El mecanismo del movimiento ciliar.- VI. Análisis fotográfico y estroboscópico del movimiento ciliar

Cuando se observa bajo una potencia adecuada del microscopio, un cilio en movimiento normal rara vez, si es que alguna vez, produce la impresión de una imagen bien definida para el ojo humano. La imagen borrosa, que se observa, se debe a la idiosincrasia del ojo en lugar del tamaño o la velocidad de movimiento del cilio. Como se explicó en otra parte (Gray, 1928), la punta de un cilio activo rara vez se mueve más de 3 pulgadas por minuto, pero está invirtiendo la dirección de su movimiento aproximadamente 30 veces por segundo. Para que el ojo registre una imagen clara de un objeto en movimiento, es esencial que el eje del ojo se mueva simultáneamente en la dirección del movimiento, ya que al hacerlo, la imagen del objeto se enfoca en la misma región de la retina durante un período de tiempo requerido. Dado que los cilios normales invierten su dirección de movimiento a una frecuencia muy superior a la que es posible para el eje del ojo humano, un cilio en movimiento registra, en la retina, una serie de imágenes muy adyacentes y superpuestas que son responsables de la sensación de una imagen borrosa. Hasta ahora, el análisis del movimiento ciliar se ha limitado a métodos que se refieren al resultado de la nett de la actividad de un epitelio ciliado o al comportamiento de cilios individuales cuya frecuencia normal se ha reducido artificialmente a un nivel muy bajo. Mediante el uso de una cámara cinematográfica adecuada y un estroboscopio simple, esta limitación de la investigación se puede superar en gran medida. La primera sección de este trabajo trata sobre el desarrollo de la técnica necesaria y es seguida por otras que se ocupan de problemas específicos del movimiento ciliar. La forma y duración de las dos fases de un solo latido de un cilio individual solo se puede grabar fotográficamente si el período de tiempo involucrado es grande en comparación con la duración de un solo ciclo de la cámara que se está utilizando. Si el período de latido ciliar completo es de 0·1 segundo, la frecuencia mínima de la cámara cinematográfica debe ser del orden de 100 exposiciones por segundo. Hasta ahora, las frecuencias de este orden han resultado impracticables, ya que el aparato disponible no permitiría frecuencias superiores a 24 por segundo. Afortunadamente, la duración normal del latido de los grandes cilios abfrontales en las branquias de Mytilus edulis es del orden de 0·5 segundos, y ha sido posible tomar 12 fotografías durante este período. El aparato utilizado (placa 21, fig. 1) es una modificación de la suministrada por los Sres. E. Leitz, y consiste en un banco óptico, microscopio y cámara montados como una unidad y suspendidos por resortes verticales. El aparato, tal como lo suministran los fabricantes, no registra la frecuencia de las exposiciones y, para ello, se han empleado dos métodos alternativos. El primero de ellos se ilustra de forma esquemática en texto-fig. 1. Se perfora un pequeño orificio, L, en la base de una cámara Ascania, y en él se coloca la lente de un objetivo de microscopio de 1 pulgada al que se une un manguito de metal; en el interior del manguito se coloca una pequeña lámpara de endoscopio de 4 voltios (RL) cuyas dimensiones son de aproximadamente 2 mm. por 1 mm. Mediante un ajuste adecuado, la imagen de la lámpara puede ser el borde de la película fotográfica (F) a medida que esta pasa por encima de la rueda dentada en movimiento continuo, hacia el tambor de captación (UD) de la cámara. En el circuito de la lámpara se coloca el dispositivo de sincronización, TD. Este último consiste en un motor de inducción equipado con un freno y que lleva en lugar del acero habitual dos discos concéntricos más pequeños. Uno de ellos (SD) está pintado de blanco y está dividido en sectores de 3° por una serie de líneas negras. El otro disco (TD) se compone de dos mitades, una de latón y la otra de goma dura. El circuito de la lámpara del endoscopio se realiza a través del cuerpo del motor en T y el contacto deslizante C. Todo el aparato está encerrado en una caja de madera equipada con una ventana e iluminado desde el interior por una lámpara alterna (AL) de 60 ciclos. Para calibrar el marcador de tiempo, se enciende el motor y se ajusta el freno hasta que las líneas negras del disco (SD) parezcan estacionarias. En este punto, el disco interno TD gira una vez por segundo, y el circuito de la lámpara del endoscopio se cierra durante medio segundo y se abre durante medio segundo; con una corriente confiable de 60 ciclos, la sincronización del motor fue notablemente constante. En el revelado de una tira de película, se encuentran bandas alternas de luz y oscuridad en el borde del negativo y la longitud entre el inicio de cada banda oscura da la longitud de la película que pasa a través de la puerta de la cámara por segundo, y por lo tanto el intervalo entre dos fotografías sucesivas puede calcularse fácilmente. Es conveniente insertar un relé (R) entre el dispositivo de sincronización y el circuito de la lámpara, y montar una luz piloto (PL) en serie con la lámpara del endoscopio, ya que esta última no es visible desde el exterior de la cámara. Hay una objeción a este tipo de registrador de tiempo: la lámpara de endoscopio pequeña tarda un tiempo pequeño pero medible en brillar al cerrar la corriente, de modo que las longitudes de película que pasan a través de la cámara no se pueden determinar con mucha precisión excepto en intervalos completos de 1 segundo. Esta objeción se elimina en el segundo tipo de grabadora.

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