La Ceriodaphnia dubia se cultivó en cuatro formulaciones de agua reconstituida con concentraciones de dureza y alcalinidad que oscilaban entre el agua blanda y moderadamente dura que requieren los métodos de ensayo de toxicidad de efluentes enteros (HÚMEDA) para los organismos de ensayo de cultivo. Los efectos de estas formulaciones de cultivo solas y en combinación con dos niveles de Cl-, SO4(2 -) y HCO3 – en la reproducción de C. dubia se evaluaron con la prueba estándar de tres crías. La reproducción se redujo significativamente cuando las aguas de ensayo tenían una dureza menor que las aguas de cultivo. Sin embargo, la reproducción no fue significativamente diferente cuando los animales cultivados en aguas de baja dureza se expusieron a aguas moderadamente duras. La dureza del agua de cultivo no afectó significativamente la sensibilidad de C. dubia a los tres aniones. Por el contrario, el aumento de la dureza en las aguas de ensayo redujo significativamente las toxicidades del Cl y el SO4(2), y la toxicidad por HCO3 siguió el mismo patrón. La alcalinidad no mostró un efecto consistente sobre la toxicidad por Cl y SO4 (2). El estrés fisiológico de colocar animales cultivados en aguas moderadamente duras en aguas de ensayo más blandas podría contribuir a fallos marginales de efluentes que de otro modo no serían tóxicos. El protocolo húmedo estándar debe revisarse para permitir el cultivo de C. dubia en condiciones de menor dureza para representar mejor las químicas locales de las aguas superficiales.