Ich finde eine Menge Zelltrümmer in unseren aufgetauten Zellen. Wie würden Sie ansprechen?

Diese Frage ist Teil der folgenden Ask The Expert Session:

Grundlagen der Zellkultur – Vermeidung von Kontamination, Zellwachstum und -passage sowie ordnungsgemäße Lagertechniken

Beantwortet von:

Timothy Fawcett, Ph.D.

Firma: Biotechnisches Institut von Maryland

Berufsbezeichnung: Direktor

Antwort

Ich vermute, Sie verwenden adhärente Zellen. Sehen Sie Trümmer in Ihrer Zellsuspension (durch Trypsinierung), aus denen Sie die Zellen einfrieren. Wenn Sie Zellen aus einem großen Volumen pelletieren, das Trümmer enthält, pelletieren Sie möglicherweise die Trümmer und konzentrieren sie effektiv. Machen Sie vor und nach dem Einfrieren einen Hautfleck. Wenn Sie Trümmer sehen, aber sehr hohe Lebensfähigkeit, dann ist das wahrscheinlich der Ursprung der Trümmer. Ich habe auch bemerkt, dass wachsende Fibroblasten dazu neigen, mehr Trümmer oder Membranstücke zu produzieren als andere Zelltypen. Wenn diese Gründe für die Trümmer sind dann don „t darüber sorgen. Eine Möglichkeit, einige der Trümmer zu entfernen, besteht darin, Ihre Zellen anhaften zu lassen und sie dann mit einer ausgewogenen Salzlösung oder einem Medium zu waschen, um einige Trümmer wegzuwaschen, wenn es Sie stört.

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