absztrakt
kétlépcsős klonális tenyésztési rendszert használtunk annak egyértelmű bizonyítására, hogy az egyes primitív limfohemopoetikus progenitor sejtek képesek differenciálódni a mieloid vagy a B-limfoid vonal mentén. Az erősen dúsított egérvelő sejteket mikromanipulációval külön-külön vontuk be tenyészetbe pokeweed mitogénnel stimulált lépsejt kondicionált táptalaj, eritropoetin, acél faktor (SF) és interleukin (IL) 7 jelenlétében. Az egyes sejtek negyvenöt százaléka elsődleges kolóniákat alkotott, amelyek több hemopoetikus vonalat fejeztek ki. Amikor az egyes kolóniákból származó alikvotokat SF-et és IL-7-et tartalmazó másodlagos metil-cellulóz tenyészetben replikálták, az elsődleges kolóniák 41% – a limfocita kolóniákat eredményezett. A limfocita kolóniák sejtjei blasztszerűek és B220+, sIg -, Mac-1 -, Gr-1 -, Ly-1 -, L3T4 -, Ly-2-és CD3-voltak. A sejtek harminc-70%-a Thy-1+volt. a MU-lánc mRNS-t a legtöbb sejtben in situ hibridizációval detektáltuk antiszensz RNS-szondával. Amikor egyetlen sejtből származó limfocita kolóniákat gyűjtöttek össze és külön-külön injektáltak scid egerekbe, a donor típusú IgM mérhető volt az egerek szérumában, és a Lépek donor típusú B sejteket tartalmaztak. Ezután elvégeztük a növekedési faktorok kezdeti szűrését, hogy azonosítsuk azokat a növekedési faktorokat, amelyek helyettesíthetik a pokeweed mitogénnel stimulált lépsejtekkel kondicionált táptalajt az elsődleges tenyészetben. Két olyan faktor kombinációja, amely magában foglalta az SF-et és az IL-6-ot, az IL-11-et vagy a granulocyta kolónia-stimuláló faktort, mind hatásosak voltak az elsődleges tenyészetben a B-lymphoid potenciál fenntartásában. Érdekes módon az IL-3 nem tudta sem helyettesíteni, sem szinergikusan hatni az SF-vel, hogy támogassa az elsődleges kultúrák limfoid potenciálját. Megfigyeléseink azt mutatják, hogy sok primitív progenitor, amelyet korábban mieloid elkötelezettnek hittek, szintén rendelkezik B-limfoid potenciállal. Ennek a tenyésztési rendszernek értékesnek kell lennie a lymphohemopoiesis korai stádiumát szabályozó mechanizmusok tisztázásához.