Kolin – acetil-transzferáz (ChAT) – hasznos immunhisztokémiai marker a neuronok morfológiai vizsgálataihoz

a kolin-acetil-transzferáz (ChAT) az az enzim, amely felelős az acetilkolin neurotranszmitter bioszintéziséért. Az acetilkolin többségét lokálisan szintetizálják az idegterminálokon, ahol a ChAT katalizálja az acetilcsoport átvitelét az acetil-koenzimből a kolinba, amely folyamat egyetlen lépésben zajlik. A chatet a központi idegrendszer (CNS) és a perifériás idegrendszer (PNS) kolinerg neuronjai fejezik ki (4), amelyek az agy, a gerincvelő és a retina számos különböző régiójában oszlanak meg, és részt vesznek a tanulásban, a memóriában, a mozgásban és a látásban (2,4).

ChAT expresszió patkány gerincvelő neuronokban, IHC immunhisztokémia szabadon lebegő: Kolin-acetil – transzferáz/ChAT antitest-IHC patkány gerincvelőn nyúl antitest alkalmazásával patkány, egér ChAT (kolin O-acetil-transzferáz): teljes szérum 1:2000 hígításban. Az antitest immunizáló peptiddel történő előzetes felszívódása teljesen megszünteti az immunfestést (nem látható).

Tudjon meg többet a neuronális markerekről

ChAT antitestfestést gyakran használnak a kolinerg sejtpopulációk morfológiai vizsgálataiban. Az emlős retinában például a csevegést mind az amakrin, mind a ganglionsejtek részhalmazai fejezik ki (2). Ezek a ChAT-pozitív neuronális populációk Anti-ChAT antitestekkel azonosíthatók az immunhisztokémiai (IHC) vizsgálatok összefüggésében. A retinában végzett ChAT IHC jellegzetes kettős sávos festési mintát hoz létre a belső plexiform rétegben, ahol a kolinerg amacrin és a ganglionsejtes dendritek két különálló szinaptikus réteget alkotnak (2). Az egyik Novus ChAT antitestet az emlős retinában a kolinerg sejtek túlélésének számszerűsítésére használták az egérbetegség-modellekben a protein-kináz gátlást követően (1). A Novus ChAT antitesteket számos sejttenyészeti rendszerben is alkalmazták a kolinerg neuronok differenciálódásának és túlélési arányának különböző manipulációkat követő értékelésére. Például a Novus antitestet (NBP1-30052) használták a differenciált kolinerg neuronok azonosítására olyan sejtvizsgálatokban, amelyek célja egy olyan tenyészet-alapú kísérleti rendszer meghatározása, amely nem támaszkodik az elsődleges neuronokra (3). Míg egy másik Novus Anti-ChAT antitestet (NB110-89724) használtunk a kolinerg neuronok túlélésének kvalitatív értékelésére gerincvelő explantokban (5).

a Novus Biologicals ChAT reagenseket kínál az Ön kutatási igényeihez, beleértve:

  • ChAT antitestek
  • ChAT lizátumok
  • ChAT fehérjék
  • ChAT RNAi

PMID:

  1. 21498608
  2. 9786999
  3. 23095258
  4. 10594838
  5. 23674184

  • Burugula, B., Ganesh, B. S. és Chintala, S. K. (2011). A kurkumin csillapítja a retina ganglionsejtek staurosporin által közvetített halálát. Invest Ophthalmol Vis Sci 52, 4263-4273.
  • Jeon, C. J., Strettoi, E. és Masland, R. H. (1998). Az egér retina fő sejtpopulációi. J Neurosci 18, 8936-8946.
  • Liu, J., Tu, H., Zhang, D., Zheng, H. és Li, YL (2012). Feszültségfüggő nátriumcsatorna expresszió és akciós potenciál generálás differenciált NG108-15 sejtekben. BMC Neurosci 13, 129.
  • Oda, Y. (1999). Kolin-acetil-transzferáz: a központi idegrendszer szerkezete, eloszlása és kóros változásai. Pathol Int 49, 921-937.
  • Schizas, N., Rojas, R., Kootala, S., Andersson, B., Pettersson, J., Hilborn, J., and Hailer, N. P. (2014). A hialuronsav alapú hidrogél fokozza az idegsejtek túlélését a gerincvelő szeletkultúrákban a szülés utáni egerekből. J Biomater Appl 28, 825-836.

Vélemény, hozzászólás?

Az e-mail-címet nem tesszük közzé.