신경학

소개

사지 거들 근이영양증(성소수자)은 근위 사지 거들 근육의 점진적인 낭비와 약점을 특징으로하는 이종 장애 그룹을 포함합니다(1,2). 성소수자는 매우 경미한 형태에서 중증,조기 발병,빠르게 진행되는 표현형에 이르기까지 가족 간 및 가족 내 가변성을 나타냅니다(2). 성소수자는 상 염색체 우성(성소수자 1)또는 열성(성소수자 2)으로 분류 될 수 있습니다. 첫 번째 그룹은 일반적으로 성인 발병 연령이 있으며 매우 흔하지 않은 반면(모든 성소수자의<10%),후자는 더 빈번합니다(1:15000)(1). 열성 형태 중 성소수자만증(또는 칼파인병증)은 전 세계적으로 가장 흔한 성소수자만증이며,모든 성소수자만증의 약 30%에 영향을 미칩니다(3). 질병의 임상 적 징후로는 발끝 걷기,뒤뚱 거리는 걸음 걸이,달리기 및 계단 오르기 어려움,견갑골 날개가 있습니다. 관절 구축,아킬레스 건 단축,척추 측만증이 일반적으로 관찰되는 반면 안면 및 목 근육은 영향을받지 않습니다(4). 젊은 환자의 무증상 고 혈증(정상 수준의 5-80 배)은 전임상 단계의 질병으로 간주되며 몇 년 동안 지속될 수 있습니다(1,5). 근육 약화의 발병 연령은 일반적으로 15 세에 발생하지만,이전(<12 세)또는 그 이후(>30 세)에 발생할 수 있습니다. 질병 진행은 진행 단계에서 보행,호흡 부전 및 폐 중요 용량 감소로 이어질 수 있습니다(6). 심장 침범(심장 리듬 장애,심장 전도 장애,좌심실 배출 기능 장애)은 때때로보고됩니다(6,7).(4)에서 병원성 돌연변이의 검출에 의해 확인되며,다른 대안 적으로 접합 된 성적표를 코딩한다. 그러나 전체 길이 성적 증명서는 주로 근육 조직으로 표현됩니다(8). 이 경우,시스테인 프로테아제 계열은 비 리소좀성 칼슘++-의존성 시스테인 프로테아제 계열의 일원이다. 근육에서는 기능 및 신진 대사 요구에 대응하여 근육 적응 및 성장에 필수적인”육종 리모델링”에 참여합니다. 현재까지,캡 3 에 걸쳐 490 개 이상의 병원성 돌연변이가 설명되었으며,그 중 대부분은 단일 뉴클레오티드 변화이다(4). 변이는 미토콘드리아 이상,성장 실패,산화 스트레스 증가 및 근종 파괴와 관련이 있으며,이는 모두 근육이 부하를 견딜 수 없게하여 근섬유 변성 및 근육 낭비를 유발합니다(8). 칼 페인 병증의 진단은 유전 적 이질성과 임상 적 및 도구 적 패턴의 비 특이성 때문에 어려울 수 있습니다. 실제로,근육 약화/위축,비대/의사 비대 및 힘줄 구축의 분포는 종종 다른 성소수자 또는 신경근 장애와 공유됩니다. 칼파 인 병증의 근육 생검 패턴은 경미한 근육 이상에서부터 심각한 영양 장애 변화에 이르기까지 일반적으로 비특이적입니다. 또한,면역 조직 화학적/생화학 적 마커는 일반적으로 신뢰할 수 없습니다: 칼 페인 신호는 비 기능성 단백질이있는 경우에도 정상 일 수 있으며,그 반대의 경우도 칼 페인 병증과 다른 다른 근이영양증에서도 감소 될 수 있습니다.

따라서 정확하고 신뢰할 수있는 결과를 제공하기 위해 감별 진단을 수행하는 것이 좋습니다. 이를 위해 다 유전자 패널,광범위한 게놈(엑솜/게놈 시퀀싱)및 단일 유전자 분석(직접 시퀀싱)(9)을 포함한 칼 파인 병증의 진단을 확인하기위한 분자 유전자 검사 접근법이 개발되었습니다. 진단,예측 또는 치료 목적(10-12)에 적용 되는 정보 데이터를 생성 하는 데 도움이 되었다. 유전자 패널은 특정 질환 또는 유전 적 및 표현형 이질성을 특징으로 관련 질환의 그룹과 관련된 유전자의 집합의 분석에 기초한다. 또한 부모로부터 하나 이상의 유전 적 결함의 상속으로 인한 혼합 또는 복잡한 표현형을 검출하는 데 유용 할 수 있습니다(13). 일반적으로,사용자 지정 설계 된 진단 유전자 패널에서 알려진된 돌연변이에 부정적인 복잡 한 표현형을 제시 하 고 광범위 한 감별 진단을 요구 하는 환자 전체 엑솜 또는 게놈 시퀀싱에 대 한 자격이 있습니다. 전체 엑솜/게놈 시퀀싱은 데이터 관리,해석 및 분석 비용 측면에서 더 비싼 접근법이지만 의심되는 유전 적 장애에 대한 분자 진단을 제공 할 가능성을 높입니다(13). 성소수자와 관련하여,높은 진단율,최적의 적용 범위,민감도 및 임상 시험의 특이성을 보장하기 위해 전용 성소수자 패널을 적극 권장합니다(9). 따라서 감별 진단을 촉진하고 새로운 원인 돌연변이를 식별하며 유전자형-표현형 상관 관계를 명확히하는 가장 좋은 시스템 중 하나를 나타냅니다(14,15).2013 년 12 월 29 일(화),2013 년 12 월 29 일(화),2013 년 12 월 29 일(화),2013 년 12 월 29 일(화),2013 년 12 월 29 일(화),2013 년 12 월 29 일(화),2013 년 12 월 29 일(화),2013 년 12 월 29 일(화),2013 년 12 월 29 일(화),2013 년 12 월 29 일(화),2013 년 이러한 결과 감안할 때 분석 병 적인 표현형과 관련 하 여 분석 데이터의 보다 포괄적인 해석을 제공 하기 위해 프로밴드의 가족 구성원을 확장 했다.

사례 발표

프로밴드와 친척의 임상 특성

프로밴드에서 질병의 발병은 10 세에 언급되었는데,그녀는 발끝으로 걷는 종아리 비대,달리기,계단 오르기 및 서기 어려움. 현상은 인접하는 위 사지의 연속적인 관련과 더불어 느리지 만 진보적인 악화시키는 것을,보여주었습니다. 13 세의 나이에,높은 수준의 당뇨(~8,000/리터)가 우연히 발견되었으며,결코 미오 글로빈 뇨증과 관련이 없습니다. 연속적으로 환자는 다양한 전문 센터에서 여러 신경근 조사를 받았습니다. 비특이적 특성을 가진 고전적인 영양 장애 그림(비대/위축성 섬유,내부 핵,괴사 성 섬유,결합 조직의 증가)을 보여주는 두 가지 근육 생검이 수행되었습니다. 예상대로,면역화학 및 면역블롯 연구는 비정상/감소를 나타내는 결정적이지 않았다.,,,,,사르글리칸,,,-디스트로글리칸,및 디스트로핀 신호는 괴사 섬유에서만 나타난다(반복된 면역화학 결과는 정상이며,라미닌에 대해서도 마찬가지이다).; 디스트로핀 및 칼 페인에 대한 면역 블록은 정상적인 신호를 나타냈다. 그러나,20-30%의 경우 정상적인 양의 단백질(1,16-18)을 나타 내기 때문에 칼 페인 -3 면역 블롯은 성소수자질병 진단에 완전히 민감하지 않은 것으로 알려져 있습니다. 임상 증상(고 각화증,종아리 비대/의사 비대)으로 인해 이영양증이 먼저 배제되었습니다. 그 결과,유전 적 변이 형은 유전 적 변이 형으로 분류되지 않았다. 환자는 30 세의 나이에 우리의 관찰에 와서,상당한 뒤뚱 거리는 걸음 걸이와 날개 달린 견갑골과 함께,상부 및 하부 사지에 모두 축 및 거들 참여를 제시. 하지에서 약점은 대퇴사 두근과 둔부 근육에서 두드러졌으며,이는”분명히 비대”(유사 비대)종아리 근육의 증거와 함께 상당히 위축성이었습니다(그림 1). 경련,근육통 및 잔물결은 관찰되지 않았습니다. 완전한 폐렴(폐활량 측정 및 수면 다원 검사)및 심장학(초음파 검사,24 시간 심전도 홀터 모니터링,심장 자기 공명 영상,표적 병력 및 심혈관 반사 분석을 통한 완전한 심장학 신체 검사)검사는 심각한 이상을 나타내지 않았습니다. 우리는 또한 산 말타 아제 결핍(림프구/백혈구의 정상적인 효소 활성 분석)을 배제했습니다. 근육 자기 공명 영상(자기 공명 영상)은 견갑골 거들,척추 주위 근육,허벅지의 후방 구획 근육(사르 토리 우스 및 그레이실리스 근육의 상대적 절약)및 다리(특히 비복근 내측 및 가자미)의 현저한 관여를 보였다(그림 2). 이러한 참여 패턴은 이미 칼페 인 병증의 자기 공명 영상에 관한 문헌에서보고되었다(19,20). 또한,자기 공명 영상 연구는 종아리 근육이 효과적으로 위축되고 지방 침윤을 특징으로하여 근육”확대를 일으키는 것으로 나타났습니다.”임상 프레 젠 테이 션,발병의 나이,진행 속도,근육 약화의 분포 및 프로 밴드에서 자기 공명 영상 연구 결과 문헌(4,21,22)에 광범위 하 게 설명 된 성 소자 경련의 진단과 완전히 일치 했다.

프로밴드의 가족 구성원에 대한 평가는 신경근 질환의 병력이 밝혀지지 않았으며 부모 간의 혈족의 증거는 밝혀지지 않았다. 그러나 55 세의 나이에 프로 밴드의 어머니는 특발성 서맥(밤에 최대 40 혈압)으로 진단 된 2 개의 실신 에피소드를 제시했습니다. 프로 밴드의 어머니에 대한 광범위한 심장 학적 조사는 여러 실신 에피소드/지방 혈증이 발생한 후 증상이있는 방실 블록을 진단했습니다. 분석 기본 1 도 유명 블록의 존재를 보여 주었다,심한 서맥의 여러 기간,주로 야행성 종종 증상,2 도 유명 블록의 일부 단계와 관련된,유형 모두 1 과 2,야행성 완전한 유명 해리의 일부 단계. 심 초음파 및 인체 측정 검사는 특허 난원 난원을 제외하고 중요한 변화를 나타내지 않았습니다. 어머니는 다른 임상 증상을 나타내지 않았고,상태 또는 위험 요소를 선행시켰다. 그녀의 임상 사진을 감안할 때,프로밴드의 어머니에 이식 했다. 또한,가족 역사에 따르면 프로밴드의 할머니와 증조부도 각각 55 세와 30 세의 나이로 이식된 것으로 나타났다. 또한,프로 밴드 할머니의 형제는 심한 확장 성 심근 병증으로 51 세에 사망했습니다. 심장학 검사는 또한 완전하게 꾸밈없는 유래한 프로밴드의 아버지 그리고 모성 삼촌에 실행되었다.

본 연구는 산타 루치아 재단 윤리위원회의 승인을 받았으며 헬싱키 선언에 따라 수행되었습니다. 모든 참가자는 유전자 분석을 위해 서명 된 정보에 입각 한 동의를 제공했으며,이와 관련하여이 사례 보고서의 게시에 대한 동의도 제공했습니다.2013 년 11 월 15 일~2013 년 12 월 15 일,2013 년 12 월 15 일,2013 년 12 월 15 일,2013 년 12 월 15 일,2013 년 12 월 15 일,2013 년 12 월 15 일,2013 년 12 월 15 일,2013 년 12 월 15 일,2013 년 12 월 15 일,2013 년 12 월 15 일,2013 년 12 월 15 일,2013 년 샘플을 사용하여 염기 서열화 하였다 이온 페지엠 시스템 과 이온 증폭기 사용자 정의 패널 높은 특이성(열 피셔 과학). 패널의 크기는 129 였습니다.20 배의 최소 범위와 전체 패널의~99.72%를 선별 할 것으로 예상된다 13 킬로바이트.패널은 과학 문헌을 사용하여 선정 된 18 유전자를 포함,제네리뷰(www.ncbi.nlm.nih.gov/books/NBK1116/)및 일반 인구의 병원성 변이체의 빈도. 표 1 에 대한 자세한 설명이 요약되어 있습니다.

라이브러리 구축은 이온 증폭기 라이브러리 키트 2.0 에 의해 수행되었다. 약 10ng/μl 시작의 DNA 를 이용한 multiplex PCR 반응입니다. 연속적으로,원치 않는 오염물질을 제거하기 위해 2 개의 정제 단계(암퓨어,베크만 콜터 사용)를 수행하였고,최종 피시크릿을 수행하였다. 템플렛 증폭 및 농축 단계는 이온 원터치 2 시스템 및 이온 원터치(써모 피셔 과학)에 의해 수행되었다. 이온 피셔 과학(850 흐름 필요)및 이온 피셔 시퀀서(열 피셔 과학)에서 실행. 결과는 이온 리포터 4.6(써모 피셔 과학)및 통합 게놈 뷰어를 사용하여 분석 하였다. 유전자 변이체의 해석은 인간 유전자 변이 데이터베이스,라이덴 오픈 변이 데이터베이스,클린바르 및 엑삭에 의해 수행되었다. 검출 된 변이체의 기능적 효과는 돌연변이 선별기,바르 섬,선별기,폴리펜 2,스마트,인간 접합 파인더를 포함한 생물 정보 예측 도구에 의해 평가되었습니다. 직접 시퀀싱(빅 다이 터미네이터 버전 3.본 발명의 실시예에 따르면,유전체 변이체 확인 및 유전체 코딩 영역 서열화를 위해 실시된 유전자 변이체 확인 및 유전체 코딩 영역 서열화를 위해 실시된 유전자 변이체 및 유전체 코딩 영역 서열화를 위해 실시된 유전자 변이체 및 유전체 코딩 영역 서열화를 위해 실시된 유전자 변이체 및 유전체 코딩 영역 서열화를 위해 실시된 유전자 변이체 및 유전체 코딩 영역 서열화를 위해 실시된 유전자 변이체 및 유전체 코딩 영역 서열화를 위해 실시된 유전자 변이체 및 유전체 코딩 영역 서열화를 위해 실시된 유전자 변이체 및 유전체 코딩 영역 52904225-52904560;48243242-48243570).

결과

프로밴드의 이형 접합체 분석 결과 3 개의 이형 접합체가 밝혀졌다(보충 그림 1). 이 두 가지 변종은 각각 엑손 4 와 16 에서 국소화되었다. 첫 번째는 단일 뉴클레오티드 결실이며 유럽 국가에서 가장 흔한(75%의 경우)병원성 변이체입니다(1). 예상대로,생물 정보 학적 분석 분류 씨.550 델라(아르 자형 80338800)기능 상실의 변형으로(피. 예측 도구(돌연변이 선별,HSF,Varsome,PolyPhen2,체로)설명하는 변형으로 해로운. 또한,스마트는 변경된 단백질 제품에 칼파인 3 도메인과 세 가지”에프-손”모티프가 부족하다는 것을 밝혀냈다. 첫 번째 도메인은 칼페인의 신호 전달 경로에 관여하는 반면,에프-손은 단백질의 캘리포니아++-의존적 활성화에 필수적입니다(4).1813 년>에 관하여,그것은 접합의 잠재적 변경으로 인해(돌연변이 감별사,바르 섬,폴리펜 2,선별에 의해)해로운 것으로 예측 된 새로운 미스 센스 변이체(피.발 605 루)이다. 이 변종은 문헌이나 온라인 데이터베이스 사이에 주석이 붙어 있지 않으며 200 명의 통제 대상자에서는 발견되지 않았다. 불행히도,스마트 도구에 의한 분석은 변형이 특성화되지 않은 도메인 내에 위치하기 때문에 중요한 결과를 가져 오지 않았습니다. 2013 년 12 월 15 일(토),2013 년 12 월 15 일(토),2013 년 12 월 15 일(토),2013 년 12 월 15 일(토),2013 년 12 월 15 일(토),2013 년 12 월 15 일(토),2013 년 12 월 15 일(토),2013 년 12 월 15 일(토),2013 년 12 월 15 일(토),2013 년 12 월 15 일(토),2013 년 12 월 15 일(토),2013 년 12 월 15 일(토),2013 년 12 월 15 일(토),2013 년 지나치게 언급된 변종은 널 변종일 것으로 예측되었으며,아직 문헌이나 온라인 데이터베이스에서 설명되지 않았으며 200 명의 대조군 피험자에서 발견되지 않았다. 예측 도구(돌연변이 감별사,변이,바르 섬,폴리펜 2,선별)는 단백질 제품에 대한이 변이체의 병원성 효과를 설명했습니다. 스마트 툴은 변형 된 단백질 단백질 구조 및 기능을 유지하는 데 필수적인 필라멘트 도메인이 부족하다고보고했다. 분리 분석은 씨의 존재를 강조.그녀의 심장 증상 및 질병의 그녀의 가족력과의 가능한 연관성을 암시하는 어머니에서만 변이체.2015 년 11 월 15 일(토),2015 년 12 월 15 일(일),2015 년 12 월 15 일(일),2015 년 12 월 15 일(일),2015 년 12 월 15 일(일),2015 년 12 월 15 일(일),2015 년 12 월 15 일(일),2015 년 12 월 15 일(일),2015 년 12 월 15 일(일),2015 년 12 월 15 일(일),2015 년 12 월 15 일(일),2015 년 12 월 15 일(일),2015 년; 전산 증거의 여러 줄 유전자 또는 유전자 제품(3 쪽)에 해로운 영향을 지원 합니다. 에 관하여는 임상의 분류 c.550C>T(LMNA)의 ACMG,그것로 지정할 수 있습니다 병원성 변형,이기 때문에 null 을 변종의 손실을 일으키는 원인이되는 기능(p.Gln184*)에 LMNA(PVS1);그것은 결석에서 ExAc,GnomAD 및 1000Genome 브라우저 데이터베이스(PM2);그것은에 있는 중요한 없이 도메인을 양성 변화(PM1); 전산 증거의 여러 라인은 유전자 또는 유전자 제품에 해로운 영향을 지원(쪽 3).1967 년

결론

이 사례 보고서는 성소수자전거에 의해 영향을 받은 환자를 제시했는데,이 환자는 성소수자전거에서 돌연변이의 운반체로 발견되었다. 이 연구 결과는 프로밴드의 신경근 표현형을 설명합니다. 이러한 결과를 감안할 때 가족 구성원은 분리 분석을 받았습니다. 그 결과,모체는 각각 3799 의 캐리어로 변성되었다. 산모는 칼파인병증과 관련된 병원균 돌연변이에 대한 건강한 운반체로 간주될 수 있다. 그러나 심장 혈관 병리(서맥 및 실신 에피소드)를 설명 할 수 있습니다. 어머니의 신경근 증상의 부재와 프로 밴드의 독특한 임상 사진은 가능한 연관성을 배제했습니다.신경근 표현형,특히 에머리-드레이 푸스 근이영양증에 관한. 실제로,심실 세동맥은 특히 성소수자 2 에서 상대적으로 절약되는 외측 및 상완 이두근에 영향을 미칩니다(24,25).

산모의 삼촌은 이형 접합체 에 대해서만 예상 한 바와 같이 신경근 또는 심혈관 문제를 나타내지 않았다. 이 소설에서 그는”아버지”라고 불렸고,”아버지”는”아버지”라고 불렸고,”아버지”는”아버지”라고 불렸고,”아버지”라고 불렸고,”아버지”라고 불렸고,”아버지”라고 불렸고,”아버지”라고 불렸다. 전반적으로,분리 분석 그녀의 친척 으로부터 프로밴드의 3 개의 돌연변이의 상속을 확인 하 고 무시 될 수 없는 심근증에 대 한 친숙 함을 강조(그림 3).

전체적으로 이러한 데이터는 몇 가지 중요한 고려 사항을 제기합니다. 첫째,이 환자의 고환 판넬은 칼파 인 병증의 분자 진단에 도달하여 하나의 알려진 돌연변이와 병원성으로 예측되는 두 번째 새로운 변이를 탐지하는 데 중요했습니다. 두 번째로,이 판넬은 프로밴드의 새로운 변종을 식별할 수 있게 하였다. 이 결과는 긍정적 인 가족력 및 분리 데이터와 일치하여 어머니의 심혈관 질환을 설명하고 더 중요한 것은 프로 밴드에서보다 구체적인 심장 추적 관찰을 권장하는 것입니다. 우리는 프로 밴드가 여전히”무증상 심장 단계”에있을 수 있다고 가정 할 수 있도록 심장 학적 증상이 나중에(55 세)어머니에서 발생했다는 점에 유의하는 것이 중요합니다.”그러나,모체에 비해 프로밴드에서 유전체 변이의 가변적 표현형 발현은 배제될 수 없다. 이러한 모든 데이터는 결과의 올바른 해석,적절한 유전 상담 및 결국 임상 관리 및 후속 조치를 위해 임상의와 유전 학자 간의 통합 된 접근법의 중요성을 강조합니다. 유전 및 가족 상담과 관련하여,부부의 생식 위험을 추정하기 위해 프로밴드의 파트너에 대한 유전자 분석도 수행되었습니다. 파트너는 18 개의 테스트 된 모든 유전자에 대해 음성이었으며,이는 테스트가 84%민감하다는 점을 고려할 때 성소수자 원인 돌연변이에 대한 건강한 운반체가 될 1/650 의 잔류 위험이 있음을 의미합니다. 프로밴드의 유전적 프로파일과 비핵구증 검사의 민감도를 고려할 때,부부가 칼파인병증에 걸린 아이를 가질 수 있는 잔여 위험은 1/1300 입니다. 다른 한편으로,유전병원성 변이체는 상염색체 우성 패턴에 따라 전염되는데,이는 프로밴드가 이형 접합체를 가질 확률이 50%라는 것을 의미한다. 그러나,자손의 임상 사진 확실히 예측할 수 없습니다 새로운 변종 이며 표현 형에 미치는 기능적 영향은 아직 알 수 없습니다.

결론적으로,이 사례 보고서는 정확한 성소수자만증 진단을 제공 하 고 복잡 한 표현형 및 여러 유전자에 다른 돌연변이의 상속에서 발생 하는 동반 질환을 설명 하 고 임상 적 유용성을 강조 합니다. 그러나,임상 실습에 있는 자궁경부전증의 적용은 결과의 명확한 설명,환자의 표현형에 가능한 연루,가족 내의 재발 리스크 뿐 아니라 가능한 의외 발견을 설명하기 위하여 제공하기 위하여 전 그리고 포스트 유전 상담과 항상 결합되어야 합니다.

데이터 가용성

이 연구에 대해 데이터 세트가 생성되거나 분석되지 않았습니다.

윤리 선언

이 연구는 모든 과목에서 서면 동의 산타 루치아 재단의 윤리위원회의 권고에 따라 수행되었다. 모든 피험자는 헬싱키 선언에 따라 서면 동의서를 제출했습니다. 이 의정서는 산타 루치아 재단 윤리위원회의 승인을 받았습니다.1967 년

저자 기여

데이터 수집,분석 및 해석에 기여했다. 원고 초안을 작성하는 데 관여했습니다. 임상 데이터의 수집에 참여하고있다. RC,CSt,VC,GC,RG,GPa,SC,CP,JM,SZ,GPr,GM,CSa,SS,그리고 예를 들어 주의 최종 승인 버전을 발행했습니다.

자금

이 작업은 5 배 2016 국립 보건부 2 에 의해 지원됩니다.

이해 상충 성명

저자는 연구가 잠재적 인 이해 상충으로 해석 될 수있는 상업적 또는 재정적 관계가없는 상태에서 수행되었다고 선언합니다.

보충 자료

이 기사의 보충 자료는 다음에서 온라인으로 찾을 수 있습니다: https://www.frontiersin.org/articles/10.3389/fneur.2019.00619/full#supplementary-material