Como Ana más tarde se convertiría en reina de España, Isabel se convirtió de manera similar en reina de Francia a través de su matrimonio. Ana fue mucho más afortunada en su matrimonio cuando se trataba de disfrutar de un afecto mutuo entre ella y su esposo/tío Felipe II, así como de dar a luz a cinco hijos, pero Isabel también era muy aficionada a su propio esposo Carlos IX de Francia. Aunque Carlos IX era respetuoso con ella en la forma en que interactuaba con ella, mantuvo abiertamente una amante (con la que más tarde engendró un hijo), Isabel aún amaba besarlo en público, ganándose el ridículo de la corte francesa. Y sin embargo, este matrimonio también resultó en un niño, pero desafortunadamente para la sucesión francesa, este niño era una niña que moriría joven.
Con la mejor suerte de la hermana mayor Anna en la producción de descendencia vino un golpe de desgracia cuando se trataba de la supervivencia de dicha descendencia. En vida, vería morir a dos de sus cuatro hijos, y un tercero perecería después de su fallecimiento (Ana, presumiblemente, murió de gripe en Portugal después de que su esposo Felipe II hubiera ganado el trono allí). Su hija, nieta y bisnieta del emperador Carlos V, tampoco sobreviviría a su madre por mucho tiempo. La pequeña María había recibido el nombre de su abuela, que también era la hermana amada de su padre, pero su vida no iba a ser tan larga como la de la emperatriz viuda (en el momento de la muerte de Ana) María de España.
Sin embargo, Ana y Isabel no fueron las únicas hijas entre María y Maximiliano II. La pareja tendría cuatro hijas más, dos de las cuales llevarían el nombre de María, pero que no sobrevivirían a la infancia, y una llamada por Leonor, la tía paterna de María y Maximiliano (hermana de Fernando y Carlos V). Leonor moriría a los casi doce años de edad, dejando solo a Margarita, presumiblemente llamada así por la tía de Carlos V y la figura materna de su vida Margarita de Austria. (También la tía de Fernando, pero apenas la conocía por haber nacido en España en lugar de en los Países Bajos donde era institutriz.)
Margarita es la nieta que más se parece a los rasgos habsburgo de Carlos V, ya que los ve exagerados en su apariencia como lo harían en los descendientes de Felipe su sobrino (Ana y el hijo de Felipe II). María se llevó a su hija Margarita con ella a España cuando deseaba retirarse algunos años después de la muerte de Maximiliano. Ella había dicho que haría que su hijo sobreviviente más pequeño (Eleonor había sido el más joven en general) se convirtiera en monja; algo en lo que su piadosa hija también estaba interesada. Luego vino la propuesta de matrimonio de Felipe II con ella después de la muerte de Ana. Margarita había nacido solo tres años antes del matrimonio de Ana con Felipe, por lo que apenas conocía a su hermana mayor. Era lo suficientemente joven como para dar al rey más hijos, cuyo actual y único heredero varón Felipe no era más que un niño enfermizo.
María estaba bastante alarmada por la propuesta de su hermano, e incluso los médicos de Felipe se preocuparon por la salud del anciano rey. Pensaron que otra joven novia lo agotaría tanto que no le darían otro año de vida si se casaba. Y Margarita, habiendo heredado una personalidad testaruda de ambos lados de su familia, también tenía la intención de convertirse en monja, ya que a sus ojos no podía renunciar a convertirse en una novia de Cristo (el Rey de reyes) por un rey terrenal. Su carta a su tío en la que se explicaba a sí misma era bastante audaz y convincente, y finalmente Felipe renunció a su búsqueda de otra novia y aceptó el rechazo. Margarita le prometió que siempre serviría a la familia y rezaría por la salud de Felipe y su hijo Felipe, y que desearía que su sobrino tuviera una descendencia numerosa y saludable. Todo sucedió, y Margarita viviría en España como monja para presenciarlo todo, sin duda con una sonrisa en la cara.
Incluso Isabel, reina viuda de Francia, se había negado a casarse con Felipe antes. Había usado una frase que, según se informa, había dicho otra reina viuda de Francia antes, a saber, » Las reinas de Francia no se vuelven a casar. Aquí también Felipe tuvo que aceptar la derrota. Isabel, Ana, Margarita, así como sus numerosos hermanos, habían sido criados como católicos piadosos, e Isabel incluso había construido un colegio jesuita en Bourges, Francia. Se vistió el resto de su vida con ropa de viuda, y según se informa, cuando murió en 1592 (a los 37 años), su madre María dijo: «El mejor de nosotros está muerto.’Elisabeth era a veces ingenua, amable, inteligente, pero también profundamente basada en principios en su piedad. Una vez, causó un escándalo menor al negarse a que Gaspard de Coligny, un líder de los Hugonotes (Protestantes/Calvinistas franceses) le besara las manos cuando vino a presentar sus respetos.
Las Hijas de Felipe II de España
Como ya he aludido a Ana y a la hija de Felipe María, no mencionaré mucho sobre el desafortunado niño aquí. Aún así, vale la pena quedarse un momento porque es la última gran pérdida dentro del círculo familiar personal de Felipe II que tendría que soportar por un tiempo. Su esposa y sobrina Ana murió en 1580, su penúltimo hijo sobreviviente murió en 1582, y su hija murió en 1583. Esto me lleva a la última pérdida de un hijo que tendría que sufrir en su vida, a saber, su hija sobreviviente más joven con su tercera esposa Isabel, que era hermana del esposo de Isabel, la hermana de Ana, Carlos IX de Francia. (Lo repetiré con un poco más de claridad: Isabel de Austria se casó con la esposa de su tío Felipe Isabel de Valois/hermano de Francia.)
Esta Isabel de Francia había dado a luz a varios hijos en el transcurso de su matrimonio con Felipe II. Desafortunadamente, su vida estaba llena de abortos espontáneos y mortinatos, y por lo tanto solo dos de sus hijas sobrevivieron a su nacimiento. Estas dos niñas también sobrevivirían hasta la edad adulta, y una de ellas tendría descendencia propia sobreviviente. (Sin embargo, esta hija será la que muera durante la vida de su padre. En 1568, Isabel moriría después de que su última hija muriera al nacer. Felipe la tomó de la mano cuando pasó por el parto, así como cuando murió, y los dos tenían una relación bastante tierna. Más tarde, Felipe escribiría a su ahora ex suegra, la reina viuda de Francia (Catalina de Médici), que estaba contento de tener todavía a los infantas, porque eso significaba que todavía tenía algo de su esposa con él.
Los infantas de España eran cercanos a su padre, y a menudo les escribía, recuerdos de su padre incluso en su ausencia, que las niñas apreciaban profundamente. Crecieron con su tía Juana (que solo había tenido un hijo, pero que cuidaba a los hijos de su hermano Felipe como si fueran suyos) y su madrastra Ana, así como con sus hermanos de la unión de Felipe con su última esposa. Isabella Clara Eugenia tardaría un tiempo en casarse porque su sobrino (el hijo de María) Rodolfo, a quien le habían prometido a una edad temprana, declaró bastante tarde en su vida que no quería casarse con nadie. Eso la dejó para cuidar de su padre en su vejez, y más tarde se casaría con un hermano de Rodolfo y heredaría los Países Bajos de su padre con él.