Microscopía de inmunofluorescencia directa
En la microscopía de inmunofluorescencia directa (DIF), se puede observar CBs en aproximadamente el 10% de las biopsias de piel. Pueden verse como cuerpos dispersos o agrupados en la epidermis, a lo largo o debajo de la unión dérmico–epidérmica (DEJ), con o sin otros hallazgos positivos de DIF . Ha habido estudios extensos en el pasado que han demostrado depósitos inmunorreactantes en CBs en una amplia variedad de enfermedades. Todos los tipos de subclases de inmunoglobulina (Ig) como IgG, IgA, IgM, componentes del complemento (C3) y fibrinógeno se pueden demostrar en CBs, pero IgM es el depósito inmunorreactor más común en LP, penfigoide ampolloso y eritema multiforme.
Fotomicrografía de inmunofluorescencia directa (DIF) que muestra depósitos globulares agrupados grandes reactivos de IgM ( ++ ) (cuerpo civatte) en la dermis papilar (anti-IgM, ×400)
La presencia de CBs solo o en combinación con otros depósitos inmunorreactantes en DEJ puede ayudar a diferenciar las enfermedades que a veces presentan características solapadas, por ejemplo, LP y DLE. En estos casos clínica e histopatológicamente equívocos, es necesario concentrarse en el CBs en el examen DIF de biopsias de piel. Siempre es importante tener en cuenta el número de CBs (pocos vs.numerosos); su ubicación (epidermis vs. dermis papilar); su disposición (dispersos individuales vs. agrupados); depósito inmunorreactante (IgM u otros), número (único vs. combinado) e intensidad (más brillante vs. tenue) de varios inmunorreactantes positivos en CBs. La presencia de hallazgos de inmunofluorescencia positivos adicionales junto con CBs en la misma biopsia ayuda aún más a confirmar un diagnóstico final, por ejemplo, depósitos de fibrina/Ig granulares lanudos en el DEJ y los vasos sanguíneos superficiales (SBVs). Por lo tanto, es importante observar la lámina del DIF en su conjunto, teniendo en cuenta las características clínicas e histopatológicas.
Las características que están más a favor de LP incluyen las siguientes: CBs solo sin ningún otro hallazgo de inmunofluorescencia positivo, CBs numerosos en número, CBS dispuestos en grupos de 10 o más en la dermis papilar, CBs mostrando una intensidad más brillante para IgM junto con positividad para una combinación de varios tipos de inmunorreactantes (observados en el 55% de los casos), a veces involucrando más de 3 inmunorreactantes (22% de los casos) y una combinación de deposición de fibrina en el DEJ. Generalmente hay una ausencia de depósitos de Ig granulares en DEJ y SBVs. En este caso, el punto destacable es que algunos casos de LP no muestran ningún CB, y esto puede deberse a la fagocitosis de estos cuerpos apoptóticos en lesiones más antiguas. No hay diferencia estadísticamente significativa en el rendimiento positivo de DIF entre las muestras derivadas de lesiones cutáneas y de lesiones orales.
Sin embargo, en lesiones de LE, la presencia de CBs junto con depósitos en DEJ y SBVs es más común. Es probable que las lesiones de LE contengan depósitos de Ig y C3 en el DEJ. Si está presente IgM, hay una alta probabilidad de que el paciente tenga LE. Aunque la deposición de C3 ocurre con más frecuencia en LE que en LP, su presencia tiene un valor diagnóstico bajo. El patrón de tinción visto en el DEJ en LE es más probable que sea una banda granular, ancha y discontinua, pero puede ser lisa y continua. También pueden estar presentes depósitos de fibrinógeno, y se puede observar o no la tinción de CBs con Igs, C3 y/o fibrinógeno.