bár a kiskérődzők chlamydialis fertőzéseivel kapcsolatos munka nagy része az anyajuhokra vonatkozik, a chlamydiosisnak gazdasági és közegészségügyi hatása van számos kecskefarmon szerte a világon. A chlamydialis abortuszokat először Németországban jelentették 1959-ben.Ezt követően a betegséget Bulgáriában, Spanyolországban, az USA-ban, Franciaországban, Indiában, Japánban, az Egyesült Királyságban, Csádban, Görögországban, Tunéziában diagnosztizálták. Sok területen a chlamydialis abortusz a második oka a fertőző abortuszoknak a brucellózis után, és a fő oka a legtöbb országban, ahol a brucellózist kontrollálják
etiológia
a betegség egy kis Gram-negatív baktérium, a Chlamydia psittaci, amely az eukarióta sejtek citoplazmájában növekszik egy egyedülálló fejlődési ciklusban, amelyben rezisztens fertőző formában az elemi testek (EB) váltakoznak egy metabolikusan aktív, nem fertőző formával a retikuláris testek (RB). Az EB a gazdasejt membránjához kötődik, és elősegíti saját endocitózisát egy membrán korlátozott vakuolában, az úgynevezett inklúzióban, amely nem egyesül a lizoszómákkal. Ezután az EB átalakul RB – ben, amely bináris hasadással replikálódik. Több felosztás után az RBs, amelyek kitöltik az összes befogadást, visszaalakulnak fertőző Eb-kké. Ezeket az Eb-ket gazdasejt-lízissel vagy az inklúzió extrudálásával szabadítják fel a gazdasejtből .
taxonómia
a Chlamydia psittaci a chlamydia nemzetség négy fajának egyike, amely magában foglalja a Chlamydia trachomatist, a Chlamydia pneumoniae-t és a Chlamydia pecorumot is.
a Chlamydia trachomatis és a Chlamydia pneumoniae egyaránt emberi kórokozók. A C. psittaci sokféle madarat, emlőst és esetenként embert fertőz meg, a C. pecorum pedig kérődzőket, sertéseket és koalákat fertőz meg. Anyajuhokban és kecskékben a C. pecorum tüdőgyulladást, kötőhártya-gyulladást és ízületi gyulladást okoz, de nagyon gyakran tünetmentes bélfertőzésekből izolálódik .
a nagyon ritka esetek kivételével a kecskékben abortuszt kiváltó törzsek a C. psittaci 1-es szerotípusához tartoznak, amely szintén felelős a tüdőgyulladásért, a kötőhártya-gyulladásért és az ízületi gyulladásért, valamint néha a klinikai tünetek nélküli bélfertőzésekért. A C. psittaci faj nagyon heterogén, a negyedik C. pecorum faj megjelenése előtt .
a 16S és 23S rRNS gének filogenetikai elemzése kilenc differenciált faj létezését sugallja a Chlamydiaceae-ben, és lead Everett et al. két új nemzetség, a Chlamydia és a Chlamydophila létrehozását javasolja. A chlamydia nemzetség, amely megfelel a régi Chlamydia trachomatis megnevezésnek, 3 fajt tartalmaz: C. trachomatis (emberi törzsek), C suis (spontán vetélésekből, hüvelyi fertőzésekből és pneumoniae-ból izolált C. trachomatishoz kapcsolódó sertés törzsek) és C. muridarum (egér-hörcsög törzsek).
a Chlamydophila nemzetség 6 fajt csoportosít át: C. pneumoniae, C. pecorum, C. psittaci (korábbi Chlamydia psittaci madár törzsek), C. caviae, a tengerimalacok bevonásával járó kötőhártya-gyulladás (GPIC) kórokozója, C. felis (macskákat megfertőző C. psittaci törzsek) és C. abortus (klasszikus szerotípus-1 Chlamydia psittaci törzsek). Az eredmények megegyeznek öt másik kódoló gén (GroEL, KDO-transzferáz, MOMP, 60 kDa ciszteinben gazdag fehérje és ciszteinben gazdag lipoprotein) filogenetikai elemzésével és a törzsek biológiai tulajdonságaival . A 16S-23S rRNS gének riboszomális intergenikus spacer doménjének restrikciós hossz polimorfizmus analízise (RFLP) gyors és reprodukálható módszert biztosít az új faj chlamydialis törzseinek azonosítására és osztályozására . A tudományos közösség egyes tagjai azonban nem értenek egyet az új chlamydialis taxonómia javaslatával, mivel az nem veszi figyelembe a baktériumok teljes genomját.
klinikai tünetek
a Chlamydiosist klinikailag az abortusz jellemzi a terhesség utolsó hónapjaiban, az alacsony születési súlyú gyenge gyerekek halvaszületéseiben vagy koraszüléseiben. Az abortuszok korábbi klinikai specifikus tünetek nélkül fordulnak elő, még akkor is, ha egyes kecskéknél tartós köhögés alakulhat ki légszomj nélkül, vagy ízületi gyulladás és keratoconjunctivitis. Kísérleti fertőzések esetén néhány kecskén az abortusz előtti napon enyhe hüvelyi ürülést figyeltek meg . A megtartott placenták és a méhgyulladás nem szokásosak, még akkor sem, ha gyakoribbak, mint az anyajuhoknál . Az abortusz után a kecskék gyorsan felépülhetnek, vagy barna váladékot jelenthetnek a hüvelyből. Kísérleti fertőzésekben vagy néhány természetes fertőzésben, ahol magas az abortuszok aránya, az abortált kecskéknek csak 50% – a vagy annál kevesebb, gyorsan felépült, míg az anyajuhokban az abortuszt követő betegség szokatlan. Ennek oka lehet a törzsek közötti virulencia különbségek, mivel a törzsek virulencia mechanizmusairól nagyon keveset tudunk. Egérmodellekben a juh-és kecskefélék között nem volt virulencia-különbség, de az amplifikált fragmentumhosszúságú polimorfizmus (AFLP) genomiális különbségeket mutatott az AC1 kecskefélék és az 1-es szerotípusú juh-C. psittaci törzsek között .
bár bebizonyítottuk , hogy a fertőzött kecskék kiszolgálása fertőzött apákat eredményezhet, eddig nem írták le a C. psittaci okozta epiddymitist az apák. Ez valószínűleg a kecskék chlamydiosisával kapcsolatos vizsgálatok nagyon kis számának tudható be, nem pedig a kosok és a bikák nagyobb érzékenységének a chlamydialis fertőzésekre.
egy újonnan fertőzött állományban az abortusz aránya súlyos. Gyakran 30% vagy több, néha a terhes nők 90% – a megszakadhat, és a tejtermelés csökkenhet. Az abortusz magas aránya 2 vagy 3 évig figyelhető meg, amely után a betegség ciklikus jellegűvé válik: a terhes nők 10% – A évente több évig megszakítja az abortuszt, amíg új kitörés nem következik be, majd az összes egyéves megszakítja. Az abortusz után kialakult magas szintű immunitás felelős a betegség ciklikus fejlődéséért az állományban: kivételes, ha egy kecske kétszer megszakítja. Papp és Shewen kimutatták, hogy az elvetélt anyajuhok egy része krónikusan megfertőződhet. Chlamydialis antigének és DNS kimutatható a hüvelyben, a méhben és a méhcsövekben az abortált anyajuhok peri-ovulációs periódusa alatt. Nem végeztek kutatást a krónikus fertőzések előfordulásának meghatározására a kecskeállományokban.
a magzat nem mutat specifikus makroszkopikus elváltozást. A rövid időn belül szállított gyerekeket barna Anyag fedheti le. Gyakran megfigyelhető tiszta vagy vérrel festett diffúz ödéma, vérfoltos folyadékok a hasi és pleurális üregekben, valamint petechiák a nyelven, a bukkális üregben és a patákon.
a betegség átvitele
a fertőzött nagyszámú chlamydiae-t választ ki a placentában és a magzati folyadékokban a viccelés és az abortusz idején. Egyes kecskék hüvelyfolyadékokban a Chlamydia-t az abortusz előtt több mint két héttel az abortusz után több mint két héttel elönthetik. Ez magyarázhatja az abortusz gyakoribb előfordulását az újonnan fertőzött kecskeállományokban, mivel a fertőzésre való hajlam az állat fiziológiai állapotától függően változik. A 100 napnál rövidebb vemhes kecskék hajlamosabbak, mint a vemhesség végén lévők vagy a kopár kecskék. Kisebb mennyiségű chlamydia is ürül a vizeletben, a tejben és a székletben néhány nappal az abortusz után.
a fertőzött anyától született fiatal kecskék megtarthatják a fertőzést az állományban, vagy átadhatják más állományoknak. Egy 27 éves csoport felmérése egy fertőzött állományban az első életévük során megmutatta, hogyan terjeszthetik a betegséget azáltal, hogy szerológiai válaszuk nem fedezi fel őket. Ezeket a fiatal kecskéket 3 csoportra lehet osztani a vemhesség/szülés szerint. Az első csoport általában élő kölyköt nevelt, a második csoport meddő volt, vagy a vemhesség túl korai szakaszában vetették el, hogy kimutatható legyen, a harmadik csoportban pedig a kecskék abortáltak. A két első csoport KOMPLEMENT rögzítő (CF) antitestjei növekedtek, hogy elérjék a maximális értéket (1/80 – 1/160) a tenyésztés idején, majd az antitestszint a viccelés idejéig csökkent . A harmadik csoport CF antitest titerrel rendelkezett, a chlamydiosis férfiak általi nemi átvitelének szerepe még meg kell vizsgálni. A kosok és a bikák nemi fertőzései azonban a férfiak meddőségét és sterilitását eredményezik, nem pedig a nők abortuszát. Meg kell vizsgálni, hogy a betegség milyen szerepet játszik a nem látható bélfertőzésben, valamint annak hatását a chlamydialis abortusz epidemiológiájában. A kecskebél törzsek molekuláris markereinek közelmúltbeli azonosítása lehetővé tenné az ilyen vizsgálatokat.
diagnózis
a diagnózist általában a baktériumok kimutatásával vagy a placenta benyomásával, legalább tíz szérumminta szerológiai elemzésével kombinálva végzik.
a chlamydia Stamp, Gimenez vagy Machiavello módszerekkel történő festése gyors és a legtöbb laboratóriumban könnyen elvégezhető, de értelmezése gyakran bonyolult, mivel tapasztalt személyre van szükség a Chlamydia megkülönböztetéséhez a Brucellától és a Coxiellától. Az immunfluoreszcencia fluoreszcens izotiocianáttal jelölt immunglobulin konjugátumok alkalmazásával növeli a klamidia kimutatásának érzékenységét és specifitását kenetekben vagy placenta benyomásokban.
a chlamydialis antigének jelenléte a közvetlenül az abortusz után vett földi placentában vagy hüvelyi tamponokban ELISA-val kimutatható humán C. trachomatis fertőzésekre kifejlesztett diagnosztikai készletekkel .
a humán gyógyászatban a polimeráz láncreakciót (PCR) vagy annak variációját, a ligáz láncreakciót (LCR) tekintik a Chlamydia diagnosztizálására rendelkezésre álló legérzékenyebb diagnosztikai módszereknek. Számos primerek közös minden típusú Chlamydia, mint Omp1, a gén kódoló a fő külső membrán fehérje, vagy specifikus C. psittaci vagy C. pecorum vagy a szerotípus-1 C. psittaci törzsek fejlesztettek ki állatorvosi alkalmazás. De ez a technika továbbra is drága.
a komplementkötési teszt (CFT) a legszélesebb körben használt és a szerológiai diagnózis arany standardjának tekinthető. A CFT azonban nem túl érzékeny és nem specifikus, mivel a teszt a C. pecorummal közös i antigént használ, amelyet a legtöbb kecske a bélben hordoz. Ezért az 1:10 és 1:40 közötti titerek pozitív reakciói nem specifikusak az abortuszra, de kapcsolódhatnak a C. pecorum bélfertőzéséhez. A CFT-tesztet lehetőleg 3-6 héttel az abortusz vagy a bárányozás után kell elvégezni, amikor az antitestválasz a maximális szinten van. A CFT teszt nem használható egyéni diagnózisra vagy fertőzés kimutatására fiatalokban vagy férfiakban .
számos kísérlet történt arra, hogy specifikusabb technikákat dolgozzanak ki, amelyek megkülönböztetik a C. psittaci és a C. pecorum fertőzéseket. Ezen vizsgálatok egyike sem volt kellően érzékeny és specifikus. Nemrégiben egy új közvetett enzimhez kapcsolt immunszorbens vizsgálatot (ELISA) fejlesztettek ki egy rekombináns antigén alapján, amely egy 80-90 kDa fehérje egy részét expresszálja . A teszt reagál a szérum antitestekkel, amelyeket Korán kiváltottak ezekkel az erősen immunogén multigén családfehérjékkel szemben . Ez a teszt nagy érzékenységgel és nagy specifitással rendelkezik .
kezelés
a tetraciklinek befolyásolják a chlamydia replikációját, és hatékonyak lehetnek az abortuszok megelőzésében. Az injekció 20 mg/kg oxitetraciklin intramuszkuláris úton 105 és 120 nap a terhesség megakadályozhatja az abortuszt, de nem tudja megakadályozni a chlamydialis vedlés a viccel.
vakcinázás
a megölt vakcinák csökkenthetik az abortusz előfordulását, de nem a chlamydia kiválasztását a viccben. Az abortusz elég erős immunitást vált ki ahhoz , hogy ellenálljon a későbbi kihívásoknak, egy élő vakcinát fejlesztettek ki, amely a C. psittaci törzsek hőmérséklet-érzékeny mutánsával készült . A fogékony kecskéket a párzás előtt vakcinázták, és a későbbi vemhességet nem befolyásolták. A kecskéket megvédték a chlamydialis abortusz ellen,és megakadályozták a chlamydialis vedlést. Mindazonáltal, ha a fertőzött állományban lévő összes kecskét az első évben beoltják, az összes helyettesítő állatot pedig a következő években beoltják, körülbelül 3 évbe telhet, amíg az abortuszok leállnak. Ennek oka a kecskék látens fertőzése, olyan kecskék, amelyek az oltás előtt fertőzöttek voltak, de nem szakították meg. A vakcinázás nem változtatja meg a látens fertőzés lefolyását. Ezek a kecskék megszakíthatják az egészséges vagy fertőzött kölyköt, és a Chlamydiae-t vagy sem. Mindaddig, amíg az állományban látens fertőzéssel rendelkező kecskék vannak, nem tanácsos abbahagyni az oltást (különben az abortusz újrakezdődne), és nem lehet vakcinázott állatokat eladni, kivéve azokat a tenyésztőket, akik rendszeresen vakcinázzák állományukat.
jövőbeli kilátások
egy olyan vakcina kifejlesztése, amely ugyanolyan hatékony, mint az említett élő vakcina, amely védené és lehetővé tenné a fertőzött kecskék szerológiai kimutatását a vakcinázott állományokban, nagyon hasznos lenne a betegség elleni védekezésben. A” diagnózis specifikus antigén ” kiürítése az élő vakcinából jelenleg nem lehetséges, mivel megfelelő genetikai és molekuláris módszerek még nem állnak rendelkezésre, és úgy tűnik, hogy nehéz törölni ezt a fehérjecsaládot. Ezen okok miatt érdekes lenne egy acelluláris vakcina, amely véd az abortusz és a kiválasztás ellen. Korábbi tanulmányok kimutatták, hogy mind a T, mind a B limfociták részt vesznek a védő immunitásban . Egérmodellekben a CD8+ T-sejtek (lyt 2 + egérben) nagy szerepet játszanak a védelemben az alapozott lépsejtek átvitelét követően . Randizni, C. a psittaci T-sejt antigének és epitópok nem ismertek. Bár óvatosan kell eljárni a C. trachomatis eredményeinek C. psittaci-ra történő extrapolálásakor, számos T-sejtes epitópot azonosítottak a C. trachomatis major outer membrane protein (MOMP)
az antitestek szerepe a C. psittaci placentális és magzati fertőzésének megelőzésében egereken kimutatták. A specifikus poliklonális Szérumok passzív átadása jelentős immunitást vált ki, bár alacsonyabb, mint a T-sejt által közvetített védelem . Monoklonális antitestek (MAB), amelyek semlegesítik a C-t. a psittaci fertőzőképesség in vitro figyelemre méltó immunitást biztosít a vemhes egereknek intravénás kihívás után, mivel az abortusz és a magzati kolonizáció megszűnik . A humorális immunitás részt vesz a védelemben. Hatékonysága a megfelelő epitóp elleni specifikus antitestek koncentrációjától függ. Az összes eddig izolált védő MAB reagál a MOMP oligomeren található hőérzékeny konformációs epitópokkal .
ezért a MOMP oligomer potenciális vakcina komponens lehet . Nem kivitelezhető azonban ezt az antigént a chlamydiae-ból történő extrakcióval előállítani, mivel az előállítási költségek jelentősen meghaladnák azt a költséget, amelyet egy gazdálkodó megfizethetőnek tartana egy kecske-vagy juh-vakcina esetében. Ezért a vakcina előállításának alternatív módszereit meg kell vizsgálni.
a rekombináns MOMP oligomer előállítása nehéz lehet. Az Momp-t kódoló gén, az Omp1 jól jellemezhető, de a teljes hosszúságú gén magas szintű expressziója egy szabályozatlan promoterből mérgező az E. coli-ra. Ezért különböző kísérleti stratégiákat alkalmaztak a védő epitópok előállítására. Megpróbáltuk utánozni a védő epitópokat monoklonális anti-idiotípusos antitestekkel, vagy konformációsan korlátozott peptid mimotóppal, de egyikük sem volt hatékony. Úgy döntöttünk, hogy az egerek DNS-vakcinával történő vakcinázását úgy értékeljük, mint a MOMP gén által védett egerek C. trachomatis és pulykák C. psittaci elleni vakcinázását . Eddig csak részleges védelmet kaptak, de további kutatások (a célgénre, a DNS koncentrációjára, az oltás módjára stb.) szükséges annak megismeréséhez, hogy az egereket ugyanolyan hatékonyan lehet-e védeni DNS-vakcinával, mint az élő vakcinával.