Clazakizumab in de late antilichaam-gemedieerde afwijzing: studie protocol van een gerandomiseerde gecontroleerde pilot

Studie, ontwerp en proces flow

Deze toekomstige bi-centre studie (Medische Universiteit Wenen en Charité Geneeskunde van de Universiteit van Berlijn) is een investigator-initiated fase 2 pilot gericht op de beoordeling van de veiligheid, de verdraagbaarheid en werkzaamheid (voorlopige beoordeling) van de gehumaniseerd anti-IL-6 monoklonaal antilichaam clazakizumab in de late ABMR. De sponsor van dit niet-commerciële proces is de Medische Universiteit van Wenen. Naast studieontwerp voert de opdrachtgever de studie uit (in samenwerking met onderzoekspartners), waarbij hij verantwoordelijk is voor alle wetenschappelijke, ethische, regelgevende en juridische aspecten. De financier (Vitaeris Inc., Vancouver, Canada) heeft financieringsvoorwaarden vastgesteld en zal externe financiering verstrekken.

we veronderstellen dat de toediening van clazakizumab aan niertransplantatiepatiënten bovenop de immunosuppressie bij baseline een aanvaardbaar veiligheidsprofiel zal hebben, zoals eerder gemeld voor patiënten met auto-immuunziekten. Bovendien veronderstellen we dat herhaalde toediening van clazakizumab weefselontsteking en letsel in lopende ABMR zal tegengaan, in het bijzonder ontsteking in de microcirculatie, humaan leukocytenantigeen (HLA)-specifieke B-cel allorespons, en alloantibody-getriggerde chronische graft letsel.

in Fig. 1. Een schema van evenementen wordt in Fig. 2, en een ondertekende SPIRIT 2013 checklist is bijgevoegd als een aanvullend bestand (aanvullend bestand 1). De studie bestaat uit twee opeenvolgende delen. In een eerste deel (Deel A) zullen de deelnemers gerandomiseerd worden naar clazakizumab (25 mg subcutane injectie) of placebo gedurende een periode van 12 weken (toediening van clazakizumab/placebo op dag 0 en na vier en acht weken). Na 11 weken worden patiënten onderworpen aan een eerste follow-up transplantatie biopsie. In week 12 wordt Deel A voltooid en wordt de randomisatiesequentie gedeblokkeerd voor een eerste analyse van de gegevens. Primaire doelen van dit deel van de studie zijn het beoordelen van de veiligheid en verdraagbaarheid van een korte behandelingskuur. Bovendien zal deel A een eerste voorlopige beoordeling mogelijk maken van de impact van clazakizumab op ABMR-geassocieerde ontsteking gedetecteerd in perifeer bloed en in het afstotende orgaan allograft. Na week 12 zullen alle studiepatiënten deelnemen aan een open-label deel van de studie (deel B) en zullen 25 mg clazakizumab krijgen in intervallen van vier weken tot het einde van de studiebezoek na 52 weken. Na 51 weken worden patiënten onderworpen aan een tweede protocol biopsie. De belangrijkste doelstellingen van Deel B zijn het evalueren van de veiligheid en verdraagbaarheid van een langdurige periode van behandeling met clazakizumab en het langetermijneffect van dit antilichaam op de evolutie van ABMR, afstotingsgeassocieerde biomarkers en allograftfunctie van de nieren en overleving over een periode van 12 maanden.

Hoewel de studie werd niet ontworpen om te onderzoeken welke rebound-effect na het stoppen van de behandeling met clazakizumab, na de laatste studie bezoek, alle studiedeelnemers zal worden gecontroleerd op tekenen van verslechtering van de nier-transplantatie van de functie in de reguliere follow-up bezoeken en elke vier weken voor vijf maanden na de laatste dosis (5 × halfwaardetijd) in poliklinieken.

we verwachten voltooiing van de werving van patiënten na 18 maanden en afronding van het onderzoek na 30 maanden.

deelnemers

we zullen ontvangers van een niertransplantatie met circulerende anti-HLA DSA en biopsie kenmerken van ABMR opnemen in een indicatie biopsie uitgevoerd voor een positief post-transplantatie DSA resultaat en/of langzame verslechtering van allograftfunctie en/of proteïnurie. Andere belangrijke inclusiecriteria zijn een werkend transplantaat ≥ 365 dagen na transplantatie en een geschatte glomerulaire filtratiesnelheid (eGFR) > 30 mL/min/1.73 m2. Deze EGFR-drempel is gekozen om te voorkomen dat transplantaties met een hoge mate van irreversibele chronische schade worden meegeteld (voor patiënten met een zeer vergevorderd transplantaatletsel kan geen duurzaam behandelingsvoordeel meer worden verwacht). De inclusie – en uitsluitingscriteria zijn vermeld in Tabel 1.

Randomisatieprocedure

voor deel A worden patiënten 1:1 gerandomiseerd naar een van de twee onderzoeksarmen (clazakizumab versus placebo) met behulp van een web-based randomisatieplatform (https://www.meduniwien.ac.at/randomizer). Randomisatie zal worden gestratificeerd per onderzoeksplaats en volgens ABMR categorieën (actieve ABMR versus chronische / actieve ABMR) om een evenwicht te verzekeren van patiënten met deze twee histologische types tussen de twee armen.

berekening van de steekproefgrootte

voor deze pilotstudie is geen exacte schatting van de steekproefgrootte uitgevoerd, omdat de omvang van het effect onbekend is (er is geen voorafgaande informatie om een steekproefgrootte op te baseren). Het primaire eindpunt is veiligheid en verdraagbaarheid. Een voorlopige beoordeling van de werkzaamheidsresultaten bij 20 niertransplantatiepatiënten met late ABMR zal de eerste gegevens opleveren over het effect van clazakizumab op klinische, morfologische, immunologische en moleculaire eindpunten. De respectieve resultaten (bijvoorbeeld een vergelijking tussen clazakizumab en placebo met betrekking tot microcirculatie-inflammatie en moleculaire afstotingsscores), inclusief een beoordeling van de variabiliteit, zullen naar verwachting een waardevolle basis vormen voor de opzet van toekomstige onderzoeken.

interventies

Clazakizumab of placebo worden toegediend als een enkelvoudige subcutane injectie van 1 mL elk door geblindeerd gekwalificeerd onderzoekspersoneel. Clazakizumab wordt geleverd in flacons met een enkelvoudige dosis (25 mg / mL) voor injectie en wordt geleverd door Vitaeris Inc. De placebo medicatie zal worden toegediend met een normale zoutoplossing voor injectie en zal worden verstrekt door de onderzoeker. In deel A van het onderzoek wordt clazakizumab of placebo toegediend in vierwekelijkse doses als enkelvoudige subcutane injectie op dag 0 en in week 4 en week 8. Tijdens deel B krijgen alle patiënten vierwekelijkse doses clazakizumab vanaf week 12, daarna na weken. 16, 20, 24, 28, 32, 36, 40, 44, en 48 (studiebezoek aan het einde van week 52).

de volgende geneesmiddelen worden tijdens de studie verboden: rituximab; eculizumab; proteasoomremmers; intraveneuze immunoglobuline; plasma-uitwisseling of immunoadsorptie; en andere onderzoeksgeneesmiddelen/behandelingen, waaronder in de handel verkrijgbare anti-IL-6/il-6R monoklonale antilichamen zoals tocilizumab. De volgende gelijktijdig toegediende geneesmiddelen zijn toegestaan tijdens het onderzoek: calcineurineremmers (tacrolimus of ciclosporine A); mammalian target of rapamycine (mTOR) remmer (everolimus of rapamycine); mycofenolaatmofetil (MMF)/mycofenolaatnatrium; en lage dosis corticosteroïden (prednisolon ≤ 5 mg/dag).

immunosuppressie bij aanvang

bij diagnose van late ABMR krijgen alle ontvangers (beide armen in deel A) die behandeld worden met een calcineurineremmers of een mTOR-remmer, zonder azathioprine of MMF/mycofenolzuur, MMF (aanvankelijk 2 × 500 mg per dag); stapsgewijs verhogen tot 2 × 1000 mg per dag indien dit wordt verdragen) om onder-immunosuppressie te voorkomen. Ons protocol staat geen MMF-doses > 2000 mg per dag toe. Er is een gebrek aan vaste gegevens over de optimale dosering van MMF bij ABMR; in dit verband kan de bezorgdheid bestaan dat hogere MMF-doses de hematologische toxiciteit van de IL-6-blokkade aanzienlijk kunnen verhogen (bijv. leukopenie). Tacrolimus zal worden aangepast om de beoogde dalspiegels tussen 5-10 ng/mL, CyA tot 80-120 ng/mL te bereiken. Ontvangers die eerder waren gespeend van steroïden krijgen een lage dosis prednisolon (5 mg/dag). Voor elke deelnemer worden het type immunosuppressie en de wijzigingen ervan tijdens de studieperiode gedocumenteerd.

blinden en deblinderen

randomisatie (deel A) zal op de twee onderzoeksplaatsen worden uitgevoerd door niet-geblindeerde apothekers, die ook verantwoordelijk zijn voor de bereiding van clazakizumab en placebo (0,9% zoutoplossing). Om verblindend te blijven en te garanderen en om potentiële deblinding van groepstoewijzing te voorkomen, zullen de preparaten van echte drug en placebo identiek zijn in kleur, uiterlijk en geur. De deelnemende onderzoekers, medische interactie personeel en de deelnemers aan de studie zal worden verblind om groepsindeling; het klinische team niet in staat zal zijn om toegang te krijgen tot de beveiligde toewijzing lijst (beperkt wachtwoord beveiligde toegang) tot de laatste patiënt heeft voltooid deel A. Voortijdige opheffing van de blindering kan nodig zijn in geval van medische noodsituaties, ernstige medische aandoeningen, waar de deelnemers kunnen niet adequaat worden behandeld, tenzij de medische staf kent de toegewezen behandeling omstandigheden, of meldingen van vermoedelijke onverwachte ernstige bijwerkingen (SAEs). De data and safety monitoring board (DSMB) kan desgewenst om deblinding Verzoeken.

Outcome parameters

primaire en secundaire outcome parameters zijn gedetailleerd in Tabel 2. Een schema van evenementen wordt in Fig. 2. Primaire uitkomstmaten zijn de veiligheid en verdraagbaarheid van clazakizumab, geëvalueerd gedurende de gehele studieperiode (19 bezoeken tot EOS bezoek op 52 weken, dag 0, weken 1, 2, 3, 4, 8, 11, 12, 16, 20, 24, 28, 32, 36, 40, 44, 48, 51, en 52). Volgens de statistische principes van de Internationale Conferentie voor Harmonisatie (ich) heeft de veiligheid betrekking op het medische risico voor de deelnemers, beoordeeld aan de hand van laboratoriumtests, vitale functies en AEs, terwijl de verdraagbaarheid de mate beschrijft waarin openlijke AEs door het individu kunnen worden getolereerd (zoals blijkt uit het percentage uitval door een gebrek aan verdraagbaarheid). Secundaire eindpunten zijn de farmacokinetiek (PK; clazakizumab concentratie) en farmacodynamiek (PD) van clazakizumab, zoals bepaald door seriële metingen van C-reactief eiwit (CRP). Suppressie van dit hepatocyt-afgeleide acute fase eiwit werd eerder aangetoond als een waardevolle surrogaatmarker van anti-IL-6 werkzaamheid . Voor een voorlopige beoordeling van de werkzaamheid zullen bloed-afgeleide biomarkers van ABMR (DSA kenmerken, cytokines, en markers van endotheliale activatie/letsel, patronen van perifere bloed leukocyten subpopulaties) worden beoordeeld op dag 0 en na 12 en 52 weken. Daarnaast zullen we IL-6/IL-6R transcripten bestuderen (voor aanvang van de studie en in week 12 en 52), om te verduidelijken of en in welke mate neutralisatie van IL-6 de genexpressie moduleert. Het totale immunosuppressieve effect van clazakizumab zal worden geëvalueerd door monitoring van de TTV-belasting in plasma.

Het onderzoek zal twee protocol biopten, een vroege biopsie na 11 weken (vóór het einde van deel A) vooral de opbouw van het effect van IL-6 blokkade op de microcirculatie ontsteking in directe vergelijking met een placebo, en een late biopsie na 51 weken (vóór het einde van deel B) beoordelen van het effect van clazakizumab op de progressie van chronische letsel (mate van transplantatie glomerulopathy, interstitiële fibrose en tubulaire atrofie). De twee biopten zullen elk kort (een week) voor het einde van de respectievelijke onderzoeksonderdelen worden uitgevoerd, om interferentie met gedetailleerde farmacokinetische analyses die gepland zijn voor respectievelijk week 12 en 52 te voorkomen. Alle biopten zullen worden geëvalueerd op ABMR-typische genexpressiepatronen (ATAGC, Alberta University, Edmonton; major read-out: molecular ABMR score). Daarnaast zullen de nierfunctie, eiwitexcretie, transplantaatfalen en overlijden geëvalueerd worden over de gehele studieperiode. Tot slot zullen we de impact van IL-6 blokkade (in vergelijking met placebo) op de PK van pantoprazol als probe drug van cytochroom (CYP)-afhankelijk levermetabolisme beoordelen. Pantoprazol werd gekozen omdat enkelvoudige doses goed worden verdragen en CYP2C19-activiteit gevoelig is voor fenoconversie tijdens ontstekingen . Op dag 0 en week 12 en 52 zal pantoprazol intraveneus worden toegediend in een dosering van 20 mg en zullen de geneesmiddelconcentraties elk uur gedurende een periode van 6 uur worden bepaald. Bij patiënten die een continue behandeling met protonpompremmers ondergaan, wordt de orale behandeling gedurende drie dagen voor de farmacokinetische tests onderbroken en daarna één dag hervat.

veiligheidsevaluatie en rapportage van bijwerkingen

in elke klinische situatie, met inbegrip van noodgevallen, zal adequate medische zorg worden verstrekt. De veiligheidsevaluatie omvat een zorgvuldige monitoring van alle ongewenste voorvallen (AE ‘s), met inbegrip van SAE’ s. Er zijn geen gegevens beschikbaar over de veiligheid en verdraagbaarheid van clazakizumab bij transplantatiepopulaties. Uit eerdere studies zijn echter resultaten verkregen bij > 1000 met clazakizumab behandelde patiënten / deelnemers beschikbaar voor de beoordeling van veiligheidspatronen. Tabel 3 geeft een samenvatting van bijwerkingen gemeld voor clazakizumab bij een dosis van 25 mg/maand in twee representatieve fase 2-onderzoeken uitgevoerd bij patiënten met artritis.

tussentijdse analyses

deze studie zal worden gemonitord door een onafhankelijke DSMB om de veiligheid en de gegevenskwaliteit te beoordelen. Om belangrijke verschillen tussen groepen op het gebied van veiligheidsaspecten tijdig op te sporen, zullen de bestuursleden worden geïnstrueerd om tussentijdse analyses uit te voeren nadat 10 en 20 patiënten deel A van de studie hebben afgerond. De DSMB zal geregistreerde AEs-en veiligheidslaboratoriumresultaten analyseren in relatie tot de randomisatiesequentie.

de DSMB kan overwegen de studie te stoppen als het algemene patroon van gerelateerde bijwerkingen of veranderingen in de resultaten van het veiligheidslaboratorium een belangrijk veiligheidssignaal sterk ondersteunt. Deel A: als zes deelnemers gerelateerde (definitief en mogelijk) bijwerkingen (common toxicity criteria > graad 3 of ernstig/medisch significant) en/of aanzienlijk verhoogde leverparameters (alanineaminotransferase , aspartaataminotransferase en/of bilirubine > 3× bovengrens van normaal ) of neutropenie (< 0,5 G/L) ervaren , zal de DSMB de veiligheidsresultaten deblokkeren. Als vijf of alle deelnemers in de clazakizumab-groep zitten, wordt de studie gestopt. Evenzo zal de DSMB deze SAE ’s deblinden als er zes gerelateerde SAE’ s en/of aanzienlijke afwijkingen in leverenzymen of neutrofielentellingen optreden in dezelfde systeem / orgaanklasse en als er vijf of alle SAE ‘ s in de clazakizumab-groep zitten, dan zal de studie worden gestopt. Deel B (Alle deelnemers aan de behandeling met clazakizumab): als ≥ 10 personen geneesmiddelgerelateerde bijwerkingen ervaren of ≥ 10 gerelateerde bijwerkingen optreden in dezelfde systeem / orgaanklasse, wordt de studie gestopt (het totale aantal gerelateerde bijwerkingen moet ook de gerelateerde bijwerkingen omvatten die optreden bij de met clazakizumab behandelde personen tijdens deel A).

voor dit proefonderzoek zijn geen exacte statistische definities van criteria voor vroegtijdige beëindiging van het onderzoek gedefinieerd.

kwaliteitscontrole en kwaliteitsborging

controleprocedures omvatten vooraf vastgestelde regelmatige bezoeken aan de twee onderzoekslocaties. De onderzoekers zullen toegang verlenen tot alle brondocumenten, met inbegrip van case report formulieren en andere protocol-gerelateerde documenten. De vertrouwelijkheid van de deelnemers zal worden gehandhaafd in overeenstemming met de lokale regelgeving. De aangewezen monitor zal regelmatig contact opnemen met en een bezoek brengen aan de onderzoeker en zal toegang krijgen tot alle brondocumenten die nodig zijn om de vermeldingen in de gevalsrapportformulieren en andere protocolgerelateerde documenten te verifiëren, op voorwaarde dat de vertrouwelijkheid van de deelnemers wordt gehandhaafd in overeenstemming met de lokale regelgeving. Het is de verantwoordelijkheid van de monitor om het gevalsrapportformulier regelmatig te inspecteren volgens het monitoringplan gedurende de hele studie, om de naleving van het protocol en de volledigheid, consistentie en nauwkeurigheid van ingevoerde gegevens te controleren. De monitoringnormen vereisen een volledige verificatie van de aanwezigheid van geïnformeerde toestemming, naleving van de inclusie – /uitsluitingscriteria, documentatie van AE en de registratie van de belangrijkste eindpunten voor werkzaamheid, veiligheid en verdraagbaarheid.

methodologie

nierfunctie

eGFR zal worden beoordeeld met behulp van de Chronic Kidney Disease Epidemiology Collaboration (CKD-EPI) equation (mL/min/1.73m2). Eiwitexcretie zal gedocumenteerd worden als eiwit/creatinine ratio in spot urine (mg / g).

Transplantatiebiopten

Index-en follow-upbiopten zullen worden uitgevoerd met behulp van ultrageleide percutane technieken (1-2 kernen per biopsie, 16-gauge naald). Na biopsie, patiënten zullen nauwlettend worden gecontroleerd voor 5-8 uur voor eventuele complicaties (seriële bloeddrukmetingen, monitoring voor hematurie, hemoglobine controle 4 uur na biopsie). Histomorfologie zal worden geëvalueerd op paraffine-ingebedde secties met behulp van standaard methodologie. Voor immunohistochemische c4d kleuring, zullen we een polyclonal anti-c4d antilichaam (BI-RC4D, Biomedica, Wenen, Oostenrijk) en minimale immunohistochemische kleuring (c4d Banff score ≥ 1) langs peritubulaire capillairen worden beschouwd als positief. Biopten zullen ook worden geëvalueerd door elektronenmicroscopie voor de detectie van microcirculatieschade. Morfologische resultaten zullen worden geëvalueerd door ervaren niertransplantatie pathologen geblindeerd voor behandeling toewijzing. Verder zullen biopten worden geanalyseerd met behulp van een grondig gevalideerde moleculaire methode (MMDx™), zoals voorgesteld door het Banff schema . Voor elke biopsie wordt een gedeelte van 3 mm van één kern onmiddellijk in RNAlater geplaatst, opgeslagen bij-20 °C en bij omgevingstemperatuur of droogijs naar het Alberta Transplantation Applied Genomics Centre (ATAGC, University of Alberta, Edmonton, AB, Canada) verscheept voor Gen – array-analyse. Moleculaire scores gebaseerd op machine-learning afgeleide laesie-gebaseerde classifiers gerelateerd aan rejection (ABMRpm, tcmrt, all Rejection) zullen gegenereerd worden met behulp van de Edmonton referentie set van > 1200 biopten. Bovendien zullen genexpressiepatronen geëvalueerd worden met behulp van onbevooroordeelde archetype-analyse . Voor de classificatie van ABMR worden alle biopsieresultaten geanalyseerd in de context van de moleculaire resultaten. ABMR-categorieën en morfologische enkelvoudige laesies zullen worden gedefinieerd en gescoord na recente updates van de Banff-classificatie .

HLA-antilichaamdetectie

Sera zullen door warmte geïnactiveerd worden om complementafhankelijke in vitro artefacten (prozonefenomeen) uit te sluiten en worden onderworpen aan single-antigen flow-bead testing (Labscreen Single Antigen assays; One Lambda, Canoga Park, CA, USA). Testresultaten zullen worden gedocumenteerd als gemiddelde fluorescentie intensiteiten; een gemiddelde fluorescentieintensiteit (MFI) > 1000 zal als positief worden beschouwd. De specificiteit van de Donor zal worden bepaald op basis van de HLA – typeresultaten van de donor en de ontvanger met een lage of hoge resolutie. Virtual panel-reactieve antilichaamniveaus zullen worden berekend met behulp van specifieke softwaretools (http://www.eurotransplant.org/cms/).

Cytokines en markers van endotheliale activering/verwonding

Sera verzameld in week 0, 12 en 52 zullen worden geanalyseerd op IL-6, oplosbare IL-6R en markers die ontsteking of endotheliale activering en letsel weergeven met behulp van parelarrays op een Luminex-platform of enzyme-linked immunosorbent assay-technologie. Tegelijkertijd worden urinemonsters getest volgens dezelfde methode. Voor de op Luminex gebaseerde analyse van serum-en urinebiomerkers zullen we Humane ProcartaPlex Simplex Immunoassays gebruiken volgens het Protocol van de fabrikant (Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA, USA). Tests zullen worden uitgevoerd op een Luminex 200 instrument. Parelpanelen zullen combinaties van verschillende markers bevatten die mogelijk de omvang van ontsteking en letsel weerspiegelen, waaronder chemokines (bijv. CXCL9 en CXCL10) en endotheliale markers (bijv. VCAM-1 en E-selectin), respectievelijk. Urine resultaten zullen worden genormaliseerd naar urine creatinine concentraties.

Leukocytsubpopulaties

de onderliggende mechanismen van ABMR, in het bijzonder de rol van perifere T – en B-celsubgroepen, zijn niet volledig opgehelderd. Aldus, is de prospectieve immune fenotypering een veelbelovende benadering om de impact van IL-6 blokkade op immuno-regelgevende wegen verder te verduidelijken. Voor het monitoren van leukocyten (sub-)populaties zullen we reproduceerbare immune monitoring panels gebruiken voor fenotypering. Onlangs heeft het internationale consortium “the ONE study” een gestandaardiseerd panel (DuraClone®, Beckman Coulter, Marseille, Frankrijk) ontworpen voor flow cytometry-gebaseerde immune fenotyping die robuuste resultaten heeft aangetoond . In de duraclone immune monitoring kits bevatten vooraf gedefinieerde assay tubes een laag met het opgedroogde antilichaampaneel klaar voor gebruik. Tot 10 verschillende monoklonale antilichamen per buis staat voor de identificatie van leukocyten (B.V. T-cel, B-cel, natuurlijke moordenaarcellen) subpopulaties huidig in volbloed steekproeven toe.

genexpressie-analyse

voor genexpressie-analyse wordt 5 mL bloed verzameld in PAXGENE RNA-bloedbuisjes en opgeslagen bij-80 °C tot de analyse. Na het ontdooien wordt RNA geà soleerd en getranscribeerd in complementair DNA (cDNA). De hoeveelheid RNA / cDNA van IL-6 of IL-6R zal worden bepaald door kwantitatieve real-time polymerasekettingreactie (PCR) met behulp van de Taqman-assay.

Torque Teno virus (TTV) kwantificering

TTV DNA zal worden gekwantificeerd in opgeslagen plasmamonsters met behulp van real-time PCR, zoals eerder beschreven .

Pantoprazol PK

vloeistofchromatografie tandemmassaspectrometrie zal worden toegepast om pantoprazol-spiegels en-kinetiek te beoordelen .

statistische methoden

Analyses zullen worden uitgevoerd volgens het intention-to-treat Principe. Continue gegevens worden gepresenteerd als gemiddelde en standaardafwijking (SD) of mediaan en interkwartielbereik (IQR), naargelang van toepassing, en categorische variabelen als absolute en relatieve frequenties. Groep vergelijkingen (op baseline en na drie maanden) voor continue data (CRP niveaus, eGFR, eiwit/creatinine ratio is het niveau van de afwijzing van biomarkers in serum en urine, IL-6/IL-6R expressie niveaus, HLA-antistoffen kenmerken , morfologische of moleculaire (bijv. ABMR score) biopsie scores) worden geanalyseerd met behulp van parametrische (t-test) of niet-parametrische (Mann–Whitney U test) test, naargelang het geval. Fisher ‘ s exacte test zal worden gebruikt om categorische gegevens tussen groepen te vergelijken (voorkomen van AEs, morfologische/moleculaire ABMR categorieën, en biopsie-bewezen acute afstoting bij baseline en na drie maanden). Transplantatie en patiënt overleving of AE-vrije overleving zullen geëvalueerd worden met behulp van Kaplan-Meier analyse en de Mantel Cox Log-rank test zal toegepast worden voor groepsvergelijkingen. Voor gepaarde gegevens (bijvoorbeeld morfologische en moleculaire biopsiescores na 3 vs 12 maanden in de totale cohort), gepaarde t-test of Wilcoxon test zal worden gebruikt. Een tweezijdige p-waarde < 0.05 zal statistisch significant worden geacht. Analyse van de farmacokinetiek van clazakizumab en pantoprazol zal een beschrijving bevatten van de tijdsevolutie van antilichaam/geneesmiddelconcentratie. Eliminatie halfwaardetijd, Tmax, Cmax, klaring en distributievolume zullen worden berekend met behulp van standaardsoftware. Voor statistische analyse, IBM SPSS Statistics 24 (IBM Corporation, Armonk, NY, USA) en SAS for Windows (The SAS Institute Inc., Cary, NC, USA) zal worden gebruikt.

Onderzoeksregistratie

het onderzoek werd goedgekeurd door de Oostenrijkse (Federale Dienst voor veiligheid in de gezondheidszorg, Oostenrijks agentschap voor gezondheid en voedselveiligheid) en de Duitse regelgevende instanties (Federaal Instituut voor vaccins en Biogeneesmiddelen, Paul-Ehrlich Instituut). Het onderzoek is geregistreerd in de Europese databank voor klinische proeven (EudraCT-nummer: 2017-001604-30; prospectieve registratie) en in een openbare databank voor klinische proeven (ClinicalTrials.gov NCT03444103; retrospectieve registratie).