La acetiltransferasa de colina (ChAT) es la enzima responsable de la biosíntesis del neurotransmisor acetilcolina. La mayoría de la acetilcolina se sintetiza localmente en las terminales nerviosas donde ChAT cataliza la transferencia de un grupo acetilo de la acetil coenzima A a la colina, un proceso que tiene lugar en un solo paso. El ChAT es expresado por las neuronas colinérgicas del sistema nervioso central (SNC) y del sistema nervioso periférico (SNP) (4), que se distribuyen en muchas regiones diferentes del cerebro, la médula espinal y la retina y participan en el aprendizaje, la memoria, el movimiento y la visión (2,4).
Inmunohistoquímica Flotación libre: Colina Acetiltransferasa / Anticuerpo de ChAT-IHC en la médula espinal de rata utilizando anticuerpos de conejo a rata, ChAT de ratón( colina O-acetiltransferasa): suero entero a dilución de 1: 2000. La preabsorción del anticuerpo con el péptido inmunizante elimina por completo la inmunotinción (no se muestra).
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La tinción de anticuerpos ChAT se utiliza con frecuencia en estudios morfológicos de poblaciones de células colinérgicas. En la retina de los mamíferos, por ejemplo, el ChAT se expresa por subconjuntos de células tanto amacrinas como ganglionares (2). Estas poblaciones neuronales ChAT positivas se pueden identificar utilizando anticuerpos anti-ChAT en el contexto de ensayos inmunohistoquímicos (IHQ). Cuando se realiza en la retina, la ICH de ChAT produce un patrón característico de tinción de doble banda en la capa plexiforme interna, donde la amacrina colinérgica y las dendritas de células ganglionares forman dos estratos sinápticos distintos (2). Uno de los anticuerpos Novus ChAT se ha utilizado para cuantificar la supervivencia de las células colinérgicas en la retina de los mamíferos tras la inhibición de la proteína quinasa en modelos de enfermedad de ratón (1). Los anticuerpos Novus ChAT también se han utilizado en varios sistemas de cultivo celular para evaluar la diferenciación y las tasas de supervivencia de las neuronas colinérgicas después de varias manipulaciones. Por ejemplo, el anticuerpo Novus (NBP1-30052) se ha utilizado para identificar neuronas colinérgicas diferenciadas en estudios celulares destinados a definir un sistema experimental basado en cultivos que no dependa de neuronas primarias (3). Mientras que otro anticuerpo anti-ChAT Novus (NB110-89724) se utilizó para evaluar cualitativamente la supervivencia de neuronas colinérgicas en explantes de médula espinal (5).
Novus Biologicals ofrece reactivos de ChAT para sus necesidades de investigación, que incluyen:
- Anticuerpos de ChAT
- Lisados de ChAT
- Proteínas de chat
- ARNi de ChAT
PMID:
- 21498608
- 9786999
- 23095258
- 10594838
- 23674184
- Burugula, B., Ganesh, B. S., y Chintala, S. K. (2011). La curcumina atenúa la muerte mediada por la estaurosporina de las células ganglionares de la retina. Invest Ophthalmol Vis Sci 52, 4263-4273.
- Jeon, C. J., Strettoi, E., and Masland, R. H. (1998). Las principales poblaciones celulares de la retina del ratón. J Neurosci 18, 8936-8946.
- Liu, J., Tu, H., Zhang, D., Zheng, H., and Li, Y. L. (2012). Expresión de canal de sodio dependiente de voltaje y generación de potencial de acción en celdas NG108-15 diferenciadas. Neurociencia de BMC 13, 129.
- Oda, Y. (1999). Colina acetiltransferasa: estructura, distribución y cambios patológicos en el sistema nervioso central. Pathol Int 49, 921-937.
- Schizas, N., Rojas, R., Kootala, S., Andersson, B., Pettersson, J., Hilborn, J., and Hailer, N. P. (2014). El hidrogel a base de ácido hialurónico mejora la supervivencia neuronal en cultivos de rebanadas de médula espinal de ratones posnatales. J Biomater Appl 28, 825-836.