chlorofyl extractiemethoden voor de kwantificering van groene microalgen die gevels van gebouwen koloniseren

het voorkomen van microalgen op kunstmatige oppervlakken zoals dakpannen, beton, gevels van gebouwen en andere kunstmatige oppervlakken in stedelijke gebieden, waar het esthetisch onaanvaardbare verkleuring van de oppervlakken veroorzaakt, vormt een opvallend probleem vanwege zijn bijdrage aan biodeterioratie en versnelde verwering. Tot nu toe is microbiële kolonisatie voornamelijk macroscopisch geregistreerd, en dus semi-kwantitatief geëvalueerd aan de hand van de mate van verkleuring, en de visuele gegevens toegewezen aan een kleurenschaal voor algeninfestatie intensiteit. Echter, deze beoordelingen ontbreken inter-kalibratie en lijden aan kleurwijzigingen als gevolg van co-voorkomende schimmels of achtergrondeigenschappen. Door chlorofyl a als specifieke biomarker van aeroterrestrial microalgen te gebruiken, werd daarom een extractiemethode ontwikkeld om biomassa te kwantificeren. Twee groene microalgen, Stichococcus sp. en Chlorella sp., werden geïsoleerd van gevels van gebouwen, vastgesteld als monoculturen en gebruikt in de huidige studie. Algenmonsters worden het best bewaard door invriezen in vloeibare stikstof, gevolgd door lyofilisatie en vervolgens opslag bij -18 °C. dimethylformamide (DMF) bleek het beste extractiemiddel te zijn. Mechanische homogenisatie verbeterde extractie tot 20%. Chlorofyl a-extractieefficiëntie was echter sterk soortspecifiek en werd verder beïnvloed door de groeiomstandigheden, d.w.z. of de cellen zich in logaritmische of stationaire groeifase bevonden. Om maximumgehalten voor chlorofyl a te bereiken uit monsters met onbekende samenstelling en fysiologische toestand van algensoorten, werd het noodzakelijk geacht ten minste twee extracties van 24 uur in DMF uit te voeren. Indien de tweede extractiestap >20% bijdroeg tot de totale chlorofyl a-concentratie, werd een derde DMF-extractie toegepast. Met behulp van deze biomarker assay werd tot 313 mg chlorofyl A m−2 verkregen uit gevels van gebouwen, overeenkomend met c. 100 g vers gewicht van algen, wat een hoge organische belasting vertegenwoordigt.

Geef een antwoord

Het e-mailadres wordt niet gepubliceerd.