Abstrakti
olemme käyttäneet kaksivaiheista kloonista viljelyjärjestelmää osoittaaksemme yksiselitteisesti, että yksittäiset primitiiviset lymfohemopoieettiset progenitorisolut kykenevät erilaistumaan joko myelooista tai b-lymfaattista sukua pitkin. Pitkälle rikastetut hiiren luuydinsolut pinnoitettiin yksilöllisesti viljelmässä mikromanipulaatiolla mitogeenillä stimuloidun pernasolukäsitellyn väliaineen, erytropoietiinin, terästekijän (SF) ja interleukiinin (IL) läsnä ollessa 7. Yksiköistä 45 prosenttia muodosti primaarisia pesäkkeitä, jotka ilmaisivat useita hemopoieettisia sukulinjoja. Kun yksittäisten pesäkkeiden aliquotit toistettiin SF: ää ja IL-7: ää sisältävässä sekundaarisessa metyyliselluloosaviljelmässä, 41% primaarisista pesäkkeistä synnytti lymfosyyttipesäkkeitä. Lymfosyyttipesäkkeiden solut olivat blastityyppisiä ja B220+, sIg -, Mac-1 -, Gr-1 -, Ly-1 -, L3T4 -, ly-2-ja CD3 -. 30-70% soluista oli Thy-1+. mu-ketjun mRNA havaittiin useimmissa soluissa in situ-hybridisaatiolla antisense-RNA-luotaimen kanssa. Kun yhdestä solusta johdetut lymfosyyttipesäkkeet yhdistettiin ja ruiskutettiin erikseen scid-hiiriin, luovuttajatyypin IgM oli mitattavissa hiirten seerumissa ja perna sisälsi luovuttajatyypin B-soluja. Tämän jälkeen teimme kasvutekijöiden alustavan seulonnan tunnistaaksemme kasvutekijät, jotka saattavat korvata pokeweedin mitogeenillä stimuloidun pernasolukäsitellyn väliaineen primaariviljelmässä. Kahden tekijän yhdistelmät, joihin kuuluivat SF ja IL-6, IL-11 tai granulosyyttikasvutekijä, olivat kaikki primaariviljelmässä tehokkaita B-lymfoidipotentiaalin ylläpitämisessä. Mielenkiintoista on, että IL – 3 ei voinut korvata eikä toimia synergistisesti SF: n kanssa primaariviljelmien lymfaattisen potentiaalin tukemiseksi. Havaintomme osoittavat, että monet primitiiviset kantaisät, joiden on aiemmin uskottu olevan myeloidisia, omaavat myös B-lymfaattisen potentiaalin. Tämän viljelyjärjestelmän pitäisi osoittautua hyödylliseksi lymfohemopoieesin alkuvaiheita säätelevien mekanismien selventämiseksi.