- 추상적인
- 1. 소개
- 2. 배아 발달 중 우로 텔 리움에서의 사이토 케라틴 발현
- 3. 정상 요로텔륨에서의 사이토케라틴 발현
- 4. 유두 요도 신 생물에서의 사이토 케라틴 발현
- 5. 사이토 케라틴 아이소 타입 발현 패턴과 상피 분화 사이의 밀접한 상관 관계는 사이토 케라틴이 상피 조직 구조 및/또는 기능에 결정적이라는 것을 시사한다. 그러나 개인의 정확한 기여 또는 사이토 케라틴 이소 타입의 조합이 정상 및 종양 상피 세포 표현형 및 행동에 미치는 영향을 확립하는 것은 어려웠습니다. 따라서,요실금 암 재발의 위험이 높은 나타내는 2 차 변화를 반영 아마 발암 중 요실금 분화 프로그램의 조절 장애와 관련 된 2 차 변화를 나타내는 20 면역 지역화. 다양한 우로 텔 리움 암종에서 우로 텔 리움 20 과 우로 텔 리움 5/6 의 발현 패턴은 우로 텔 리움의 발생 학적 발달 및 분화 단계를 모방하는 경향이 있다고 추측 할 수 있습니다. 따라서,기저층이 없는 확산성 단핵구 발현이 특징인 고급 요실암(침습 유무에 관계없이)은 비뇨 생식기 부비동이 배설강에서 분리된 후 요실암 분화의 초기 단계를 나타낼 수 있다. 이 발달 단계에서 우로 텔 리움은 확산 성 단백 동화 염색을 나타내지 만 기저층이 부족합니다. 일부 고급 요로 암종에서는 모든 층의 균일 한 얼룩이 있습니다. 이것은 배아 요로 분화의 중간 단계와 동일 할 수 있습니다. 잘 분화 된 요실금 암종은 그 발현이 대부분 우산 세포로 제한되는 성숙한 패턴의 존재를 특징으로하며,잘 정의 된 기저 세포 층 면역 반응성 씨티 5/6 도 존재한다(그림 8 및 9). 그림 8 (가)요로텔륨의 발생학적 발달 동안 분화의 단계를 묘사한 만화. 초기 단계 동안,발달중인 요로텔륨은 배설강에서 일반적으로 나타나는 단핵구증 20 발현을 유지한다. 이 단계에서 기초 층은 존재하지 않습니다. (비)요로텔륨의 발달 동안,기저층은 염색에 의해 입증 될 수 없다. (다)우산세포의 정상 발현과 우산세포 분화의 최종 단계 및 우산세포의 정상 기저층 발현의 존재 5/6. 그림 9 (가)우산세포에 한정된 저급 유두 요실암에서 면역조직화학적 염색 패턴을 묘사한 만화. (비)고급 요실금 암종은 요실금 5/6 을 포함하는 기저 층을 제외하고 모든 요실금 층에서 요실금 20 의 발현을 나타낸다. 이것은 종양의 탈분화의 중간 단계를 나타낼 수 있습니다. (기음)고급 요도 암종에서는 기저층이 없을 수 있지만 확산 성 염색 패턴이 유지됩니다. 이러한 특징은 암종의 추가 탈분화를 나타낼 수 있습니다.
- 데이터 가용성
- 이해 상충
- 감사
추상적인
Cytokeratins 의 가족에 속하는 중간 필라멘트. 그들은 어디 그들은 무결성 및 세포의 기계적 안정성에 중요 한 역할을 상피 세포에서 매우 구체적인 방식으로 표현 됩니다. 사이토케라틴의 몇몇 모형은 정상 뿐 아니라 신생물성 요로텔륨에서 기술되었습니다. 여러 연구에서 진단 및 예후 적 의미를 갖는 것으로 나타났습니다. 따라서,저 등급 요로 암종은 우산 세포로 제한되는 중핵 발현을 나타내며,고급 종양은 일반적으로 기저층을 제외하고 요로 세포의 전체 두께로 발현됩니다. 한편,기저 세포에서는 모든 저 등급 및 일부 고급 요실금 암으로 발현된다. 양성 기저 층은 일반적으로 공격적인 임상 행동과 관련이 있습니다. 이러한 사이토 케라틴에 대한 슬라이드의 이중 염색은 적절한 해석과 상관 관계를 촉진 할 수 있습니다.
1. 소개
사이토 케라틴은 모든 세포에 존재하는 10 나노 미터 중간 필라멘트 세포 골격의 계열에 속한다. 중간 필라멘트 단백질은 고도로 세포 유형 특이 적 방식으로 표현되며,본원에서 케라틴은 상피 세포에 존재하는 전형적인 중간 필라멘트 범주를 나타낸다. 이 필라멘트는 40,000 에서 68,000 씨의 크기에 이르기까지 물 불용성 폴리펩티드의 복잡한 그룹입니다. 상피에서,케라틴 필라멘트는 톤 필라멘트로 번들로 묶일 수 있고,핵을 묶고,세포질을 통해 스팬되고,전형적인 상피 세포-세포 접합부 인 데스 모좀의 세포질 플라크에 부착 될 수있다. 따라서 케라틴은 단일 상피 세포와 상피 조직의 무결성 및 기계적 안정성에 중요한 기능적 역할을하며 단일 세포에서 조직 형성까지의 안정성 연속체의 고유 한 부분입니다.
케라틴 단백질은 작은 산성 1 형과 큰 염기성~중성 2 형 케라틴으로 나눌 수 있습니다. 케라틴의 독특한 특성은 다른 중간 필라멘트 단백질과는 달리 제 1 형 및 제 2 형(1:1)분자의 쌍 형성에 의해서만 필라멘트 단계를 구성 할 수 있다는 것입니다. 인간 케라틴 중에서 최근의 합의 명명법은 제 1 형 케라틴 케이 9-케이 10,케이 12–케이 28 및 케이 31–케이 40 및 제 2 형 케라틴 케이 1–케이 8 및 케이 71–케이 86. 인간 게놈에서 케라틴 유전자는 두 개의 서로 다른 염색체 부위에 군집되어 있습니다:염색체 17 큐 21.2(제 1 형 케라틴,제외 케이 18)및 염색체 12 큐 13.13(제 2 형 케라틴 및 케이 18). 두 사이토 케라틴 하위 패밀리는 유전자 복제 및 후속 발산을 통해 발생한 것으로 생각됩니다.
각 유형의 상피 세포는 2~10 개의 사이토 케라틴 이소 타입의 특징적인 조합을 나타낸다. 따라서,생체 내 또는 시험 관내 정상 상피 세포는 그들의 사이토 케라틴 이소 타입 프로파일과 관련하여 식별 될 수있다. 다른 정상적인 상피 세포 유형의 특징적인 사이토 케라틴 프로파일은 종양 변형 후 유지되는 경향이 있으며이 특징은 종양 진단에 이용 될 수 있습니다. 그러나,상피 세포의 사이토 케라틴 프로파일은 또한 기원 조직보다는 기능적 분화를 반영 할 수있다. 따라서,메타플라스틱 세포는 그들의 정상적인 대조물의 그것 보다는 오히려 그들의 형태의 사이토케라틴 단면도 특성을 표현합니다.
2. 배아 발달 중 우로 텔 리움에서의 사이토 케라틴 발현
사이토 케라틴은 배아 발생 중에 나타나는 첫 번째 중간 필라멘트 유형이며 태아 발달의 일부 단계에서 모든 세포는 사이토 케라틴 양성이다. 발현 될 첫 번째 사이토 케라틴 이소 타입은 씨케라틴 8+씨케라틴 18 쌍. 발생 학적 상피-중간 엽 변형 동안,사이토 케라틴 발현은 세포의 특정 계통에 의해 손실되며,이는 사이토 케라틴 음성으로 유지되고 결합 조직으로 발전하거나 나중에 2 차 상피의 사이토 케라틴을 재 발현시킨다. 방광의 발생 학적 발달은 위장 및 비뇨기 폐기물에 대한 일반적인 챔버 인 뒷굿 구조 인 배설강에서 비롯됩니다. 발달 4-7 주에 배설강은 요 직장 중격에 의해 두 부분으로 나뉩니다:후방 항문 직장 운하 및 전방 비뇨 생식기 부비동. 비뇨 생식기 부비동의 상부 부분은 방광을 형성합니다.
방광의 초기 발달 동안,안감 상피는 단순한 내배엽 상피에서 다층 요로 내벽으로 점차적으로 변형된다. 위장관의 내배엽 내벽의 패턴으로서,발달하는 요실금 내벽은 초기에 모든 층에서 다낭 20 에 대해 확산적으로 양성이다. 우로 텔 리움의 후속 성숙 동안,기저 층이 발달하여 씨티 5 와 씨티 13 양성에 의해 입증 될 수 있습니다. 우로텔륨의 추가 성숙은 우산 세포를 제외한 거의 모든 층에서 20 의 손실을 수반한다. 따라서 요로 발달의 세 가지 뚜렷한 단계가있는 것으로 보입니다. 첫 번째 단계는 기저 세포의 부족에 의해 특징 및 모든 층에서 식 20. 두 번째 단계는 기저 층의 외관에 의해 결정되지만,이 발현 패턴은 여전히 확산된다. 세 번째이자 마지막 단계에서는 우산층에서만 씨케이 20 이 특징인 씨케이 20 발현 패턴의 성숙이 있다. 이 경우 기저층은 잘 발달되어 있으며 면역 염색에 의해 입증 될 수 있습니다.
3. 정상 요로텔륨에서의 사이토케라틴 발현
방광은 요로텔륨에 의해 줄지어 있으며,요로텔륨은 소변에 대한 장벽으로 작용하고 관내 부피의 변화를 수용하는 데 특화되어 있다. 우로 텔 리움은 다층 상피로 나타납니다,세 개의 세포 영역:(1)접촉 세포로 구성 및 기저막의 평면에 수직으로 배향 기저 세포 층;(2)로 구성된 중간 세포 영역 2-5 세포 층; (3)말기의 중간 세포와 정점 표면이 내강을 향한 크고 자주 이핵화 된”우산”세포로 구성된 내강 또는 표면 세포층. 우산 세포는 세포 접합부의 구역 폐색 유형 및 정점 세포막 및 세포 내 방추형 소포 내에서 비대칭 단위 막의 특수 플라크의 존재에 의해 특징 지어진다. 이 외관은 세포막 내에 풍부한 우로 플라 킨이 존재하기 때문입니다.
정상 성인 요실금에서,요실근은 모든 요실금 세포층에 걸쳐 발현되고,요실금 5 는 기저부로 발현되며,요실금 20 은 우산 세포와 관련이있다(그림 1).
(아)
(비)
(아)
(비)
또한 일부 정상 표본의 중간 세포층에 몇 개의 양성 세포가있을 수 있습니다.
4. 유두 요도 신 생물에서의 사이토 케라틴 발현
요도 세포의 종양 변형은 대부분의 국가에서 방광암의 가장 흔한 형태 인 요로 암종을 일으킨다. 많은 환자들이 비침범성 종양 또는 라미 나 프로 프리아 만 침범하는 표재성 종양을 가지고 있습니다. 재발이 흔한 반면(50-70%),질병은 일반적으로 국소 치료로 조절할 수 있습니다. 그럼에도 불구하고 표면 질환 환자의 10-15%는 결국 근육 침습성 및 전이성 질환으로 진행됩니다. 감별법의 손실 및 이형성 변화의 존재에 의해 특징지어지는 급료에 있는 증가는 빈약한 예후의 둘 다 결정 요인입니다. 또한,일부 요로 암은 기저부/편평 상피 분화를 보여 주며,이는 예후가 좋지 않은 것과 관련이 있습니다.
사이토케라틴 20 및 씨티케라틴 5/6 에 대한 면역조직화학적 염색 패턴은 요로 신 생물의 유형 및 성질에 따라 다양하다. 유두 암종(그림 2)은 정상 요로텔륨에서 이러한 케라틴의 분포와 동일한 기저층에 국한된 우산 세포 및 염색에 국한되어있다.
(아)
(비)
(1))
(1)
(2)
(3))
반면,고급 요실금암종은 중간층뿐만 아니라 우산세포에 대한 확산성 면역반응을 갖는 경향이 있다. 또한,기저 층은 씨케이 5/6 양성에 의해 입증 될 수있다(그림 3).
(아)
(비)
(기음)
(에이)
(비)
(기음)
다른 한편으로,높은 등급의 유두 유두 암종은 기저층이없는 요로텔륨의 전체 두께에서 발현을 나타내며,5/6 에 대한 음성 염색(그림 4).
(비)
(기음)
(에이)
(비)
(기음)
기저 층 염색이 없을 때 확산 된 전체 두께 염색이있는이 패턴은 또한 층상 프로 프리아 또는 근육 침범이있는 고급 요실금 암종에서 발생하는 특징입니다(그림 5).
(아)
(비)
(아)
(비)
그것은 제안 되었습니다. 따라서 이러한 종양을 가진 환자에 대 한 치료 전략을 정의 하는 데 유용할 수 있습니다. 일부 잘 분화 된 유 두 종양에서 정상적인 표면 현지화 패턴을 유지 하거나 모든 세포 계층에 걸쳐 이종 또는 균일 하 게 긍정적인 반응을 보여주는 순수 요로 암 종의 대부분에 의해 유지 되었다. 편평 상피 분화를 가진 암종의 일부는 다음과 같은 감소를 나타냅니다. 그러나 이러한 영역은 기저 층의 기초 분포와 다른 패턴으로 씨케이 5/6(그림 6(에이)및 6(비))에 대해 긍정적으로 반응합니다.
(아)
)
(1))
(디)
(1)
(1)
(1)
(1))
어떤 경우에는 전체 암종이 기저 기능을 나타낼 수 있습니다. 이러한 경우 강한 반응성 씨 케이티 5/6 에 대한 양성이 거의 없거나 전혀없는 씨 케이티 20(그림 6(기음)과 6(디)).
최근 발표된 두 연구는 다양한 면역 염색 패턴의 임상 적 중요성에 관한 추가적인 증거를 제공했다. 이 연구들 중 하나에서,근치 적 신장 절제술로 치료받은 상부 요로 요도 암종 환자 222 명의 종양 샘플을 7 개의 기저/내강 면역 조직 화학적 마커의 발현에 대해 분석 하였다. 사용함으로써 씨티 5 과 씨티 20,그들은 네 가지 하위 유형을 정의했습니다.:(1)독점적으로 씨케이 20 양성 및 씨케이 5 음성(씨케이 20+/씨케이 5−)(2)독점적으로 씨케이 5 양성 및 씨케이 20 음성(씨케이 20+/씨케이 5+)(4)두 마커 모두 양성(씨케이 20+/씨케이 5+)(4)두 마커 모두 음성(씨케이 20+/씨케이 5−)
다변량 콕스의 회귀 분석에서 씨케이 20+/씨케이 5−하위 유형은 독립적 3.83 배의 음성 예후 마커는 다른 세 가지 하위 유형에 비해 암 특이 적 사망 위험이 증가했습니다.두 번째 연구에서는 면역조직화학적 염색이 초기 요실금 암종의 예후와 상관관계가 있는 것으로 보고되었다. 또한,비 근육 침 습 유 두 고급 상부 요로 요로 암종의 하위 그룹의 유전자 발현 프로필 연구 하 고 임상 결과와 상관 했다. 이러한 하위 그룹에는 씨케이 5/6-높음/씨케이 20-낮음,씨케이 5/6-높음/씨케이 20-높음 및 씨케이 5/6-낮음/씨케이 20-높음. 비근육침윤성 유두 고급 요실금암종의 예후가 악화될 것으로 예측되었다. 전사 분석은 하위 그룹에 걸쳐 308 차동 발현 유전자를 밝혔다. 유전자의 기능 분석 차동 높은 위험 형 설명할 수 있는 다른 사람에 비해이 하위 그룹에 농축 일반적인 프로세스로 세포 접착 확인. 늦은 세포 주기/증식 서명 또한이 하위 그룹에서 농축 했다. 따라서,입증 할 수있는 기저층이없는 경우에 대한 확산 염색을 특징으로하는 요골 종양은 유두 요골 암종의 가장 공격적인 아형을 나타내는 것으로 보인다.
사이토 케라틴 5/6 은 정상적인 각질화 표피 및 편평 상피 점막 상피뿐만 아니라 유방,타액선 및 전립선의 기저 세포 또는 근 상피 세포에도 존재한다. 전립선 및 유방 생검에서 기저 세포 층을 장식하여 침윤성 암종의 진단에 유용하며 후자는 기저 세포가 없습니다. 요로텔륨의 구조는 전립선 또는 유선관 상피의 구조와 다르며,그 결과 기저 세포의 존재 또는 부재를 사용하여 요로텔성 신 생물을 양성 또는 악성 유형으로 계층화 할 수 없습니다. 그러나 요로 신 생물에 기저 세포가 없으면 예후가 좋지 않을 수 있습니다. 따라서,보존 된 기초 층을 가진 고급 요로 암은 기초 층이 손실 된 다른 고급 종양에 비해 덜 공격적으로 행동 할 수 있습니다. 우리 실험실에서는 이러한 사이토 케라틴에 이중 염색을 사용하여 이러한 얼룩의 적절한 해석에 매우 도움이됩니다.
유사한 염색 패턴이 제자리 요로 암종에서도 볼 수 있습니다. 이 병변은 일반적으로 기저 세포 층을 유지할 수도 있고 유지하지 않을 수도 있습니다. 원위치 암종의 집착 유형 및 암종 세포의 파지 토이드 확장도 양성 염색에 의해 인식 될 수 있습니다(그림 7).
(아)
(비)
(기음)
(에이)
(비)
(기음)
소수의 경우,현장 암종은 기저 분화를 나타내는 씨알 5/6 에 대해 반응성 일 수 있습니다.
5. 사이토 케라틴 아이소 타입 발현 패턴과 상피 분화 사이의 밀접한 상관 관계는 사이토 케라틴이 상피 조직 구조 및/또는 기능에 결정적이라는 것을 시사한다. 그러나 개인의 정확한 기여 또는 사이토 케라틴 이소 타입의 조합이 정상 및 종양 상피 세포 표현형 및 행동에 미치는 영향을 확립하는 것은 어려웠습니다. 따라서,요실금 암 재발의 위험이 높은 나타내는 2 차 변화를 반영 아마 발암 중 요실금 분화 프로그램의 조절 장애와 관련 된 2 차 변화를 나타내는 20 면역 지역화. 다양한 우로 텔 리움 암종에서 우로 텔 리움 20 과 우로 텔 리움 5/6 의 발현 패턴은 우로 텔 리움의 발생 학적 발달 및 분화 단계를 모방하는 경향이 있다고 추측 할 수 있습니다. 따라서,기저층이 없는 확산성 단핵구 발현이 특징인 고급 요실암(침습 유무에 관계없이)은 비뇨 생식기 부비동이 배설강에서 분리된 후 요실암 분화의 초기 단계를 나타낼 수 있다. 이 발달 단계에서 우로 텔 리움은 확산 성 단백 동화 염색을 나타내지 만 기저층이 부족합니다. 일부 고급 요로 암종에서는 모든 층의 균일 한 얼룩이 있습니다. 이것은 배아 요로 분화의 중간 단계와 동일 할 수 있습니다. 잘 분화 된 요실금 암종은 그 발현이 대부분 우산 세포로 제한되는 성숙한 패턴의 존재를 특징으로하며,잘 정의 된 기저 세포 층 면역 반응성 씨티 5/6 도 존재한다(그림 8 및 9).
그림 8
(가)요로텔륨의 발생학적 발달 동안 분화의 단계를 묘사한 만화. 초기 단계 동안,발달중인 요로텔륨은 배설강에서 일반적으로 나타나는 단핵구증 20 발현을 유지한다. 이 단계에서 기초 층은 존재하지 않습니다. (비)요로텔륨의 발달 동안,기저층은 염색에 의해 입증 될 수 없다. (다)우산세포의 정상 발현과 우산세포 분화의 최종 단계 및 우산세포의 정상 기저층 발현의 존재 5/6.
그림 9
(가)우산세포에 한정된 저급 유두 요실암에서 면역조직화학적 염색 패턴을 묘사한 만화. (비)고급 요실금 암종은 요실금 5/6 을 포함하는 기저 층을 제외하고 모든 요실금 층에서 요실금 20 의 발현을 나타낸다. 이것은 종양의 탈분화의 중간 단계를 나타낼 수 있습니다. (기음)고급 요도 암종에서는 기저층이 없을 수 있지만 확산 성 염색 패턴이 유지됩니다. 이러한 특징은 암종의 추가 탈분화를 나타낼 수 있습니다.
이 패턴은 자궁 내 기간 동안 요로 발달 및 성숙의 최종 단계와 동일 할 수 있습니다.
요약하면,요실금 암종의 면역조직화학적 염색은 요실금 암종의 성질과 그 임상행동에 관한 유용한 정보를 제공할 수 있다.
데이터 가용성
이 연구를 뒷받침하는 데이터는 사용되지 않았습니다.
이해 상충
저자는 공개 할 자금이나 이해 상충이 없다고 선언합니다.
감사
저자는 두 가지 색상의 면역 조직 화학 염색의 성능에 우리의 면역 조직 화학 실험실의 다음 감독 및 기술 직원의 귀중한 도움과 전문 지식을 인정하고 싶습니다:라자 알 압둘라,감독자,후다 아메드 알 히지,감독자,그리고 주후 알리,수석 기술자.