absorptiometrie
bij de meest gebruikte spectrale methode wordt de elektromagnetische straling die door het instrument wordt geleverd door de analyt geabsorbeerd en wordt de hoeveelheid absorptie gemeten. Absorptie treedt op wanneer een kwantum van elektromagnetische straling, bekend als een foton, slaat een molecuul en verheft het tot een of andere opgewonden (hoge energie) staat. De intensiteit (d.w.z., neemt de energie, in de vorm van elektromagnetische straling, overgebracht over een oppervlakte-eenheid per tijdseenheid) van de invallende straling af naarmate deze door het monster gaat. De technieken die absorptie meten om een assay uit te voeren zijn absorptiometrie of absorptiespectrofotometrie.
normaal wordt de absorptiometrie onderverdeeld in categorieën, afhankelijk van het energie-of golflengtegebied van de invallende straling. In volgorde van toenemende energetische straling, zijn de soorten absorptiometrie radiowave absorptiometrie( zogenaamde nucleaire magnetische resonantie spectrometrie), magnetron absorptiometrie (met inbegrip van elektron spin resonantie spectrometrie), thermische absorptiometrie (thermische analyse), infrarood absorptiometrie, ultraviolet-zichtbare absorptiometrie, en X-ray absorptiometrie. De instrumenten die de straling leveren en meten variëren van het ene spectrale gebied tot het andere, maar hun werkingsprincipes zijn hetzelfde. Elk instrument bestaat uit ten minste drie essentiële onderdelen: (1) een bron van elektromagnetische straling in het juiste energiegebied, (2) een cel die transparant is voor de straling en die het monster kan bevatten, en (3) een detector die de intensiteit van de straling nauwkeurig kan meten nadat deze door de cel en het monster is gegaan.
in wezen neemt de hoeveelheid geabsorbeerde straling toe met de concentratie van de analyt en met de afstand door de analyt die de straling moet afleggen (de celweglengte). Naarmate de straling in het monster wordt geabsorbeerd, neemt de intensiteit van de stralingsbundel af. Door de verminderde intensiteit te meten via een cel met vaste baanlengte die het monster bevat, is het mogelijk om de concentratie van het monster te bepalen. Omdat verschillende stoffen absorberen bij verschillende golflengten (of energieën), moeten de instrumenten in staat zijn om de golflengte van de invallende elektromagnetische straling te regelen. In de meeste instrumenten wordt dit bereikt met een monochromator. In andere instrumenten wordt dit gedaan door gebruik te maken van stralingsfilters of door gebruik te maken van bronnen die straling uitzenden binnen een smalle golflengteband.
omdat de golflengte waarop stoffen straling absorberen afhankelijk is van hun chemische samenstelling, kan absorptiometrie ook worden gebruikt voor kwalitatieve analyse. Analyte wordt geplaatst in de cel, en de golflengte van de invallende straling wordt gescand door een spectraal gebied terwijl de absorptie wordt gemeten. De resulterende plot van stralingsintensiteit of absorptie als functie van Golflengte of energie van de invallende straling is een spectrum. De golflengten waarbij pieken worden waargenomen worden gebruikt om componenten van de analyte te identificeren.