Koliiniasetyylitransferaasi (ChAT) on entsyymi, joka vastaa asetyylikoliinin välittäjäaineen biosynteesistä. Suurin osa asetyylikoliinista syntetisoidaan paikallisesti hermopäätteissä, joissa ChAT katalysoi asetyyliryhmän siirtymistä asetyylikoentsyymi-A: sta koliiniin, mikä tapahtuu yhdessä vaiheessa. Chatin ilmentävät keskushermoston (CNS) ja ääreishermoston (PNS) kolinergiset hermosolut (4), jotka jakautuvat useille eri alueille aivoissa, selkäytimessä ja verkkokalvossa ja osallistuvat oppimiseen, muistiin, liikkumiseen ja näkemiseen (2,4).
immunohistokemia vapaasti kelluva: Koliiniasetyylitransferaasi / ChAT – vasta-aine-IHC rotan selkäytimessä käyttäen kanin vasta-ainetta rotalle, hiiren ChAT (koliini-O-asetyylitransferaasi): Koko seerumi 1: 2000 laimennoksessa. Vasta-aineen esiabsorptio immunisoivalla peptidillä poistaa immunostisoivan aineen kokonaan (ei näy).
lisätietoja Hermomarkkereista
chatin vasta-ainevärjäystä käytetään usein kolinergisten solupopulaatioiden morfologisissa tutkimuksissa. Esimerkiksi nisäkkäiden verkkokalvossa ChAT ilmaistaan sekä amakriini-että gangliosolujen osajoukoilla (2). Nämä ChAT-positiiviset hermosolupopulaatiot voidaan tunnistaa Anti-ChAT-vasta-aineiden avulla immunohistokemiallisten (IHC) määritysten yhteydessä. Verkkokalvossa chatin IHC tuottaa tunnusomaisen kaksoisvärjäyskuvion sisempään pleksikerrokseen, jossa kolinerginen amakriini ja hermosolun dendriitit muodostavat kaksi erillistä synaptista Kerrosta (2). Yhtä Novus ChAT-vasta-ainetta on käytetty mitattaessa kolinergisten solujen eloonjäämistä nisäkkään verkkokalvossa proteiinikinaasin eston jälkeen hiiritautimalleissa (1). Novus ChAT-vasta-aineita on myös käytetty useissa soluviljelyjärjestelmissä kolinergisten neuronien erilaistumisen ja eloonjäämisasteiden arvioimiseen erilaisten manipulaatioiden jälkeen. Esimerkiksi Novus-vasta-ainetta (NBP1-30052) on käytetty erilaistuneiden kolinergisten neuronien tunnistamiseen solututkimuksissa, joiden tarkoituksena on määritellä viljelyyn perustuva kokeellinen järjestelmä, joka ei ole riippuvainen primaarisista neuroneista (3). Kun taas toista Novus Anti-ChAT-vasta-ainetta (NB110-89724) käytettiin kolinergisten neuronien eloonjäämisen laadulliseen arviointiin selkäytimen räjähdyksissä (5).
Novus Biologicals tarjoaa ChAT-reagensseja tutkimustarpeisiisi mm.:
- ChAT-vasta-aineet
- ChAT-lysaatit
- ChAT-proteiinit
- ChAT-RNAi
PMID:
- 21498608
- 9786999
- 23095258
- 10594838
- 23674184
- Burugula, B., Ganesh, B. S., and Chintala, S. K. (2011). Kurkumiini vaimentaa staurosporiinivälitteistä kuolemaa verkkokalvon ganglionisoluissa. Invest Ophthalmol Vis Sci 52, 4263-4273.
- Jeon, C. J., Strettoi, E., and Masland, R. H. (1998). Hiiren verkkokalvon tärkeimmät solupopulaatiot. J Neurosci 18, 8936-8946.
- Liu, J., Tu,H., Zhang, D., Zheng, H., and Li, Y. L. (2012). Jännitteellä varustettu natriumkanavailmaisu ja toimintapotentiaali erilaistuneissa ng108-15-soluissa. BMC Neurosci 13, 129.
- Oda, Y. (1999). Koliiniasetyylitransferaasi: keskushermoston rakenne, jakautuminen ja patologiset muutokset. Pathol Int 49, 921-937.
- Schizas, N., Rojas, R., Kootala, S., Andersson, B., Pettersson, J., Hilborn, J., and Hailer, N. P. (2014). Hyaluronihappopohjainen hydrogeeli parantaa hermosolujen selviytymistä selkäytimen viipaleviljelmissä syntymänjälkeisistä hiiristä. J Biomater Appl 28, 825-836.