¿Qué Es el ADN Circular Extracromosómico y Qué Hace?

Se sabe que el ADN en el núcleo celular está empaquetado en forma de cromosomas lineales. Durante muchos años, los investigadores han observado longitudes más pequeñas de ADN junto a los cromosomas que están organizados en formas circulares. Algunas de estas partículas, que se han denominado ADN circular extracromosómico (eccDNAs) o microDNAs, son típicamente pequeñas (<1 kb), escasas de genes y no amplificadas. La abundancia total de ECDNA en las células puede ser de hasta unos pocos cientos por célula. Las moléculas de ECDNA también están presentes en la circulación en forma libre de células y ofrecen la posibilidad de servir como biomarcadores a base de sangre. En los tumores, se puede detectar otro tipo de ADN circular extracromosómico, que parece ser exclusivo de las células cancerosas. Anteriormente conocidas como minutos dobles, pero ahora conocidas como ADN extracromosómico (adNEC) debido a que generalmente no son dobletes, estas partículas de adNEC son a menudo muy grandes (tamaño medio 1.3 Mb), altamente amplificado con muchas copias por célula, y contiene muchos genes y regiones reguladoras, con un marcado enriquecimiento para oncogenes. Es importante destacar que, en las células cancerosas, los ecDNAs parecen ser más activos transcripcionalmente que sus contrapartes cromosómicas y se sospecha que confieren ventajas de crecimiento y supervivencia a las células cancerosas. En la actualidad, no se entiende la relación entre el ECDNA en las células normales y el ecDNA en el cáncer, si lo hay. Al ser una forma tan enigmática de material genético, planteamos preguntas sobre ecdNASy ecdnasaun panel de expertos en el campo que han estudiado facetas de ecdNASy ecdnasque van desde sus propiedades biofísicas, mecanismos de producción, roles fisiológicos, roles en la biología del cáncer y potencial diagnóstico.

¿Qué hacen los ECDNAS? ¿Cuál ha sido la mayor sorpresa para ti sobre ECDNA hasta ahora?

Anton Hensson: El adNEC es un vehículo para amplificaciones de protooncógenos en cáncer. Esto se sabe desde hace algún tiempo. Lo sorprendente es la frecuencia del adNEC en el cáncer y la capacidad del adNEC para formar estructuras muy complejas, incluidas partes de diferentes cromosomas, así como su capacidad para volver a insertarse en el genoma.

Paul Mischel: Centraré mis comentarios en mi área de investigación, el adNCE en el cáncer. La mayor sorpresa, para mí, es el papel fundamental que desempeña el adNEC en el cáncer humano. Nuestros datos sugieren que el adNEC desempeña un papel fundamental en la conducción del comportamiento agresivo de algunas de las formas más malignas de cáncer a través de al menos tres mecanismos entrelazados: 1) debido a que los ecDNAs carecen de centrómeros, están sujetos a una herencia no mendeliana (es decir, no cromosómica), lo que permite a los tumores alcanzar un número de copias de oncógenos muy alto mientras mantienen la heterogeneidad genética intratumoral; 2) la heterogeneidad genética intratumoral generada por este mecanismo de herencia permite que los tumores evolucionen rápidamente en respuesta a condiciones cambiantes, incluidos tratamientos, lo que explica la notable capacidad de algunos cánceres para cambiar sus genomas a tasas que no pueden explicarse por la herencia cromosómica; 3) el alto nivel de plantilla de ADN alcanzado por la herencia y selección no mendeliana, junto con la organización alterada de la cromatina generada por la arquitectura circular que demostramos (identificada en el trabajo realizado en estrecha colaboración con el Dr. Howard Chang), resulta en la transcripción masiva de oncogenes. En conjunto, estas características comienzan a explicar por qué algunos cánceres parecen explotar y cambiar genómicamente, por qué no se someten a barridos selectivos puros y por qué cualquier célula del tumor parece ser capaz de recapitular todo el tumor, con todo su espectro de heterogeneidad, en algunos tipos de cáncer. También proporciona una idea de por qué las terapias dirigidas contra oncogenes amplificados en el adNEC no han tenido el éxito esperado.

Anindya Dutta: Se sabe que los ECDNAS largos visibles en cánceres mediante cariotipado, también llamados minutos dobles o ecDNAs, llevan oncogenes amplificados para promover cánceres. Resultados recientes sugieren que hay una gran población de ECDNAS más pequeños, < 1000 pb de largo que constituyen el 90% del ECDNA en células normales y líneas celulares cancerosas. Las células cancerosas también contienen ADNEC más largos, no siempre visibles mediante cariotipado, cuyo tamaño varía de 1 kb a dos minutos. Los círculos que son lo suficientemente largos como para contener genes completos pueden sobreexpresar los genes y amplificarlos. Esto es muy importante para los cánceres que contienen los ADNEC largos. La función de los círculos pequeños no está clara, pero hemos demostrado que pueden expresar ARN de una manera desregulada, y que los ARN se procesan en microARN y pequeños ARN interferentes para reprimir genes celulares.

Para mí, la mayor sorpresa sigue siendo nuestro descubrimiento original de cuán ubicuos son los ECDNAS, incluso en tejidos normales y el hecho de que la mayoría de ellos son mosaicos somáticos (diferentes entre diferentes células) incluso en cánceres. Es solo cuando dan una ventaja selectiva a las células, como lo hacen los eccDNAs portadores de oncogenes en los cánceres, que se observa el mismo eccDNA en muchas células de un cáncer.

Birgitte Regenberg: Para encontrar que: 1) El eccDNA es un elemento genético común en las células eucariotas, 2) El eccDNA puede surgir de todas las partes de los genomas eucariotas, 3) la selección puede conducir a la coamplificación de potenciadores y oncogenes en el eccDNA complejo en tumores, 4) ciertos loci parecen formar eccDNA de forma recurrente y a alta velocidad en levaduras (CUP1 y HXT6 HXT7). Este último resultado es realmente interesante, ya que sugiere que el ADNccc puede desempeñar un papel importante en la evolución al proporcionar una rápida adaptación a los cambios en el entorno (alta taza, CUP1, y baja glucosa, HXT6 HXT7).

Dennis Lo: Mi grupo se interesó por el ADNCC cuando empezamos a buscar moléculas de ADN circulares en el plasma humano. Nuestro viaje comenzó con la investigación del ADN mitocondrial (ADNmt), que existe dentro de una mitocondria como una pieza circular de molécula de ADN de aproximadamente 16 kb. Nuestros resultados demostraron que en el plasma humano existen moléculas de ADNmt circulares y lineales. Una sorpresa de este trabajo es nuestra demostración de que las moléculas de ADNmt circular y las moléculas de ADNmt lineal tienen diferentes tejidos de origen. Por lo tanto, las moléculas circulares de ADNmt provienen predominantemente del sistema hematopoyético, mientras que las moléculas lineales de ADNmt provienen predominantemente del hígado.

Desde entonces, hemos ampliado nuestro trabajo para buscar ECDNA en plasma. En particular, hemos demostrado que las moléculas de ECDNA fetal son detectables en el plasma de las mujeres embarazadas. Nuestro grupo ha estado interesado durante muchos años en la distribución de tamaño del ADN circulante. Es interesante observar que las moléculas de ADNCC en el plasma materno (con picos de tamaño prominentes a 202 pb y 338 pb) tienen una distribución de tamaño más larga que las moléculas de ADN lineales (tamaño modal a 166 pb). Nuestro trabajo previo sobre moléculas lineales de ADN en plasma demostró que las moléculas lineales de ADN fetal en plasma materno tienen una distribución de tamaño ligeramente más corta que las moléculas lineales de ADN de origen materno. Otra sorpresa de nuestro trabajo es que hemos observado una escasez similar de moléculas circulantes de ECDNA fetal en comparación con las de origen materno.

¿Cuál es su hipótesis preferida con respecto al mecanismo de producción de eccDNAs dentro de las células? ¿Qué evidencia hay para apoyar esta hipótesis?

Anindya Dutta: Creo que los ECDNAS se producen como subproducto de la reparación del ADN. La principal evidencia de esto es que son aumentados por agentes que aumentan el daño al ADN, y hemos reportado que ciertos genes de reparación de ADN como MSH3 (involucrados en la reparación de desajustes) son necesarios para producir ECDNAS.

Birgitte Regenberg: Estoy a favor de un modelo en el que cualquier forma de daño al ADN pueda conducir potencialmente a la circularización del ADN a través de los mecanismos conocidos de reparación del ADN. Esto implica su formación a través de la recombinación homóloga, la microhomología y la unión del extremo no homólogo con otras vías de reparación del ADN. La mayor parte de nuestra evidencia se basa en la homología alrededor del punto de ruptura cromosómico que condujo al ECDNA, y creo que los estudios de mutantes aún son necesarios para establecer la causalidad. La re-replicación también podría producir ADN circular, como se explica en el modelo de Amplificación de Repetición Invertida Dependiente del Origen (de Maitreya Dunham), pero aún necesitamos explorar la importancia de este mecanismo. Además de los procesos aleatorios, algunos círculos se forman a través de la recombinación dirigida (los círculos de escisión del receptor de células T) y la retrotransposición cuando el ECDNA repetido terminal largo surge de la circularización del ADN lineal extracromosómico durante el ciclo de vida transposicional de los retrotransposones.

Anton Henssen: Basándome en la literatura publicada y en nuestras propias observaciones, creo que puede haber muchos mecanismos diferentes que contribuyan a la generación de ECDNA. El ECDNA se puede crear a través de procesos catastróficos de reordenamiento del genoma, como la cromotripsis, pero también hay otros procesos de inestabilidad genómica que pueden contribuir a su formación.

Paul Mischel: De nuevo, centraré mis respuestas en el adNEC en el cáncer. Existe una visión histórica de la formación de adNEC, o en ese momento llamada formación de doble minuto, en la que sucede algo que resulta en la eliminación de un tramo de ADN de su ubicación cromosómica nativa, seguido de replicación y amplificación como adNEC. Investigadores como Robert Schimke, Geoff Wahl, Nicholas Vogt y Bernard Malfoy, entre otros, contribuyeron a este conocimiento. Los mecanismos moleculares precisos, su relación con posibles anomalías en el daño del ADN y el sistema de respuesta, permanecen incompletos. Es un área de investigación activa, incluso en nuestro laboratorio. Además, David Pellman y otros habían sugerido que la cromotripsis, que ocurre cuando un cromosoma atrasado se «atasca», se coloca en un micronúcleo y se corta efectivamente, podría formar un adNEC. Un trabajo experimental reciente de Peter Ly y Don Cleveland, en el que diseñaron un cromosoma Y cromotríptico, sugiere que la cromotripsis puede dar lugar a la formación de adNEC como mecanismo de amplificación génica. Por lo tanto, es muy posible que múltiples mecanismos puedan conducir a la formación de adNEC, que luego se actúa mediante selección. Será importante desarrollar una comprensión mecanicista más profunda de los procesos que contribuyen a la formación del adNCE.

Dennis Lo: En nuestro trabajo de análisis de distribución de tamaños que involucra moléculas de ECDNA en el plasma materno, hemos observado una serie de pruebas reveladoras de firmas nucleosómicas. Por ejemplo, hemos observado una periodicidad de 10 pb en la distribución del tamaño en las proximidades de los picos de tamaño prominentes de 202 pb y 338 pb. Nuestra conjetura es que el tamaño de 202 pb es aproximadamente el de un núcleo de nucleosoma más dos enlazadores, mientras que el tamaño de 338 pb es aproximadamente el de dos núcleos de nucleosoma más dos enlazadores. Otra observación notable es que, entre las moléculas de ADNCC más frecuentemente observadas en el plasma materno, hemos observado cuatro conjuntos de motivos de trinucleótidos en el sitio de unión de una molécula de ADNccc. En tal sitio, el primero y el tercero motivos son repeticiones directas, mientras que el segundo y el cuarto son otro conjunto de repeticiones directas. Esperamos que estas observaciones contribuyan a una mejor comprensión del mecanismo de producción de la ECDNA. Entendemos perfectamente que no tenemos toda la información para construir un modelo completo, pero creemos que el campo en su conjunto está avanzando hacia ese objetivo.

¿Qué se sabe sobre los eccDNAs y el cáncer? ¿De qué manera contribuyen los ECDNAS a las propiedades malignas de las células cancerosas?

Paul Mischel: Hemos aprendido lo siguiente: 1) Los ecDNAs parecen ser exclusivos del cáncer, o al menos, aún no lo hemos visto en las células normales, 2) los ecDNAs impulsan un alto número de copias de oncogenes y mantienen la heterogeneidad genética intratumoral a través de su mecanismo de herencia no mendeliana y no cromosómica; 3) los ecDNAs, debido a este mecanismo de herencia, pueden cambiar sus genomas rápidamente, incluso para evadir terapias; 4) el alto nivel de plantilla de ADN del ecDNA, junto con la arquitectura alterada de la cromatina, impulsa la transcripción masiva de oncogenes y puede remodelar epigenoma en formas que contribuyen a la tumorogénesis.

Anton Henssen: El adNEC no solo es un vehículo para la amplificación de oncogenes, sino que también puede contribuir a la remodelación del genoma a través de su reintegración en el genoma lineal. Hemos demostrado que la reintegración circular del ADN conduce a la interrupción de regiones genómicas funcionalmente importantes y que esta interrupción podría contribuir a muchas características malignas de las células cancerosas.

Birgitte Regenberg: Sabemos que la amplificación de varios oncogenes en el ADNCC se correlaciona con el cáncer, y los pacientes con cáncer con ciertas amplificaciones de ADNccc tienen un pronóstico precario. Es probable que la sobreexpresión de oncogenes como MYC y EGFR en ECDNA reprograme las células e induzca el estado tumorígeno.

Anindya Dutta: Los círculos en los cánceres son más largos que en las células normales, y se ha sugerido que reciben un nombre diferente: ecDNAs. Ahora sabemos que están presentes en casi todos los cánceres, pero no son lo suficientemente grandes como para ser detectables en minutos dobles por citogenética. Los ecDNAs largos llevan genes completos, y cuando estos genes son oncogenes o genes que impulsan el cáncer, los ecDNAs permiten su sobreexpresión y amplificación. Por ejemplo, los ecDNAs llevan los siguientes oncogenes: el oncogén MDM2 (descubierto originalmente en un minuto doble) inactiva el supresor tumoral p53, mientras que el oncogén EGFR hace que las células de glioma y glioblastoma sean hiperrespuestas al EGF. Debido a que los ecDNAs no se segregan por igual entre las células hijas, la distribución aleatoria de los círculos entre las células hijas hace que sea más fácil para algunas de las hijas obtener más copias de los círculos y, por lo tanto, obtener una ventaja de crecimiento al expresar más de un oncogén codificado. Por lo tanto, la herencia no mendeliana de los círculos del ADN hace que sea más fácil para la célula cancerosa amplificar los círculos que le dan al cáncer una ventaja de crecimiento.

¿Cree que los ECDNAS podrían servir como biomarcadores para la evaluación de enfermedades, de qué maneras y cómo?

Dennis Lo: Creo que las moléculas de ECDNA en plasma serían una dirección interesante para la investigación de biomarcadores. Un desafío es que su concentración total parece ser sustancialmente menor que la de las moléculas de ADN lineales en el plasma. La distribución de gran tamaño de las moléculas de ECDNA en el plasma tiene una ventaja de que las moléculas más largas podrían llevar más información genética y epigenética del tejido de origen.

Anindya Dutta: Ya hemos demostrado que los ECDNAS son 1) liberados en la sangre por tumores y por el feto y 2) se pueden detectar y cuantificar en el conjunto de ADN circulante libre de células. Porque son más largos (media: 250 bases) que el ADN de circulación libre de células lineales (media: 150 bases) y ECDNAS libres de células circulantes más estables podrían ser útiles para detectar mutaciones en oncogenes (en cánceres) o para detectar mutaciones en genes importantes para el desarrollo (para pruebas prenatales no invasivas). El tamaño más largo de los círculos que se observan en los cánceres en relación con el tejido normal también puede ser útil como herramienta de detección en la biopsia líquida de cánceres.

Birgitte Regenberg: Sí, creo que el ECDNA puede servir potencialmente como biomarcador para una serie de enfermedades que están vinculadas a mutaciones y reordenamientos genómicos. El ECDNA del gen receptor de células T ya se utiliza para la detección de la Enfermedad de Inmunodeficiencia Combinada Grave y datos recientes han demostrado que el ECDNA de un feto se puede detectar en el plasma de la madre. Parece probable que otros ECDNA en el plasma puedan servir como marcadores para el monitoreo de cánceres, aunque es probable que la concentración de ECDNA en el plasma sea limitante.

Anton Henssen: En oncología pediátrica, el adNEC en forma de cromosomas de doble minuto que contienen MYCN ya es un biomarcador establecido para la evaluación clínica del riesgo en pacientes que sufren de neuroblastoma. Creo que de manera similar, otros ecDNAs podrían servir como biomarcadores para diversas propiedades de la enfermedad en muchas entidades tumorales.

Paul Mischel: Sí, hay datos considerables que sugieren que el adNEC puede ser un biomarcador de tipos de cáncer más agresivos y puede proporcionar nueva información sobre la capacidad de algunos cánceres para evolucionar tan rápidamente, incluso en respuesta a terapias. También hay razones convincentes para pensar que los pacientes cuyos cánceres son impulsados por el adNEC pueden necesitar ser tratados de una manera diferente.

¿Cuál es su enfoque favorito para analizar ECDNA y cuáles son las ventajas?

Birgitte Regenberg: La mayoría de los ECDNA existen en números bajos de copias y no son capturados por la secuenciación del genoma completo. Para medir el CADNC de copia alta y baja, mi laboratorio ha desarrollado métodos para aislar, secuenciar y ensamblar el CADNC (Circle-Seq y Circle-Map, en colaboración con L. Maretty, D. Botstein y M. Mohiyuddin). Estos métodos nos permiten perfilar ECDNA a través de genomas en cualquier célula y condición dada. De este modo, podemos obtener información sobre cómo el eccDNA se correlaciona con la edad y la enfermedad (colaboraciones con J. S. Johansen e Y. Lou), y en el nivel básico entender cómo se forman, evolucionan y perecen en una población de células.

Anindya Dutta: Mi laboratorio ha utilizado principalmente la amplificación de círculos rodantes de círculos resistentes a las exonucleasas con hexámeros aleatorios seguidos de secuenciación de extremos emparejados (Buscador de círculos) para identificar las uniones que son características de los círculos. Dado que la mayoría de los experimentos de genómica no incluyen la amplificación de círculos rodantes, no podemos volver a analizar los datos genómicos generados por otros grupos para identificar círculos. Sin embargo, recientemente hemos demostrado que el ensayo de Cromatina accesible a la transposasa mediante secuenciación (más barata) o secuenciación de genoma completo (mucho más costosa) puede detectar círculos de ADN. Esperamos que estas técnicas más utilizadas permitan la identificación de círculos en conjuntos de datos ya existentes. Además, un artículo reciente de Dennis Lo y compañeros de trabajo muestra que los círculos se pueden detectar por digestión con enzimas de restricción de corte comunes y secuenciando los fragmentos para las uniones.

Dennis Lo: Primero trataríamos el ADN plasmático con una exonucleasa que eliminaría gran parte de las moléculas de ADN lineales de la muestra. Luego, abríamos los círculos, usando enzimas de restricción o una transposasa, para formar moléculas de ADN lineales para un análisis posterior (por ejemplo, secuenciación de ADN). Creemos que el método basado en la transposasa tiene la ventaja de que, a diferencia del enfoque basado en enzimas de restricción que requiere la existencia de un sitio de reconocimiento de enzimas de restricción dentro de la molécula de ADNCC, el método de la transposasa puede actuar potencialmente sobre cualquier molécula de ADNccc.

Paul Mischel: Mi colega Vineet Bafna ha desarrollado un poderoso kit de herramientas, que incluye Amplicon Architect y Amplicon Reconstructor para analizar la estructura del adNEC. De hecho, se está llevando a cabo un trabajo en curso con el Dr. Bafna y el Dr. Verhaak para analizar mejor el adNEC en bases de datos de secuenciación de genoma completo disponibles públicamente. Además, trabajando en estrecha colaboración con sus colegas, los doctores Howard Chang y Bing Ren, estamos utilizando aspectos del kit de herramientas «epigenéticas» para caracterizar el adNEC en el cáncer.

Anton Henssen: Nos gusta aislar y secuenciar específicamente el ADNc con secuenciación de larga lectura, que ofrece la oportunidad de mapear con precisión la estructura del ADNc.

¿Cuáles son las preguntas de investigación relacionadas con el ADNccc que más desea explorar?

Paul Mischel: Estamos muy interesados en comprender una serie de cuestiones críticas relacionadas con el adNEC, que no se enumeran en orden de importancia. Primero, ¿cómo se forma el ecDNA y cuáles son los «actores» moleculares clave involucrados en su formación? En segundo lugar, ¿cuáles son los mecanismos moleculares implicados en el mantenimiento y la función del adNEC? ¿Se utilizan diferentes componentes? ¿Se usan los mismos componentes de manera diferente? En tercer lugar, ¿cuáles son las implicaciones clínicas para los pacientes? ¿Se puede usar el adNEC para decirnos algo importante sobre el curso clínico? En cuarto lugar, ¿podemos encontrar puntos de intervención que se puedan utilizar para desarrollar nuevos tratamientos que ayuden a los pacientes cuyos cánceres son impulsados por el adNEC?

Anton Henssen: Como médico científico, estoy muy ansioso por explorar las posibilidades de usar nuestra comprensión sobre el adNEC para encontrar nuevos enfoques diagnósticos y terapéuticos para pacientes que sufren de cánceres impulsados por el adNEC.

Dennis Lo: Me gustaría explorar la capacidad del ADNCC en el plasma materno para detectar o monitorear trastornos asociados al embarazo (por ejemplo, preeclampsia). También estoy interesado en desarrollar enfoques más nuevos y potencialmente más completos para el análisis del adnECC. Soy consciente de que las metodologías actualmente disponibles podrían tener cierto sesgo en subconjuntos seleccionados de moléculas de CADNC circulantes.

Anindya Dutta: Quiero encontrar las funciones de los ECDNAS presentes en las células normales. Debido a que son tan omnipresentes y somáticamente mosaicos, será muy emocionante si contribuyen a la heterogeneidad intercelular en tejidos normales o contribuyen a alguna forma de patología. También quiero delinear qué vías están involucradas en la formación de los círculos en las células normales y cancerosas, con la esperanza de que interferir con estas vías en los cánceres nos permita ayudar a eliminar los cánceres de potenciales loci de amplificación génica y, por lo tanto, ayudar en la terapia. Finalmente, quiero ver la adopción de la secuenciación de ECDNA en las biopsias líquidas de cánceres y en las pruebas prenatales no invasivas de enfermedades genéticas en el feto.

Birgitte Regenberg: Además de comprender cómo el eccDNA puede contribuir a la variación genética y la evolución de los genomas eucarióticos, estoy ansioso por entender cómo se forma y mantiene el eccDNA en un genoma. Es probable que cuatro factores determinen el recambio de un ADN circular en un linaje celular: la velocidad por la que se forma a partir de su locus cromosómico, su capacidad de replicarse, su modo de segregación, así como la ventaja o desventaja de crecimiento que proporciona a su célula anfitriona. Además, las células eucariotas pueden tener mecanismos para degradar o secretar ECDNA. Esto es particularmente importante para las células meióticas en organismos multicelulares, ya que el ECDNA en la línea germinal podría tener grandes efectos negativos en la próxima generación. Datos recientes de levaduras sugieren que las células meióticas han desarrollado mecanismos para secuestrar un subconjunto de ECDNA (del laboratorio de Erval en Berkley), y parece probable que lo mismo sea cierto para las células de la línea germinal en organismos multicelulares como los humanos.

Contribuciones de los autores

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Divulgaciones de autores o Posibles Conflictos de Interés

Al enviar el manuscrito, todos los autores completaron el formulario de divulgación de autores. Divulgaciones y / o posibles conflictos de intereses:

Empleo o Liderazgo

R. W. K. Chiu, Química Clínica, AACC; Y. M. D. Lo, Química Clínica, AACC, DRA Limited, Take2 Holdings.

Consultor o Asesor

R. W. K. Chiu, Grail; Y. M. D. Lo, Grail, Decheng Capital; P. Mischel, Boundless Bio, Inc.

Propiedad de acciones

R. W. K. Chiu, Grail, DRA Limited, Take2 Holdings; Y. M. D. Lo, Grail, DRA Limited, Take2 Holdings; P. Mischel, Boundless Bio, Inc.

Honorarios

Ninguno declarado.

Financiación de la investigación

R. W. K. Chiu, Grail; A. Dutta, Institutos Nacionales de la Salud; Y. M. D. Lo, Grail, Hong Kong Research Grants Council Esquema de Investigación temático T12-403/15N y T12-401/16W.

Testimonio de expertos

Ninguno declarado.

Patentes

R. W. K. Chiu, PCT/CN2020 / 081066; A. Dutta, USA PPA 62832443; Y. M. D. Lo, Patentes múltiples y solicitudes de patente en aplicaciones de diagnóstico de ADN libre de células; P. Mischel, SD-2019-149-1, SD-2019-149-2, SD-2019-149-3.

Otra remuneración

A. Dutta, Conferencia de Investigación Gordon, Cold Spring Harbor Lab, Academia de Bosnia y Herzegovina, Facultad de Medicina de Shenzhen.

No abreviaturas estándar

• eccDNA

  ADN circular extracromosómico

• ecDNA

  ADN extracromosómico

• el adnmt

  ADN mitocondrial