Chromosomenwandern

Die sequentielle Isolierung von Klonen, die überlappende Restriktionsfragmente tragen, um ein Chromosomensegment zu überspannen, das größer ist, als es in einem Phagen oder einem kosmischen Vektor getragen werden kann. Die Technik wird im Allgemeinen benötigt, um einen Locus von Interesse zu isolieren, für den keine Sonde verfügbar ist, von dem jedoch bekannt ist, dass er mit einem identifizierten und klonierten Gen verknüpft ist. Diese Sonde wird verwendet, um eine Genombibliothek zu screenen. Dadurch können alle Fragmente, die das Markergen enthalten, selektiert und sequenziert werden. Die Fragmente werden dann ausgerichtet, und die Segmente, die in beiden Richtungen am weitesten vom Markergen entfernt sind, werden für den nächsten Schritt subkloniert. Diese Sonden werden verwendet, um die Genombibliothek neu zu scannen, um neue Sammlungen überlappender Sequenzen auszuwählen. Wenn der Prozess wiederholt wird, werden die Nukleotidsequenzen von Bereichen identifiziert, die immer weiter vom Markergen entfernt sind, und schließlich wird der interessierende Ort angetroffen. Wenn eine Chromosomenaberration verfügbar ist, die ein bestimmtes Gen, das als molekularer Marker dienen kann, an eine andere Position auf dem Chromosom oder an ein anderes Chromosom verschiebt, kann der Chromosomenwert an eine andere Position im Genom verschoben werden. Die Verwendung von Chromosomenaberrationen in Experimenten dieser Art wird als Chromosomensprung bezeichnet. Siehe Chronologie, 1978, Bender, Spierer und Hogness.

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