En el estudio de la acción de sustancias no antisépticas sobre la tasa de cicatrización, el principal obstáculo encontrado es la facilidad con la que las heridas se reinfectan bajo un apósito aséptico. Al comienzo del experimento 1, la herida era estéril. Fue sometido a lavado con agua destilada durante 2 horas, luego a lavado con solución de cloruro de sodio al 30% durante otras 2 horas. Durante ese tiempo no se tomó ninguna precaución especial para esterilizar la herida y el apósito se dejó intacto hasta la mañana siguiente. Luego se encontró que la herida contenía de 30 a 50 bacterias por campo. Al día siguiente, después de que la herida hubiera sido sometida al mismo tratamiento, el número de bacterias había aumentado a 50 y 100 por campo, y como consecuencia inmediata la superficie de la herida aumentó de 12 a 12,6 cuadrados. cm. en 2 días. La herida fue vendada antisépticamente y se encontró estéril 3 días después. La reinfección se realizó de nuevo al día siguiente a pesar del apósito antiséptico con pasta de cloramina 4 partes por 1.000, que se aplicó durante 20 horas. En el experimento 2 se observaron resultados similares. Después de 2 días de lavado con agua destilada, el número de bacterias había aumentado a 50 por campo. La herida fue esterilizada, pero se produjo una nueva reinfección unos días después. Otra herida en el mismo paciente se reinfectó en las mismas condiciones después de 1 día de vendaje estéril. En ninguno de los pacientes se pudieron mantener las heridas en una condición estéril durante todo el experimento. Era imposible mantener la esterilidad de una herida bajo apósito aséptico. Por lo tanto, la solución de Dakin se inyectaba cada 4 horas, o con menos frecuencia, según el grado de infección, o se aplicaba pasta de cloramina durante la noche. Si había 3 o 4 bacterias por campo, el experimento se suspendía para que la herida pudiera ser esterilizada de nuevo. Las curvas de cicatrización y bacteriológicas del Experimento 4 muestran que, mediante la aplicación de pasta de cloramina, una herida puede mantenerse en condiciones bacteriológicas adecuadas para llevar a cabo un experimento. Sin embargo, a pesar de las precauciones antisépticas tomadas, fue necesario interrumpir este experimento en dos ocasiones, del 13 al 15 de diciembre y del 18 al 22 de diciembre, para que se pudiera efectuar una esterilización completa de la herida. Cuando se realizó la esterilización tan pronto como se descubrió la bacteria, se produjo poco retraso en el proceso de cicatrización. Además, la reinfección de la piel a menudo se debió a bacilos finos que tienen una acción retardadora leve en la tasa de curación. El uso de al menos seis lavados en 2 horas con solución de Dakin o de apósito de 12 horas con pasta de cloramina 10 partes por 1000, fue necesario para mantener la herida en condiciones de asepsia quirúrgica. La acción del agua destilada se estudió en los experimentos 1, 2 y 3. En el experimento 1, la herida se lavó con agua destilada primero durante 2 horas, luego 4 horas y luego durante 8 horas al día. La herida se mantuvo en una condición de infección leve. Durante el período en que se aplicó el tratamiento no se observó ninguna modificación importante, ni aceleración ni retraso, en la tasa de reparación. Del 21 al 25 de noviembre la herida estuvo casi limpia y la curva observada permaneció paralela a la curva calculada, mostrando que el agua destilada no retrasó la tasa de curación. En el experimento 2, la herida fue sometida a un lavado ininterrumpido con agua destilada, primero durante 2 y 8 horas, luego durante 24 horas. Se continuó del 24 al 30 de noviembre, a saber:, durante 112 horas de cada 120, sin que se produzca ninguna modificación marcada del curso de curación. La curva bacteriológica mostró que del 22 al 27 de noviembre inclusive la herida se mantuvo aséptica. El ligero retraso que se produjo después probablemente fue provocado por la infección. En el experimento 3, la herida se lavó con agua destilada, primero durante 2, luego durante 4, 6 y 8 horas, un total de 20 horas en 4 días. Del 21 al 24 de noviembre la herida permaneció aséptica quirúrgicamente. No se produjo ninguna modificación en la tasa de curación. La acción de la solución hipertónica de cloruro de sodio se estudió de manera similar. En el experimento 4, la herida se lavó al principio con solución de cloruro sódico al 40%, del 4 al 9 de diciembre durante 12 horas al día, y del 10 al 13 de diciembre durante 24 horas al día, lo que hace un total de 144 horas de 240 horas. Al final de este tiempo, el área de superficie de la herida coincidió exactamente con el área calculada. Debido a la reinfección, el experimento se suspendió. Del 24 al 29 de diciembre, la herida se mantuvo en contacto con una solución de cloruro de sodio al 50% durante 54 horas, y después del 30 de diciembre se recurrió al lavado con una solución al 80% durante 24 horas al día. El tiempo total de los tratamientos mencionados fue de 174 horas con solución al 40%, 72 horas con solución al 50% y 120 horas con solución al 80%. El 1 de enero, la superficie medía 11 metros cuadrados. cm. y la superficie calculada era de 11,3 metros cuadrados. cm. El 5 de enero. la superficie observada fue de 10 metros cuadrados. cm. y la superficie calculada era de 9 metros cuadrados. cm. Cabe señalar que el 5 de enero las bacterias eran 4 por campo, lo que podría explicar la diferencia. En el experimento 5, la herida se lavó durante 24 horas todos los días con solución de cloruro sódico al 50% del 11 al 18 de diciembre, un total de 192 horas. Del 18 al 24 de diciembre, la herida se cubrió con tortas de agar-agar que contenían 40% de cloruro de sodio. La concentración se elevó al 50% del 24 al 27 de diciembre. La curva de cicatrización indica solo un ligero retraso de la reparación que puede atribuirse a la infección cuando se comparan las curvas de cicatrización e infección. La aceleración temporal del día 13 puede deberse a la influencia del vendaje, pero como no volvió a ocurrir un error experimental es probablemente la causa del cambio observado en la curva. En el experimento 6, en el muslo derecho del Paciente 721 se localizaron dos heridas prácticamente idénticas a una distancia de unos pocos centímetros una de la otra. Las áreas de las heridas eran, respectivamente, de 40 y 33 metros cuadrados. cm. Una de las heridas fue limpiada con agua destilada solamente. El otro fue sometido a la acción de una solución de cloruro sódico al 40%. Del 20 al 25 de diciembre, ambas heridas se encontraban en estado de asepsia quirúrgica. Sin embargo, las curvas de cicatrización muestran que, a pesar de la diferencia de tratamiento, la tasa de curación no se modificó. Por lo tanto, la tasa de curación de las heridas aparentemente no sufrió ninguna modificación mensurable bajo la influencia del agua destilada o la solución salina hipertónica. Es bien sabido que los cambios osmóticos del medio tienen una marcada influencia en los tejidos privados de circulación. Pero parece que un tejido con circulación normal está protegido por él contra los cambios de la presión osmótica que ocurren en su superficie. Los experimentos anteriores muestran que aparentemente las condiciones de los tejidos de una herida no se modifican por los cambios de la presión osmótica del apósito. Los efectos beneficiosos de la solución hipertónica de cloruro de sodio en la esterilización de heridas y en la tasa de curación descritos recientemente por varios cirujanos son posiblemente una ilusión debido a la falta de una técnica precisa.