vaikka suurin osa pienten märehtijöiden klamydiainfektioita koskevasta työstä koskee uuhia, klamydioosilla on taloudellisia ja kansanterveydellisiä vaikutuksia lukuisilla vuohitiloilla ympäri maailmaa. Klamydiabortteja raportoitiin ensimmäisen kerran Saksassa vuonna 1959.Sen jälkeen tauti diagnosoitiin Bulgariassa, Espanjassa, Yhdysvalloissa, Ranskassa, Intiassa, Japanissa, Isossa-Britanniassa, Tšadissa, Kreikassa ja Tunisiassa. Monilla alueilla klamydiabortti on toinen tartuntatautien aiheuttaja luomistaudin jälkeen, ja pääsyy useimmissa maissa, joissa luomistauti on hallinnassa
etiologia
tauti johtuu pienestä Gramnegatiivisesta bakteerista Chlamydia psittaci, joka kasvaa eukaryoottisolujen sytoplasmassa ainutlaatuisessa kehityskaaressa, jossa resistentti tarttuva muoto, alkeiselimet (EB) vuorottelevat metabolisesti aktiivisen ei-tarttuvan muodon reticulate body (RB) kanssa. EB kiinnittyy isäntäsolun kalvoon ja edistää omaa endosytoosiaan membraanirajoitetussa vakuolissa, jota kutsutaan inkluusioksi, joka ei sulaudu lysosomeihin. Tämän jälkeen EB muuntuu RB: ssä, joka replikoituu binäärisellä fissiolla. Useiden jakojen jälkeen RBS, joka täyttää kaikki sisällyttäminen, muuntuu takaisin tarttuva EBs. Nämä EBs vapautuu isäntäsolun lyysin tai ekstruusiolla sisällyttämistä ulos isäntäsolusta .
taksonomia
Chlamydia psittaci on yksi klamydian suvun neljästä lajista, johon kuuluvat myös Chlamydia trachomatis, Chlamydia pneumoniae ja Chlamydia pecorum.
Chlamydia trachomatis ja Chlamydia pneumoniae ovat molemmat ihmisen taudinaiheuttajia. C. psittaci tartuttaa monenlaisia lintuja, nisäkkäitä ja satunnaisesti ihmisiä ja C. pecorum saastuttaa märehtijöitä, sikoja ja koaloja. Uuhilla ja vuohilla C. pecorum aiheuttaa keuhkokuumetta, sidekalvontulehdusta ja niveltulehdusta, mutta on hyvin usein eristetty oireettomista suolistotulehduksista .
hyvin harvoja tapauksia lukuun ottamatta raskaudenkeskeytystä vuohilla aiheuttavat kannat kuuluvat C. psittaci-serotyyppiin 1, joka aiheuttaa myös keuhkokuumetta, sidekalvontulehdusta ja niveltulehdusta sekä joskus suolistoinfektioita, joilla ei ole kliinisiä oireita. C. psittaci-laji on hyvin heterogeeninen ja ennen neljättä lajia C. pecorum ilmestyi.
16s-ja 23s-rRNA-geenien fylogeneettiset analyysit viittaavat siihen, että Klamydiaceae-ja lead Everett et al., ehdottaa kahden uuden suvun klamydia ja Chlamydophila luomista. Sukuun ”Chlamydia”, joka vastaa vanhaa Chlamydia trachomatis-nimitystä, kuuluu 3 lajia: C. trachomatis (ihmisen kannat), C suis (sikakannat, jotka ovat sukua C. trachomatis-bakteerille ja jotka on eristetty spontaaneista aborteista, emätintulehduksista ja pneumoniae-bakteereista) ja C. muridarum (hiiri-hamsteri-kannat).
Chlamydophila-sukuun kuuluu 6 lajia: C. pneumoniae, C. pecorum, C. psittaci (aikaisemmat Chlamydia psittaci-lintukannat), C. caviae, Guinea inclusion sidekalvotulehdus (gpic), C. felis (C. psittaci-kannat, jotka infektoivat kissoja) ja C. abortus (klassinen serotyyppi-1 Chlamydia psittaci-kanta). Tulokset ovat yhtäpitäviä viiden muun koodaavan geenin (GroEL, KDO-transferaasi, MOMP, 60-kDa kysteiinipitoinen proteiini ja kysteiinipitoinen lipoproteiini) ja kantojen biologisten ominaisuuksien fylogeneettisten analyysien kanssa . 16S-23s rRNA-geenien ribosomaalisen intergeenisen spacer domeenin restriction length polymorphism analysis (RFLP) tarjoaa nopean ja toistettavan menetelmän klamydiakantojen tunnistamiseksi ja luokittelemiseksi uudessa lajissa . Osa tiedeyhteisön jäsenistä ei kuitenkaan kannata ehdotusta uudesta Klamydiataksonomiasta, koska siinä ei oteta huomioon bakteerin koko perimää.
kliiniset oireet
Klamydioosi on kliinisesti tunnettu raskauden viimeisten kuukausien aikana tehdystä raskaudenkeskeytyksestä, kuolleena syntyneistä lapsista tai heikkojen ja pienipainoisten lasten ennenaikaisesta synnytyksestä. Abortit tapahtuvat ilman aikaisempia kliinisiä erityisiä oireita, vaikka jotkut vuohet voivat kehittää jatkuvaa yskää ilman hengenahdistusta, tai niveltulehdus ja keratokonjunktiviitti. Kokeellisissa infektioissa joillakin vuohilla havaittiin lievää valkovuotoa aborttia edeltävänä päivänä . Säilyneet istukat ja kohtutulehdus eivät ole tavanomaisia, vaikka ne ovat yleisempiä kuin uuhilla . Abortin jälkeen vuohet voivat toipua nopeasti tai saattaa aiheuttaa ruskeaa eritettä emättimestä. Kokeellisissa infektioissa tai joissakin luontaisissa infektioissa, joissa aborttien määrä on suuri, vain 50 prosenttia tai vähemmän abortoiduista vuohista, toipui nopeasti, kun taas keskenmenon jälkeinen sairaus uuhissa on epätavallista. Tämä voi johtua kantojen välisistä virulenssieroista, sillä kantojen virulenssimekanismeista tiedetään hyvin vähän. Hiirimalleissa ei voitu osoittaa eroa virulenssissa lammas-ja vuohikantojen välillä , mutta amplified fragment length polymorphism (aflp) paljasti genomieroja vuohikannan AC1 ja lampaan serotyyppi-1 C. psittaci-kantojen välillä .
vaikka olemme osoittaneet , että tartunnan saaneiden vuohien hoitaminen voi aiheuttaa tartunnan saaneita naaraita, toistaiseksi ei ole kuvattu C. psittaci-bakteerin aiheuttamaa lisäkivestulehdusta. Tämä johtuu todennäköisesti vuohen klamydioosia koskevien tutkimusten hyvin vähäisestä määrästä sen sijaan, että pässit ja sonnit olisivat alttiimpia klamydiainfektioille.
vasta tartunnan saaneessa parvessa aborttien määrä on vakava. Usein 30 prosenttia tai enemmän, joskus 90 prosenttia raskaana olevista saattaa keskeyttää raskauden ja maidontuotanto voi vähentyä. Suuri määrä abortteja havaitaan 2 tai 3 vuotta, jonka jälkeen tauti on syklinen luonne: 10% raskaana olevista naisista keskeyttää vuosittain useita vuosia, kunnes uusi puhkeaa ja sitten kaikki vuosilapset keskeyttävät. Abortin jälkeen syntynyt korkea immuniteettitaso on vastuussa taudin syklisestä kehityksestä laumassa: on poikkeuksellista, että vuohi keskeyttää kahdesti. Papp ja Shewen ovat osoittaneet, että jotkut uuhien että abortoitu voi tulla kroonisesti tartunnan. Klamydia antigeenejä ja DNA voidaan havaita emättimessä, kohtu ja kohdun putket aikana peri-ovulaatio aikana uuhien että keskeytetty. Kroonista infektiota ei ole tutkittu vuohilaumoissa.
sikiöllä ei ole erityisiä makroskooppisia leesioita. Lapset toimitetaan lähellä aikavälillä voidaan kattaa ruskea Materiaali. Usein havaitaan kirkasta tai veren tahrimaa diffuusia turvotusta , veren tahrimia nesteitä vatsa-ja keuhkopussin onteloissa sekä petekioita kielessä, suuontelossa ja sorkissa.
taudin tarttuminen
tartunnan saaneet erittivät suuria määriä klamydiaa istukassa ja sikiön nesteissä leikkihetkellä ja abortin yhteydessä. Jotkut vuohet voivat vuodattaa klamydiaa emättimen nesteissä yli kahdesta viikosta ennen aborttia yli kahteen viikkoon abortin jälkeen. Tämä saattaa selittää raskaudenkeskeytysten lisääntymisen juuri tartunnan saaneissa vuohilaumoissa, sillä infektioalttius vaihtelee suhteessa eläimen fysiologiseen tilaan. Vuohet, joiden tiineys on alle 100 päivää, ovat alttiimpia kuin tiineyden lopussa olevat vuohet tai karut vuohet. Pienempiä määriä klamydia voi myös irtoa virtsaan, maitoon ja ulosteeseen useita päiviä abortin jälkeen.
tartunnan saaneista emoista syntyneet nuoret vuohet voivat säilyttää tartunnan karjassa tai siirtää sen muihin karjoihin. Tutkimus, joka tehtiin 27-vuotiaalle ryhmälle tartunnan saaneessa laumassa niiden ensimmäisenä elinvuotena, osoitti, miten ne voivat levittää tautia, jos niiden serologinen vaste ei osoita niitä. Nämä nuoret vuohet voidaan jakaa 3 ryhmään tiineyden/synnytyksen mukaan. Ensimmäinen ryhmä poiki normaalisti elävän poikasen, toinen ryhmä oli hedelmätön tai oli tehnyt raskauden liian aikaisin havaittavaksi ja kolmannessa ryhmässä vuohet olivat tehneet Abortin. Kahden ensimmäisen ryhmän komplementtikiinnitys (CF) – vasta-aineet lisääntyivät maksimiin (1/80-1/160) jalostushetkellä, sitten vasta-ainetasot laskivat pelleilyhetkeen asti . Kolmannella ryhmällä oli CF-vasta-ainetitteri rooli urosten sukupuolitautitartunta on vielä tutkittava. Pässien ja sonnien sukupuolielinten infektiot johtavat kuitenkin miesten hedelmättömyyteen ja hedelmättömyyteen sen sijaan, että naiset tekisivät Abortin. On tutkittava, mikä on taudin rooli avoimessa suolistotulehduksessa ja miten se vaikuttaa klamydiaborttien epidemiologiaan. Vuohien suolistokantojen molekyylimarkkerien äskettäinen tunnistaminen mahdollistaisi tällaiset tutkimukset.
diagnoosi
diagnoosi tehdään yleensä toteamalla bakteerit istukasta tehdyistä sivelyistä tai vaikutelmista yhdistettynä vähintään kymmenen seeruminäytteen serologiseen analyysiin.
klamydian värjääminen leima -, Gimenez-tai Machiavello-menetelmillä on nopeaa ja onnistuu useimmissa laboratorioissa helposti, mutta sen tulkinta on usein hankalaa, koska se vaatii kokenutta henkilöä erottamaan klamydian Brucellasta ja Coxiellasta. Immunofluoresenssi käyttämällä immunoglobuliinikonjugaatteja, jotka on merkitty fluoresoivalla isotiosyanaatilla, lisää klamydian havaitsemisen herkkyyttä ja spesifisyyttä smeareissa tai istukan vaikutelmissa.
klamydiaantigeenien esiintyminen maassa olevissa istukoissa tai vaginanäytteissä, joista on otettu näyte heti abortin jälkeen, voidaan todeta ELISA-menetelmällä ihmisen C. trachomatis-infektiota varten kehitetyillä diagnostiikkasarjoilla .
ihmislääketieteessä polymeraasiketjureaktiota (PCR) tai sen muunnelmaa, ligaasiketjureaktiota (LCR) pidetään herkimpänä klamydian diagnosointiin käytettävissä olevana diagnostisena menetelmänä. Useita primers yhteisiä kaikille klamydia, kuten Omp1, geeni koodaus tärkein ulompi kalvo proteiini , tai spesifinen C. psittaci tai C. pecorum tai serotyyppi-1 C. psittaci kantoja on kehitetty eläinlääkinnällisiin sovelluksiin. Mutta tämä tekniikka on edelleen kallista.
komplementinsitoutumistesti (CFT) on yleisimmin käytetty ja sitä pidetään kultakantana serologisessa diagnosoinnissa. CFT ei kuitenkaan ole kovin herkkä eikä spesifinen, koska testissä käytetään C. pecorumin kanssa yhteistä antigeenia i, jota useimmat vuohet hautovat suolessaan. Siksi positiiviset reaktiot tittereillä 1:10-1: 40 eivät ole erityisiä abortin suhteen, mutta ne voivat liittyä C. pecorum-bakteerin aiheuttamaan suolistotulehdukseen. CFT-testi olisi mieluiten tehtävä 3-6 viikkoa abortin tai karitsoinnin jälkeen, kun vasta-ainevaste on maksimitasollaan. CFT-testiä ei voida käyttää yksilöllisen diagnoosin tekemiseen tai infektion toteamiseen nuorilla tai miehillä .
yritettiin kehittää useita tarkempia tekniikoita, jotka erottaisivat C. psittaci-ja C. pecorum-infektiot toisistaan. Mikään näistä testeistä ei kuitenkaan ollut riittävän herkkä ja spesifinen. Äskettäin on kehitetty uusi epäsuora entsyymi – immunologinen määritys (ELISA), joka perustuu rekombinantti – antigeeniin, joka ilmentää osaa 80-90 kDa: n proteiinista . Testi reagoi seerumin vasta-aineiden kanssa, joita syntyy varhain näitä erittäin immunogeenisia monigeenisiä perheen proteiineja vastaan . Tällä testillä on suuri herkkyys ja suuri spesifisyys .
hoito
tetrasykliinit vaikuttavat klamydian replikaatioon ja voivat estää tehokkaasti abortteja. 20 mg/kg oksitetrasykliiniä lihaksensisäisenä injektiona 105 ja 120 päivän raskauden aikana voi estää abortin, mutta ei voi estää klamydian irtoamista laskettaessa.
rokotus
tapetut rokotteet voivat vähentää keskenmenojen ilmaantuvuutta, mutta eivät klamydian eritystä laskettaessa. Abortti indusoi riittävän vahvan immuniteetin kestääkseen myöhemmät haasteet, kehitettiin elävä rokote, joka koostui lämpötilalle herkästä C. psittaci-kantojen mutantista . Taudille alttiit vuohet rokotettiin ennen parittelua, eikä niiden havaittu häiritsevän myöhempää tiineytystä. Vuohet suojattiin klamydiaborteilta ja klamydian irtoaminen kidutuksessa estettiin. Kuitenkin, kun kaikki tartunnan saaneen lauman vuohet rokotetaan ensimmäisenä vuonna ja kaikki korvaavat eläimet rokotetaan seuraavina vuosina, voi kestää noin 3 vuotta ennen kuin abortit loppuvat. Tämä johtuu piilevästä infektiosta vuohissa, vuohissa, jotka olivat saaneet tartunnan ennen rokotusta, mutta eivät olleet abortoineet. Rokotus ei muuta piilevän infektion kulkua. Nämä vuohet voivat keskeyttää keskenmenon tai voi pentu terve tai tartunnan kid aikavälillä ja voi tai ei voi aiheuttaa klamydia. Niin kauan kuin laumassa on vuohia, joilla on piilevä infektio, rokottamista ei kannata lopettaa (tai muuten abortti aloitettaisiin uudelleen), eikä rokotettuja eläimiä voida myydä, lukuun ottamatta kasvattajia, jotka rokottavat laumaansa säännöllisesti.
tulevaisuudennäkymät
sellaisen rokotteen kehittäminen, joka olisi yhtä tehokas kuin mainittu elävä rokote ja joka suojaisi tartunnan saaneita vuohia ja mahdollistaisi serologisen toteamisen rokotetuissa parvissa, olisi erittäin hyödyllistä taudin torjunnassa. Elävästä rokotteesta peräisin olevan” diagnosointispesifisen antigeenin ” ehtyminen ei ole tällä hetkellä vaihtoehto, koska sopivia geneettisiä ja molekyylimenetelmiä ei ole vielä saatavilla ja tämän proteiiniperheen poistaminen vaikuttaa vaikealta. Näistä syistä aborteilta ja erittymiseltä suojaava soluton rokote olisi kiinnostava. Aiemmat tutkimukset ovat osoittaneet sekä T-että B-lymfosyyttien osallistuvan suojaavaan immuniteettiin . Hiirimalleissa CD8+ T-soluilla (lyt 2 + hiirellä) on merkittävä rooli suojautumisessa pohjustettujen pernasolujen siirron jälkeen . Tähän mennessä C. psittaci T-solujen antigeenejä ja epitooppeja ei tunneta. Vaikka C. trachomatis-bakteerin tulosten ekstrapoloinnissa C. psittaciin on noudatettava varovaisuutta, C. trachomatis major outer membrane protein (momp)
hiirillä on todettu useita T-solujen epitooppeja vasta-aineiden rooli C. psittaci-bakteerin aiheuttaman istukka-ja sikiöinfektioiden ehkäisyssä. Spesifisten polyklonaalisten seerumien passiivinen siirto saa aikaan merkittävän immuniteetin, joskin t-soluvälitteistä suojaa heikomman . Monoklonaaliset vasta-aineet (Mabs), jotka neutraloivat C. psittaci infektiivisyys in vitro antaa merkittävän immuniteetin tiineille hiirille suonensisäisen haasteen jälkeen, koska abortti ja sikiön kolonisaatio on eliminoitu . Humoraalinen koskemattomuus liittyy suojautumiseen. Sen tehokkuus riippuu spesifisten vasta-aineiden pitoisuudesta sopivaa epitooppia vastaan. Kaikki tähän mennessä eristetyt suojaavat Mabit reagoivat mompoligomeerilla sijaitsevien lämpöherkän konformaation epitooppien kanssa .
näin ollen momp-oligomeeri voi olla mahdollinen rokotekomponentti . Tämän antigeenin valmistaminen klamydiasta uuttamalla ei kuitenkaan ole mahdollista, koska tuotantokustannukset ylittäisivät huomattavasti sen, mitä viljelijä pitäisi edullisena vuohi-tai lammasrokotetta varten. Sen vuoksi on tutkittava vaihtoehtoisia rokotteen valmistusmenetelmiä.
rekombinantti MOMP-oligomeerin muodostus voi olla vaikeaa. MOMPIA koodaava geeni Omp1 on hyvin tunnettu, mutta täyspitkän geenin korkea ilmentyminen sääntelemättömästä promoottorista on myrkyllistä E. coli-bakteerille. Tästä syystä tehtiin erilaisia kokeilustrategioita suojaavien epitooppien tuottamiseksi. Yritimme matkia suojaavia epitooppeja monoklonaalisilla anti-idiotyyppisillä vasta-aineilla tai konformaatiorajoitteisella peptidimimotoopilla, mutta mikään niistä ei ollut tehokas. Päätimme arvioida hiirten rokottamisen DNA-rokotteella DNA-rokotuksena MOMP-geenillä suojatut hiiret C. trachomatisia ja kalkkunat C. psittacia vastaan . Tähän asti on saatu vain osittainen suoja, mutta lisätutkimuksia (kohdegeeni, DNA: n pitoisuus, rokotusreitti jne.) on tarpeen tietää, voitaisiinko hiiriä suojata DNA-rokotteella yhtä tehokkaasti kuin elävää rokotetta.