Conversión de colesterol a pregnenolona está mediada por la enzima de escisión de cadena lateral de colesterol (SCC), P450scc. La actividad deficiente del CCE causa hiperplasia suprarrenal lipoide congénita (también conocida como deficiencia de 20,22 desmolasa), un defecto potencialmente letal en la síntesis de todas las hormonas esteroides. Para investigar posibles defectos genéticos que causan esta enfermedad, sintetizamos cuatro oligodeoxirribonucleótidos que contenían de 63 a 72 bases correspondientes a porciones de la secuencia de ADN complementario bovino (ADNc) para P450scc. Los oligonucleótidos bovinos fueron etiquetados y usados directamente para sondear manchas sureñas de ADN genómico humano normal, revelando un patrón que indica que hay un solo gen P450scc en el genoma humano. La hibridación con manchas septentrionales de ARN mensajero suprarrenal humano y bovino normal indica que el ARN mensajero P450scc tiene aproximadamente 2,0 kilobases de largo en ambas especies. Las hibridaciones de los oligonucleótidos al ADN genómico de tres pacientes no emparentados con deficiencia de CCE no detectaron una deleción en el gen humano P450scc. Los oligonucleótidos de secuencia bovina se utilizaron para aislar un clon de ADNc P450scc humano. El fragmento aislado de ADNc P450scc contiene 818 bases que codifican 239 aminoácidos de la proteína, la señal de terminación de traducción y 98 bases de la región no traducida de 3′. La secuencia de esta mitad carboxi-terminal de la proteína P450scc humana es 72% homóloga con la secuencia bovina y contiene un aminoácido adicional que no se encuentra en la proteína P450scc bovina; las secuencias de nucleótidos humanos y bovinos son 81% homólogas. La repetición de los estudios de borrado de ADN genómico con la sonda ADNc dio los mismos resultados obtenidos con las sondas de oligonucleótidos de secuencia bovina, confirmando que la deficiencia de CCE no se debe a una deleción en las regiones de hibridación del CCE P450 con las sondas. Por lo tanto, los oligonucleótidos de secuencias heterólogas de síntesis química larga que contienen números desconocidos de desajustes de bases con secuencias humanas pueden utilizarse para estudiar genes humanos, de modo que el acceso a un ADNc no sea necesario para tales estudios.