Cholin–Acetyltransferase (ChAT) – ein nützlicher immunhistochemischer Marker für morphologische Studien von Neuronen

Cholin-Acetyltransferase (ChAT) ist das Enzym, das für die Biosynthese des Neurotransmitters Acetylcholin verantwortlich ist. Der Großteil von Acetylcholin wird lokal an Nervenenden synthetisiert, wo es den Transfer einer Acetylgruppe von Acetyl-Coenzym A zu Cholin katalysiert, ein Prozess, der in einem einzigen Schritt stattfindet. ChAT wird durch cholinerge Neuronen im Zentralnervensystem (ZNS) und peripheren Nervensystem (PNS) exprimiert (4), die in vielen verschiedenen Regionen des Gehirns, des Rückenmarks und der Netzhaut verteilt sind und am Lernen, Gedächtnis, Bewegung und Sehen beteiligt sind (2,4).

 ChAT-Expression in Ratten-Rückenmark-Neuronen, IHC Immunhistochemie Frei schwebend: Cholin-Acetyltransferase / ChAT-Antikörper – IHC am Ratten-Rückenmark mit Kaninchen-Antikörper gegen Ratte, Maus ChAT (Cholin-O-Acetyltransferase): Vollserum bei 1: 2000 Verdünnung. Durch Vorabsorption des Antikörpers mit dem immunisierenden Peptid wird die Immunfärbung vollständig aufgehoben (nicht dargestellt).

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Die ChAT-Antikörperfärbung wird häufig in morphologischen Studien cholinerger Zellpopulationen verwendet. In der Netzhaut von Säugetieren wird ChAT beispielsweise durch Teilmengen von amakrinen und Ganglienzellen exprimiert (2). Diese ChAT-positiven neuronalen Populationen können mit Anti-ChAT-Antikörpern im Rahmen von immunhistochemischen (IHC) Assays identifiziert werden. Wenn die IHC in der Netzhaut durchgeführt wird, erzeugt sie ein charakteristisches Doppelband-Färbemuster in der inneren plexiformen Schicht, wo cholinerge amakrine und Ganglienzell-Dendriten zwei unterschiedliche synaptische Schichten bilden (2). Einer der Novus ChAT-Antikörper wurde verwendet, um das Überleben cholinerger Zellen in der Netzhaut von Säugetieren nach Proteinkinasehemmung in Maus-Krankheitsmodellen zu quantifizieren (1). Novus ChAT-Antikörper wurden auch in einer Reihe von Zellkultursystemen verwendet, um die Differenzierung und Überlebensraten cholinerger Neuronen nach verschiedenen Manipulationen zu bewerten. Zum Beispiel wurde der Novus-Antikörper (NBP1-30052) verwendet, um differenzierte cholinerge Neuronen in Zellstudien zu identifizieren, die darauf abzielen, ein kulturbasiertes experimentelles System zu definieren, das nicht auf primären Neuronen beruht (3). Während ein anderer Novus Anti-ChAT-Antikörper (NB110-89724) verwendet wurde, um das Überleben cholinerger Neuronen in Rückenmarksexlantaten qualitativ zu bewerten (5).

Novus Biologicals bietet verschiedene Reagenzien für Ihre Forschungsanforderungen, darunter:

  • ChAT Antikörper
  • ChAT Lysate
  • Chat Proteine
  • ChAT RNAi

PMID:

  1. 21498608
  2. 9786999
  3. 23095258
  4. 10594838
  5. 23674184

  • Burugula, B., Ganesh, BS und Chintala, SK (2011). Curcumin dämpft den Staurosporin-vermittelten Tod von retinalen Ganglienzellen. Invest Ophthalmol Vis Sci 52, 4263-4273.
  • Jeon, CJ, Strettoi, E. und Masland, RH (1998). Die wichtigsten Zellpopulationen der Maus Netzhaut. J Neurosci 18, 8936-8946.
  • Liu, J., Tu, H., Zhang, D., Zheng, H. und Li, YL (2012). Spannungsgesteuerte Natriumkanalexpression und Aktionspotentialerzeugung in differenzierten NG108-15-Zellen. BMC Neurosci 13, 129.
  • Oda, Y. (1999). Cholinacetyltransferase: Struktur, Verteilung und pathologische Veränderungen im zentralen Nervensystem. Pathol Int 49, 921-937.
  • Schizas, N., Rojas, R., Kootala, S., Andersson, B., Pettersson, J., Hilborn, J. und Hailer, N.P. (2014). Hyaluronsäure-basiertes Hydrogel verbessert das neuronale Überleben in Rückenmarkskulturen von postnatalen Mäusen. J Biomater Appl 28, 825-836.

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