli: Google Scholar : PubMed/NCBI
	Ko H, Kim S, Jin CH, Lee E, Ham s, Yook JIand Kim K: Proteiinikinaasikinaasi 2-välitteinen n-cadherinin säätely antaa anoikis-resistenssin ruokatorven karsinomaselleihin. Mol Cancer Res. 10: 1032-1038. 2012. Katso artikkeli: Google Scholar: PubMed/NCBI