działanie przeciwzapalne 81 ekstraktów z ziół chińskich i ich korelacja z charakterystyką tradycyjnej medycyny chińskiej

Posted on by admin

Streszczenie

indukowana syntaza tlenku azotu (iNOS) jest głównym czynnikiem nadprodukcji tlenku azotu, a jej inhibitory są aktywnie poszukiwane jako skuteczne środki przeciwzapalne. W tym badaniu przygotowaliśmy 70% ekstraktów etanolu z 81 chińskich ziół. Ekstrakty te oceniano następnie pod kątem ich wpływu na wytwarzanie tlenku azotu (NO) i wzrost komórek w komórkach LPS/IFN-kostymulowanych i niestymulowanych makrofagów mysich RAW264.7 za pomocą reakcji Griesa i testu MTT. Wyciągi z Daphne genkwa Sieb.et Zucc, Caesalpinia sappan L., Iles pubescens Hook.et Arn, Forsycja suspensa (Thunb.) Vahl, Zingiber officinale Rosc, Inula japonica Thunb., a Ligusticum chuanxiong Hort wyraźnie hamowało wytwarzanie NO (hamowanie > 90% przy 100 g/mL). Wśród aktywnych ekstraktów (hamowanie > 50% przy 100 g/mL), Rubia cordifolia L., Glycyrrhiza glabra L., Iles pubescens Hook.et Arn, Nigella Glandulifera Freyn et Sint, Pueraria lobata (Willd.) Ohwi i Scutellaria barbata D. Don nie wykazywały cytotoksyczności wobec nieoptymowanych komórek RAW246. 7, jednocześnie zwiększając wzrost komórek LPS/IFN-costimulated. Analizując korelację między ich działalnością a cechami tradycyjnej medycyny chińskiej (TCM), zioła o ostrym smaku wykazywały silne właściwości przeciwzapalne. Nasze badania dostarczają szeregu potencjalnych ziół przeciwzapalnych i sugerują, że zioła o ostrym smaku są kandydatami skutecznych środków przeciwzapalnych.

1. Wprowadzenie

zapalenie jest mechanizmem samoobrony mającym na celu usunięcie szkodliwych bodźców, w tym uszkodzonych komórek, czynników drażniących lub patogenów, i rozpoczęcie procesu naprawy rany. Jednak zapalenie czasami indukuje dalsze stany zapalne, prowadząc do samozaparcia przewlekłego stanu zapalnego, który może spowodować poważne uszkodzenia komórek i uszkodzenia tkanek . Przewlekłe zapalenie było związane z wieloma różnymi chorobami, takimi jak miażdżyca , choroba Alzheimera , cukrzyca i rakotwórczość .

tlenek azotu (NO), który jest wytwarzany głównie przez indukowaną syntazę tlenku azotu (iNOS) w Warunkach zapalnych , odgrywa kluczową rolę w każdym etapie procesów patologicznych podczas stanu zapalnego . Wykazano, że selektywne inhibitory iNOS działają zarówno przeciwzapalnie, jak i chronią tkanki w różnych zapalnych modelach zwierzęcych i dlatego są uważane za obiecujące środki do leczenia chorób zapalnych. Wysoka ekspresja iNOS może być często wykryta w guzach ludzkich, wspierając tezę, że przewlekłe zapalenie aktywnie uczestniczy w progresji nowotworu . W rzeczywistości niesteroidowe leki przeciwzapalne (NLPZ), w tym aspiryna i Kwas Tolfenamowy , są obecnie stosowane zarówno w zapobieganiu nowotworom, jak i w leczeniu .

w eksperymentalnych modelach zwierzęcych odnotowano występowanie różnych naturalnych produktów o działaniu przeciwzapalnym i przeciwnowotworowym. Na przykład wykazano, że kurkumina hamuje ekspresję cyklooksygenazy 2 (COX2) i jest faktycznie stosowana klinicznie jako środek chemoprewencyjny . Ze względu na obietnice zawarte w kurkuminie podjęto również intensywne wysiłki w celu identyfikacji związków zdolnych do kierowania mediatorów zapalnych . Ostatnie badania przeprowadzone przez Liao et al. zbadano potencjalny związek między zdolnością antyoksydacyjną a właściwościami tradycyjnej medycyny chińskiej (TCM) w 45 powszechnie stosowanych Chińskich ziołach, w których stwierdzono, że zdolność antyoksydacyjna chińskich ziół jest skorelowana z ich właściwościami smakowymi . Ich wyniki są bardzo zachęcające, ponieważ wskazuje, że skuteczne środki przeciwzapalne mogą być potencjalnie zidentyfikowane z chińskich ziół w oparciu o ich właściwości TCM.

w celu zidentyfikowania skutecznych środków przeciwzapalnych przygotowaliśmy 70% ekstraktów etanolu z 81 chińskich ziół, a następnie przetestowaliśmy ich zdolność do tłumienia produkcji NO w mysich makrofagach SUROWYCH264. 7 komórek kosztimulowanych LPS i IFNy. Ponadto przeanalizowaliśmy również korelację między zdolnością przeciwzapalną a właściwościami TCM wśród tych ziół. Stwierdzamy, że zioła o ostrym smaku są najsilniejsze pod względem właściwości przeciwzapalnych.

2. Materiały i metody

2.1. Chemicals

IFNy został zakupiony od EMD Millpore Chemicals (Billerica, MA, USA). Albuminę surowicy bydlęcej (BSA), lipopolisacharyd (LPS, E. coli 0111: B4), dichlorowodorek N-(1-naftylo)-etylenodiaminy (L-NIL), 3-(4, 5-dimetylotiazol-2-ilo)-2, 5-difenylotetrazolium (MTT), naftyloetylenodiaminę, sulfanilamid i wodorowęglan sodu otrzymano z Sigma-Aldrich Co (St.Louis, MO, USA). RPMI 1640 i trypsin-EDTA zostały zakupione od Life Technologies (Grand Island, NY, USA). Płodowa surowica bydlęca (FBS) została zakupiona w firmie Hyclone Thermo Fisher Scientific (Waltham, MA, USA).

2.2. Przygotowanie 70% ekstraktów etanolu z chińskich ziół

wszystkie zioła uzyskano z YANG He Tang i Kangqiao Co (Szanghaj, Chiny). Wszystkie 81 ziół wybranych do naszego badania zostały zgłoszone lub sugerowane, aby miały potencjalne działanie przeciwzapalne przez literaturę TCM lub bieżące raporty farmakologiczne. Botaniczna identyfikacja tych ziół została przeprowadzona przez Shanghai Institute for Food and Drug Control (SIFDC). Aby przygotować ekstrakty etanolu, 100 g każdego suszonego zioła pokrojono i ekstrahowano 1 L 70% etanolu w temperaturze C przez trzy razy. Uzyskane ekstrakty etanolu odparowano pod zmniejszonym ciśnieniem w temperaturze C i przechowywano w temperaturze C. ekstrakty rozpuszczono DMSO przed użyciem.

2.3. Pomiar produkcji azotynów

SUROWE264. 7 komórki platerowano w 96-studzienkowych płytkach (5 × 103 komórki na studzienkę) przez noc, a następnie uzupełniano pożywką wolną od FBS przez 10 godzin, a następnie dodawano 100 µg/mL ekstraktów ziołowych do każdej studzienki. Komórki kostymulowano 100 ng / mL LPS i 10 U/mL IFNy przez 24 godziny, a następnie zebrano media i przeanalizowano pod kątem ilości azotynów, stabilnego metabolitu utleniającego i wiernego wskaźnika NO, w reakcji Griesa, jak opisano wcześniej . Aby to zrobić, 100 µL odczynnika Griesa (0,1% naftylo-etylenodiaminy i 1% sulfanilamidu w 5% kwasie fosforowym) zmieszano ze 100 µL zebranego podłoża w 96-studzienkowej płytce. Mieszaninę inkubowano przez 10 minut w temperaturze pokojowej, a następnie odczytano przy 540 nm. Ilość azotynów obliczono na podstawie standardowej krzywej Wygenerowanej z azotynem sodu. Procentowe hamowanie w produkcji NO obliczono za pomocą wzoru {/(azotyn bez ekstraktu ziołowego)} × 100.

2.4. Analizę żywotności komórek

oznaczono metodą MTT, jak opisano wcześniej . Krótko, komórki RAW264. 7 inkubowano z MTT (5 mg / mL w soli fizjologicznej buforowanej fosforanem, pH = 7,4) przez 4 godziny. utworzony FORMAZAN MTT rozpuszczono 50 µL 0,01 m buforu HCl zawierającego 10% SDS i 5% izobutanolu. Wzrost komórek oznaczano przez odczyt płytek przy 570 nm w czytniku mikropłytek. Żywotność komórek grupy kontrolnej jest uważana za 100%.

2.5. Analiza statystyczna

kierunek i wielkość korelacji między zmiennymi przeprowadzono z wykorzystaniem analizy t-testu. wartości mniejsze niż 0,05 uznano za istotne statystycznie ().

3. Wyniki

3.1. Wpływ ekstraktów ziołowych na produkcję NO i wzrost komórek

przy pomocy testu Griess przeanalizowaliśmy ekstrakty etanolu z 81 ziół pod kątem ich działania przeciwzapalnego. W przypadku tych ekstraktów obserwowano szeroki zakres hamowania w produkcji NO(Tabela 1). Ekstrakty z 7 ziół zablokowały ponad 90% brak produkcji w surowcu stymulowanym LPS/Ifny264.7 komórek (Tabela 1). Wśród ekstraktów, które wywołały ponad 50% hamowanie w produkcji NO, Rubia cordifolia L., Glycyrrhiza glabra L., Iles pubescens Hook.et Arn, Nigella Glandulifera Freyn et Sint, Pueraria lobata (Willd.) Ohwi i Scutellaria barbata D. Don nie wykazywały cytotoksyczności wobec nieoptymowanych komórek RAW264. 7, podczas gdy znacznie zwiększały żywotność komórek stymulowanych LPS/IFNy (Tabela 1). Daphne genkwa Sieb.et Zucc, który ma najsilniejszy wpływ hamujący na produkcję NO, był umiarkowanie toksyczny dla komórek RAW264.7 (Tabela 1).

Plant name and authority Part useda Stimulation cells Resting cells Yieldf
Percent inhibition of NOb Cell proliferation (%)c NO production (M)d Cytotoxicity (%)e
Acanthopanax senticosus (Rupr.et Maxim.) Harms SR 74.66 ± 0.01 97.64 ± 0.09 4.28 ± 0.01 90.76 ± 0.04 5.55
Acanthopanax gracilistylus W. W. Smith BK 12.11 ± 0.01 66.29 ± 0.01 1.00 ± 0.01 99.16 ± 0.01 23.75
Achyranthes bidentata Bl. RT −11.62 ± 0.02 68.78 ± 0001 4.13 ± 0.03 73.25 ± 0.03 31.25
Acorus tatarinowii Schott. SR 11.82 ± 0.01 47.40 ± 0.09 0.92 ± 0.01 98.57 ± 0.01 17.75
Actinidia piskliwa (Sieb.i Zucc.).były Miq. RT 54.67 ± 0.02 40.79 ± 0.03 1.18 ± 0.01 103.69 ± 0.01 7.42
Actinidia valvata Dunn RT 32.11 ± 0.01 51.09 ± 0.01 2.94 ± 0.01 22.07 ± 0.01 7.36
Alisma Oriental (Arab.) Juzep. ul. 46.63 ± 0.04 53.01 ± 0.02 3.86 ± 0.02 101.11 ± 0.04 5.69
czosnek macrostemon Bge. St 25.43 ± 0.03 73.53 ± 0.04 2.11 ± 0.01 93.74 ± 0.02 38.87
Aloe Barbadensis Miller LF 15.31 ± 0.10 35.02 ± 0.02 3.86 ± 0.02 94.60 ± 0.04 10.71
kardamon villosum Lour. FR. 35.56 ± 0.02 61.15 ± 0.04 4.57 ± 0.01 100.19 ± 0.03 5.18
Artemisia rocznik L. HR 12.03 ± 0.03 29.48 ± 0.03 1.34 ± 0.01 105.08 ± 0.01 13.62
Artemisia anomala S. Moore HR 59.56 ± 0.05 74.25 ± 0.01 1.61 ± 0.01 102.92 ± 0.02 11.04
Artemisia capillaris Thunb. HR 41.2 ± 0.03 64.62 ± 0.03 4.02 ± 0.01 104.40 ± 0.04 17.36
Astragalus membranaceus (Fisch.) Bge. RT 13.96 ± 0.01 53.76 ± 0.03 4.30 ± 0.01 93.30 ± 0.05 47.06
bambusa tuldoides Munro. ul. 27.32 ± 0.01 75.23 ± 0.01 3.19 ± 0.01 110.67 ± 0.03 1.14
Bletilla Pasiasta (Thunb.) Reichb. f. Ul. 77.52 ± 0.01 95.17 ± 0.08 4.29 ± 0.01 14.37 ± 0.02 18.63
Cezalpinia sappańska L. HW 94.27 ± 0.01 103.70 ± 0.01 3.75 ± 0.01 30.92 ± 0.01 10.66
Carpesium abrotanoides Lynn. H 74.85 ± 0.03 53.24 ± 0.02 2.85 ± 0.01 102.95 ± 0.02 11.52
Carthamus tinctorius L. FL 38.89 ± 0.02 89.78 ± 0.02 4.22 ± 0.01 104.26 ± 0.04 45.76
Celastrus orbiculatus Thunb. RT -6.06 ± 0.01 55.62 ± 0.01 1.30 ± 0.01 101.88 ± 0.03 2.78
Cynamonowa Cassia Presl. TW 38.43 ± 0.02 86.03 ± 0.03 4.38 ± 0.01 107.18 ± 0.06 9.32
Cynamonowa Cassia Presl. BK 68.31 ± 0.02 97.01 ± 0.04 4.54 ± 0.01 60.18 ± 0.04 11.16
kurkuma długa L. ST 89.32 ± 0.02 108.09 ± 0.05 4.61 ± 0.01 51.43 ± 0.02 9.36
Codonopsis pilosula (Franc.) Nannf. HG -13.92 ± 0.01 60.45 ± 0.01 1.42 ± 0.01 101.83 ± 0.02 36.04
Corydalis яньхусуо B. T. Van UL 7.36 ± 0.01 25.78 ± 0.01 0.74 ± 0.01 95.26 ± 0.01 11.14
Chryzantema indygo L. FL -2.87 ± 0.01 97.74 ± 0.01 1.65 ± 0.01 101.07 ± 0.02 26.1
Curculigo orchioides Gaertn. ST 8.81 ± 0.01 29.58 ± 0.02 1.25 ± 0.01 106.48 ± 0.02 8.01
Curcuma wenyujin Y. H. Chen et C. Ling RT -8.31 ± 0.01 45.33 ± 0.01 0.59 ± 0.01 99.01 ± 0.02 9.423
Curcuma phaeocaulis Val. ST 18.87 ± 0.03 43.53 ± 0.02 3.10 ± 0.01 98.00 ± 0.05 46.14
Dalbergia odorifera T. Chen HW 77.38 ± 0.04 88.27 ± 0.07 1.93 ± 0.01 86.12 ± 0.02 17.6
Daphne genqua Sieb.et Zukk FL. 99.17 ± 0.01 40.83 ± 0.03 4.25 ± 0.01 70.25 ± 0.04 20.55
Daphne Tangutica Maxim. BK 76.12 ± 0.01 91.32 ± 0.16 4.56 ± 0.01 85.67 ± 0.11 4.75
Drinaria fortunei (Kunze) J. Sm. Ul. 6.46 ± 0.04 54.58 ± 0.01 1.15 ± 0.01 99.59 ± 0.02 11.458
Epimedium brevicornum hacking travel. LF -43.84 ± 0.02 135.36 ± 0.02 1.06 ± 0.01 101.69 ± 0.02 13.78
Euodia rutaecarpa (Juss.) Bent. FR. 56.35 ± 0.02 23.68 ± 0.01 1.80 ± 0.01 41.84 ± 0.03 33.89
Forsythia suspensa (Thunb.) Vahl FR 91.93 ± 0.01 34.44 ± 0.02 4.24 ± 0.01 27.32 ± 0.01 26.12
Gardenia jasminoides Ellis FR 15.89 ± 0.01 50.48 ± 0.03 4.27 ± 0.01 129.77 ± 0.09 29.8
Glycyrrhiza glabra L. SR 66.62 ± 0.01 107.8 ± 0.07 0.76 ± 0.01 109.65 ± 0.03 18.57
Iles pubescens Hook.et Arn. RT 65.3 ± 0.02 106.52 ± 0.04 4.15 ± 0.01 117.70 ± 0.10 7.09
Ilex latifolia Thunb. LF 32.33 ± 0.09 79.67 ± 0.01 3.42 ± 0.01 54.11 ± 0.04 19.14
Inula japonica Thunb. FL 91.19 ± 0.01 84.48 ± 0.03 0.86 ± 0.01 100.42 ± 0.01 17.7
Inula linariifolia Turez. HR 76.43 ± 0.01 129.93 ± 0.19 4.04 ± 0.01 84.41 ± 0.03 10.91
Isatis indigotica Fort. LF 47.61 ± 0.02 86.83 ± 0.05 1.56 ± 0.01 106.24 ± 0.02 24.43
Isatis indigotica Fort. RT 26.48 ± 0.02 53.51 ± 0.08 1.00 ± 0.01 103.22 ± 0.01 26.78
Ligusticum chuanxiong Hort. SR 91.13 ± 0.01 79.46 ± 0.05 3.88 ± 0.01 81.82 ± 0.04 28.1
Lonicera japonica Thunb. FL 47.87 ± 0.02 86.17 ± 0.04 1.38 ± 0.01 107.12 ± 0.01 39.55
Magnolia biondii Pamp. FL −15.35 ± 0.01 82.89 ± 0.01 3.27 ± 0.01 102.22 ± 0.03 15.39
Morus alba L. TW 50.78 ± 0.01 72.21 ± 0.06 4.69 ± 0.01 93.67 ± 0.03 7.88
Nelumbo nucifera Gaertn. FR. 21.96 ± 0.02 95.84 ± 0.11 4.53 ± 0.04 105.37 ± 0.04 17.55
Nigella glandulifera SD 78.56 ± 0.01 95.88 ± 0.04 2.58 ± 0.01 113.01 ± 0.01 10.05
Oldenlandia rozproszona (Willd.) Roxb. HR 43.62 ± 0.02 62.44 ± 0.05 4.12 ± 0.01 69.83 ± 0.02 11.58
Ophiopogon japonicus (L.f.) Ker-Gawl. RT 9.31 ± 0.01 65.68 ± 0.05 0.62 ± 0.01 96.24 ± 0.01 39.34
Paeonia veitchii Lynch RT 61.27 ± 0.05 49.03 ± 0.01 2.95 ± 0.01 101.88 ± 0.03 22.17
Paeonia lactiflora Pall. RT −8.32 ± 0.01 77.45 ± 0.01 1.16 ± 0.01 98.85 ± 0.03 16.01
Paeonia suffruticosa Andr. BK 31.64 ± 0.04 64.88 ± 0.02 4.15 ± 0.01 70.23 ± 0.01 28.7
Panax ginseng C. A. Mey. SR 26.73 ± 0.04 71.25 ± 0.06 0.92 ± 0.01 101.26 ± 0.01 36.617
Perilla frutescens (L.) Britt. HR 11.22 ± 0.05 64.07 ± 0.02 2.23 ± 0.01 103.16 ± 0.01 12.36
Peucedanum praeruptorum Dunn HG 66.44 ± 0.02 102.58 ± 0.17 4.51 ± 0.01 20.67 ± 0.07 13.07
Polygonatum pachnące (Mill.) Drews ulica -3.64 ± 0.02 47.88 ± 0.01 1.00 ± 0.01 97.64 ± 0.01 32.28
Wielokwiat wielokwiatowy Thunb. RT 36.49 ± 0.02 63.84 ± 0.02 4.91 ± 0.01 73.7 ± 0.02 12.57
Poria kokos (SZW.) Wilk SC 56.75 ± 0.04 12.61 ± 0.06 1.34 ± 0.01 49.13 ± 0.03 2.21
Psoralea corylifolia L. FR 41.35 ± 0.04 93.39 ± 0.04 1.16 ± 0.01 7.93 ± 0.01 5.34
Pueraria lobata (Willd. Ohwi RT 58.64 ± 0.03 93.10 ± 0.08 0.68 ± 0.01 101.30 ± 0.02 20.25
Pirola callianta H. Jastrzębiec Andres. HR 20.09 ± 0.07 50.68 ± 0.02 3.04 ± 0.01 106.48 ± 0.04 11.6
Rehmannia glutinosa Libosz. RT -14.78 ± 0.01 38.15 ± 0.01 0.45 ± 0.01 96.41 ± 0.01 39.67
Róża levigata Michx. FR 29.37 ± 0.02 69.39 ± 0.03 4.40 ± 0.01 91.48 ± 0.06 22.8
Rubia cordifolia L. SR 69.99 ± 0.03 113.22 ± 0.12 5.30 ± 0.01 102.03 ± 0.06 12.67
Salvia miltiorrhiza Bge. SR 7.35 ± 0.01 82.25 ± 0.14 2.02 ± 0.01 100.35 ± 0.01 40.42
Santalum album L. HW 36.59 ± 0.02 61.80 ± 0.03 4.61 ± 0.01 63.65 ± 0.16 7.25
Saposhnikovia divaricata (Turcz.) Schischk. RT 6.73 ± 0.01 56.66 ± 0.01 3.02 ± 0.01 92.08 ± 0.10 20.51
Scutellaria baicalensis Georgi RT 23.55 ± 0.01 69.68 ± 0.01 3.07 ± 0.01 100.93 ± 0.01 47.06
Scutellaria barbata D. Don HR 53.51 ± 0.03 98.59 ± 0.03 4.28 ± 0.01 101.75 ± 0.04 21.39
Satsstrea japonica (Thunb.) Od. BK 70.55 ± 0.01 126.05 ± 0.14 4.19 ± 0.01 91.61 ± 0.03 4.66
Spatholobus suberectus Dunn. Ul. 33.79 ± 0.01 27.24 ± 0.01 4.98 ± 0.01 92.21 ± 0.07 16.07
Stefania тетрандра S. Moore RT 52.29 ± 0.06 8.38 ± 0.01 2.06 ± 0.01 98.80 ± 0.03 11.03
tribulus mają zostały ziemskiej L. FR 73.48 ± 0.02 71.80 ± 0.09 4.15 ± 0.01 87.66 ± 0.05 8.44
Trichosanthes kirilowii hacking podróży. PE -2.38 ± 0.03 29.54 ± 0.01 1.07 ± 0.01 101.00 ± 0.01 35.97
Typha wąskolistna L. PL 78.99 ± 0.05 48.80 ± 0.01 3.66 ± 0.01 85.85 ± 0.02 7.09
Typhonium Giant ang. ST 7.41 ± 0.01 47.14 ± 0.01 0.46 ± 0.01 94.68 ± 0.02 24.56
Xanthium sibiricum Patr. HR 76.34 ± 0.04 94.41 ± 0.07 4.46 ± 0.01 83.82 ± 0.06 5.73
Zingiber officinale Rosc. SR 91.28 ± 0.01 98.31 ± 0.05 2.20 ± 0.01 41.37 ± 0.04 10.10
L-NILg 35.2 ± 0.01 84.29 ± 0.01 3.22 ± 0.01 99.95 ± 0.03
HR: herb; RT: root; ST: stem; LF: leaf; TW: twig; FL: flower; FR: fruit; SD: seed; SC: sclerotium; HW: heartwood; SR: stem and root; PE: pericarp.
bPercent hamowanie produkcji NO: reakcję Griesa przeprowadzono w celu pomiaru produkcji azotynów w stymulowanych LPS / IFNy komórkach RAW264.7 w nieobecności lub w obecności 100 g/mL ekstraktów ziołowych.
wzrost cCell: MTT przeprowadzono w celu pomiaru wzrostu komórek. Tempo wzrostu kontroli (bez leczenia ekstraktem z ziół) uznano za 100%.
produkcja dNO: do pomiaru ilości azotynów w niesymulowanym SUROWCU264 użyto reakcji Griesa .7 komórek w nieobecności i obecności 100 g/mL ekstraktów ziołowych.
cytotoksyczność eCell: przeprowadzono test MTT w celu określenia cytotoksyczności komórek niestymulowanych komórek RAW264.7 leczonych ekstraktami z ziół. Nieleczona grupa została uznana za 100%.
fPercent wydajność ekstraktu uzyskanego z 70% ekstrakcji etanolu z każdego 100 g suchego zioła.
gPercent hamowanie aktywności iNOS przy stężeniu testowym 50 M.
Tabela 1
wpływ ekstraktów ziołowych na brak produkcji i żywotność komórek w symulowanych i spoczynkowych komórkach SUROWYCH264.7.

3.2. Korelacja między działaniem przeciwzapalnym a właściwościami TCM ziół

analizując charakterystykę TCM 10 ziół, które wykazują najsilniejszy wpływ hamujący na brak produkcji w komórkach stymulowanych LPS/IFNy raw264.7, odkryliśmy, że większość z nich znajduje się w kategoriach gorzkiego lub ostrego smaku, ciepłej Natury i rozkładów południków płuc lub wątroby (Tabela 2). Aby skorelować właściwości TCM z działaniem przeciwzapalnym w tych ziołach, sklasyfikowaliśmy właściwości TCM tych ziół, które były w stanie znieść 50% produkcji NO w komórkach stymulowanych LPS/IFNy raw264.7. Tabela 3 wykazała, że zioła o większym działaniu przeciwzapalnym były rozprowadzane w znacznie wyższym odsetku u osób charakteryzujących się gorzkimi/ostrymi smakami, ciepłą naturą i rozkładami południków wątroby / płuc. Wyniki te sugerują, że zioła przeciwzapalne mogą posiadać wspólne cechy, które są ostry / gorzki smak, ciepły charakter i południka płuc / wątroby.

nazwa rośliny i organ Flavorsa,b Naturesa,b Meridian distributionsa, b
Daphne genkwa Sieb.et Zucc. gorzki, ostry ciepły płuca, śledziona, nerki
Caesalpinia sapphan L. Pot, słony umiarkowany serce, wątroba, śledziona
Forsythia suspensa (Thunb.) Vahl gorzki miot zimny płuco, serce, intestinum tenue
Zingiber officinale Rosc. ostry gorący śledziona, żołądek, nerki, serce, płuca
Inula japonica Thunb. gorzki, ostry, słony trochę ciepły
Ligusticum chuanxiong Hort. ostry ciepły wątroba, pęcherzyk żółciowy, osierdzie
Curcuma longa L. ostry, gorzki ciepły śledziona, wątroba
Typha angustifolia L. Pot umiarkowany wątroba, południk osierdziowy
Nigella glandulifera Freyn et Sint. Pot, ostry ciepły wątroba, nerki
Bletilla striata (Thunb.) Reichb.f. gorzki, słodki, ściągający trochę zimny płuca, wątroba, żołądek
na podstawie Farmakopei Chińskiej (2010).
BB na chińskim Materia Medica (1998).
Tabela 2
charakterystyka (smak, charakter i rozkład południków) 10 najsilniejszych ziół przeciwzapalnych.

charakterystyka TCM ekstrakty Hit (hamowanie ponad 50%) procent skutecznych ziół (32) zioła o tych samych smakach procent (w 81 ziołach)
cztery właściwości
zimno 9 28.13 30 37.04
fajne 1 3.13 2 2.47
ciepły 11 34.38 33 40.74
gorące 3 9.38 4 4.94
umiarkowane 8 25 12 14.81
Pięć Smaków
ostry 20 62.5 42 51.85
Słodkie 9 28.13 30 37.04
Gorzki 20 62.5 47 58.02
Kwaśny 0 0 3 3.70
Ściągające 2 6.25 6 7.41
Słony 3 9.38 3 3.70
Łagodny 2 6.25 3 3.70
rozkład południka
wątroba 18 56.25 43 53.09
płuco 17 53.13 35 43.21
śledziona 13 40.63 29 35.80
Serce 10 31.25 30 37.04
nerka 8 25 25 30.86
żołądek 7 21.88 22 27.16
jelito grube 4 12.5 9 11.11
pęcherz 2 6.25 7 8.64
woreczek żółciowy 2 6.25 6 7.41
jelito cienkie 1 3.13 2 2.47
Tabela 3
procentowy rozkład ziół o zdolności do hamowania ponad 50% brak produkcji w każdej charakterystyce TCM.

3.3. Korelacja między działaniem ochronnym komórek a właściwościami TCM ziół

przewlekłe zapalenie często prowadzi do uszkodzenia komórek, a zatem aktywnie poszukiwane są środki zdolne do powstrzymania tego procesu. Badając 21 ziół o charakterystycznym dla ostrego smaku TCM, zauważyliśmy, że pod costimulacją LPS i IFNy, RAW264.7 komórek leczonych tymi ekstraktami ziołowymi wykazywało 90% wzrost żywotności komórek(Tabela 4). Ponadto zioła o ostrym smaku również zapewniały najwyższy stopień ochrony komórek w komórkach stymulowanych LPS/IFNy w porównaniu z ziołami o innych smakach (ryc. 1).

charakterystyka TCM Hit herbsa procent (21 ziół) Hit herbsb procent (43 zioła)
cztery natury
zimno 5 23.81 19 44.19
fajne 1 4.76 1 2.33
umiarkowane 5 23.81 5 11.63
ciepły 8 38.10 15 34.88
gorące 2 9.52 1 2.33
Pięć Smaków
ostry 15 71.43 21 48.84
Słodkie 9 42.86 14 32.56
gorzki 13 61.90 22 51.16
kwaśny 0 0 0 0
ściągające 2 9.52 2 4.65
słony 2 9.52 1 2.33
łagodny 0 0 2 4.651
rozkład południka
wątroba 9 42.86 20 46.51
płuco 11 52.38 18 41.86
śledziona 10 47.62 12 27.91
Serce 8 38.10 14 32.56
nerka 8 38.10 12 27.91
żołądek 4 19.05 13 30.23
Intestinum crassum 3 14.29 3 6.977
pęcherz moczowy 1 4.76 6 13.95
pęcherzyk żółciowy 0 0 5 11.63
Intestinum tenue 0 0 1 2.326
zioła o ponad 90% zdolności do ochrony komórek w stymulowanych komórkach RAW264. 7.
bHerbs ze zdolnością do zwiększenia ponad 90% proliferacji komórek w spoczynkowych komórkach RAW264. 7.
Tabela 4
procentowy rozkład ziół o zdolności ochrony komórek w każdej charakterystyce TCM.

Rysunek 1

porównanie ziół z żywotnością komórek w różnych smakach. Średnia żywotność komórek LPS / IFNy stymulowane RAW264. 7 komórek leczonych ziół należących do innego smaku. .

4. Dyskusja

nadprodukcja NO z powodu podwyższonej ekspresji iNOS została przekonująco powiązana z patogenezą przewlekłych stanów zapalnych i nowotworów. W związku z tym środki, które mogą selektywnie hamować produkcję NO wytwarzaną przez iNOS, powinny być skuteczne w leczeniu przewlekłego stanu zapalnego i zapobieganiu nowotworom. W rzeczywistości ostatnie badania pokazują, że selektywne inhibitory iNOS L-NIL i 1400 W są skuteczne terapeutycznie jako leki przeciwzapalne i przeciwnowotworowe .

makrofagi odgrywają kluczową rolę w regulacji stanu zapalnego. Makrofagi są aktywowane przez bodźce zewnętrzne, a aktywowane makrofagi wytwarzają różne mediatory zapalne, takie jak NO i reaktywne formy tlenu. Chińskie zioła są bogatym źródłem środków przeciwzapalnych i podjęto wysiłki w celu identyfikacji skutecznych składników w tych ziołach . Korzystając z dobrze ugruntowanego modelu komórkowego RAW264.7, oceniliśmy ekstrakty ziołowe 81 pod kątem ich hamującego wpływu na indukowaną przez LPS/IFNy produkcję NO. Wśród nich wyciąg z Daphne genkwa Sieb.et Zucc wykazywał najsilniejszy wpływ hamujący na produkcję NO. Składniki wyizolowane z Daphne genkwa Sieb.et wcześniej donoszono, że Zucc wywołuje działanie cytotoksyczne na różne linie komórkowe nowotworu i hamuje wzrost przeszczepionego mięsaka myszy S180 u myszy . Spekulujemy, że przeciwnowotworowe działanie Daphne genkwa Sieb.et Zucc może być funkcjonalnie związane z jego właściwości przeciwzapalne. W naszym badaniu odkryliśmy, że Rubia cordifolia L. i kilka innych zmniejsza indukowaną LPS / IFNy produkcję NO bez powodowania istotnej cytotoksyczności dla komórek RAW264.7. Zioła te mogą więc być obiecującymi kandydatami jako skuteczne leki do kontroli stanu zapalnego i raka. Chociaż obecnie nie jest jasne, w jaki sposób te ekstrakty blokują indukowaną przez LPS/IFN produkcję NO w komórkach RAW264.7, odkrycie, że Mollugin hamuje odpowiedź zapalną poprzez blokowanie przetworników sygnału kinazy Janusowej i aktywatorów szlaku sygnałowego transkrypcji, implikuje, że zioła mogą celować w różne etapy kaskady sygnałowej pośredniczącej w indukowanej przez LPS/IFN produkcji NO, aby wywierać swoje przeciwzapalne role.

opierając się na teorii TCM, sklasyfikowaliśmy te 81 ziół według różnych smaków (ostry, słodki, kwaśny, gorzki, cierpki, słony lub łagodny), Natur (zimny, chłodny, umiarkowany, ciepły lub gorący) i rozkładów południków (wątroba, nerki, serce, śledziona itp.). Nasze badania wykazały, że charakterystyka TCM smaku bardzo dobrze koreluje z mocą hamowania bez produkcji-ostry smak jest najsilniejszy, gorzki jest nieco słabszy niż ostry, słodkie smaki jest pośredni, a cierpki, słony, łagodny lub kwaśny smak jest słaby lub nieskuteczny. Właściwości TCM Natury i dystrybucji południka są również związane z potencją, aby hamować produkcję NO. Na przykład wyższy procent ziół z możliwością blokowania produkcji nie ma cech ciepłego charakteru. Charakterystyka meridianów wątroby i płuc to główne rozkłady południków występujące w ziołach, których ekstrakty mogą blokować 50% produkcji NO. Razem, mamy powód, że właściwości TCM może potencjalnie być bardzo przydatne do prowadzenia poszukiwania skutecznych środków przeciwzapalnych w chińskich ziół.

charakterystyka TCM jest systematycznym wyrażeniem odrębnej właściwości wywoływanej przez Materia Medica u ludzi. Teoria smaków w TCM stanowi rdzeń kontekstu Chińskich wskazówek użytkowania ziół. W TCM charakterystyczne dla smaku jest połączenie zarówno prawdziwego smaku, jak i efektu leczniczego. Według Shen Nong Ben Cao Jing (Klasyka materiału Medica Shennong), ważna książka TCM napisana po raz pierwszy na temat chińskiego ziołowego smaku i teorii właściwości, ostry smak, który jest związany z południkiem płucnym, może rozproszyć wewnętrzne ciepło za pomocą sudorifics, które z kolei promują krążenie Qi i krwi. Zioła o ostrym smaku były używane przez tysiące lat w Chinach, aby ożywić krążenie krwi i przełamać blok Qi. Fakt, że choroby związane ze stanem zapalnym są związane z objawem Qi i zablokowaniem krwi, może wyjaśniać skuteczność ziół o ostrym smaku w celu stłumienia stanu zapalnego.

nasze badania ograniczały się do badania 81 ekstraktów ziołowych na ich wpływ na indukowaną LPS/IFNy produkcję NO i wzrost komórek w komórkach makrofagów RAW264.7. Wyniki uzyskane z tego badania wspierają jednak ścisły związek między Nowoczesną farmakologią / nauką biomedyczną a teorią TCM. Teoria TCM została opracowana w oparciu o tysiącletnie doświadczenie kliniczne, a materialne i farmakologiczne podstawy TCM pozostają do wyjaśnienia przez współczesną naukę biomedyczną. Wierzymy, że to badanie przyczyniło się do osiągnięcia tego celu.

konflikt interesów

autorzy oświadczają, że nie ma konfliktu interesów w związku z publikacją niniejszego artykułu.

podziękowania

praca ta była wspierana przez Narodowy główny projekt Nauki i technologii Ministerstwa Nauki i technologii Chin (2009ZX09311-003), Fundusz Młodych Naukowców Narodowej Fundacji Nauk Przyrodniczych Chin (81001666), program innowacji Komisji Edukacji Miejskiej w Szanghaju (13YZ048) oraz Fundację Komisji Edukacji Szanghaju dla wybitnych młodych nauczycieli na Uniwersytecie (SZY07029).

Dodaj komentarz

Twój adres e-mail nie zostanie opublikowany.