hoewel de meeste werkzaamheden met betrekking tot chlamydiale infecties bij kleine herkauwers ooien betreffen, heeft chlamydiose een economische en volksgezondheidsimpact in talrijke geitenhouderijen over de hele wereld. Chlamydiale abortussen werden voor het eerst gemeld in Duitsland in 1959.Daarna werd de ziekte gediagnosticeerd in Bulgarije, Spanje, de VS, Frankrijk, India, Japan, het Verenigd Koninkrijk, Tsjaad, Griekenland en Tunesië. In veel gebieden is chlamydiale abortus de tweede oorzaak van infectieuze abortussen na brucellose, en de belangrijkste oorzaak in de meeste landen waar brucellose onder controle is
etiologie
de ziekte is te wijten aan een kleine gramnegatieve bacterie, Chlamydia psittaci, die in het cytoplasma van eucaryotische cellen groeit in een unieke ontwikkelingscyclus waarin een resistente infectieuze vorm, de elementaire lichamen (EB) worden afgewisseld met een metabolisch actieve niet-infectieuze vorm de netvormige lichamen (RB). EB hecht aan het membraan van de gastheercel en bevordert zijn eigen endocytose in een membraan beperkte vacuole genoemd de opneming, die niet met lysosomes fuseert. Dan transformeert EB in RB, die door binaire splijting repliceert. Na verschillende divisies transformeren de RBs, die alle inclusie vullen, terug in infectieuze EBs. Deze EBs worden vrijgegeven door de lysis van de gastheercel of Uitdrijving van de opneming uit de gastheercel . Chlamydia psittaci is een van de vier soorten uit het geslacht Chlamydia, waaronder Chlamydia trachomatis, Chlamydia pneumoniae en Chlamydia pecorum.Chlamydia trachomatis en Chlamydia pneumoniae zijn beide humane pathogenen. C. psittaci infecteert een grote verscheidenheid aan vogels, zoogdieren en soms mensen en C. pecorum besmet herkauwers, varkens en koala ‘ s. Bij ooien en geiten veroorzaakt C. pecorum longontsteking, conjunctivitis en artritis, maar is zeer vaak geïsoleerd van asymptomatische darminfecties .
behalve in zeer zeldzame gevallen behoren stammen die abortus bij geiten induceren tot C. psittaci serotype-1, dat ook verantwoordelijk is voor pneumonie, conjunctivitis en artritis en soms darminfecties zonder klinische symptomen. De C. psittaci soort is zeer heterogeen en voor de vierde soort verscheen C. pecorum .Fylogenetische analyses van 16S en 23S rRNA genen suggereren het bestaan van negen verschillende soorten in de Chlamydiaceae, en lead Everett et al., om de oprichting van twee nieuwe geslachten Chlamydia en Chlamydophila voor te stellen. Het geslacht Chlamydia, dat overeenkomt met de oude Chlamydia trachomatis benaming omvat 3 soorten: C. trachomatis (menselijke stammen), C suis (varkens stammen gerelateerd aan C. trachomatis geïsoleerd uit spontane abortussen, vaginale infecties, en pneumoniae) en C. muridarum (muis-hamster stammen).
het geslacht Chlamydophila hergroepeert 6 soorten: C. pneumoniae, C. pecorum, C. psittaci (eerdere Chlamydia psittaci avian stammen), C. caviae, het agens van cavia inclusion conjunctivitis (gpic), C. felis (C. psittaci stammen die katten infecteren) en C. abortus (klassieke serotype-1 Chlamydia psittaci stammen). De resultaten zijn in overeenstemming met die verkregen door fylogenetische analyses van vijf andere coderende genen (GroEL, kdo-transferase, MOMP, 60-kDa cysteine-rijke proteã ne, en cysteine-rijke lipoproteã ne) en de biologische eigenschappen van de stammen . De restriction length polymorphism analysis (RFLP) van het ribosomale intergene spacer domein van 16S-23S rRNA genen biedt een snelle en reproduceerbare methode voor het identificeren en classificeren van de chlamydiale stammen in de nieuwe soorten . Sommige leden van de wetenschappelijke gemeenschap zijn het echter niet eens met het voorstel voor een nieuwe chlamydiale taxonomie, omdat er geen rekening wordt gehouden met het hele genoom van de bacteriën.
klinische symptomen
chlamydiose wordt klinisch gekarakteriseerd door abortus tijdens de laatste maanden van de zwangerschap, doodgeborenen of vroeggeborenen van zwakke kinderen met een laag geboortegewicht. Abortus vindt plaats zonder voorafgaande klinische specifieke symptomen, zelfs als sommige geiten aanhoudende hoest kunnen ontwikkelen zonder kortademigheid, of artritis en keratoconjunctivitis. Bij experimentele infecties werd een lichte vaginale afscheiding waargenomen de dag voor de abortus bij sommige geiten . Behouden placenta ‘ s en metritis zijn niet gebruikelijk, zelfs als ze vaker dan bij ooien . Na de abortus, geiten kunnen snel herstellen of kan bruine afscheiding uit de vagina. In experimentele infecties of in sommige natuurlijke infecties met een hoog percentage abortussen slechts 50% of minder van geiten die geaborteerd, hersteld snel terwijl post-abortieve ziekte bij ooien is ongebruikelijk. Dit kan te wijten zijn aan verschillen in virulentie tussen stammen omdat er zeer weinig bekend is over virulentiemechanismen van stammen. In muismodellen kon geen verschil in virulentie worden aangetoond tussen schapen-en geitenstammen , maar amplified fragment length polymorfism (AFLP) bracht genomische verschillen aan het licht tussen geitenstam AC1 en schapen serotype-1 C. psittaci-stammen .
hoewel we hebben aangetoond dat het onderhouden van geïnfecteerde geiten kan leiden tot geïnfecteerde stieren , is tot nu toe geen epidymitis als gevolg van C. psittaci beschreven bij stieren. Dit is waarschijnlijk eerder te wijten aan het zeer kleine aantal onderzoeken naar chlamydiose bij geiten dan aan een grotere gevoeligheid van rammen en stieren voor chlamydiale infecties.
in een pas besmet koppel is het percentage abortussen ernstig. Vaak 30% of meer, soms 90% van de zwangere doet kan afbreken en melkproductie kan afnemen. Het hoge percentage abortus wordt waargenomen gedurende 2 of 3 jaar waarna de ziekte een cyclische aard krijgt: 10% van de zwangere vrouwtjes zal elk jaar gedurende enkele jaren afbreken totdat er een nieuwe uitbraak plaatsvindt en dan zullen alle jaarlingen afbreken. Het hoge niveau van immuniteit geproduceerd na abortus is verantwoordelijk voor de cyclische evolutie van de ziekte in de kudde: het is uitzonderlijk voor een geit om twee keer te aborteren. Papp en Shewen hebben aangetoond dat sommige van de ooien die geaborteerd chronisch besmet kan worden. Chlamydiale antigenen en DNA kunnen worden gedetecteerd in de vagina, baarmoeder en baarmoeder buizen tijdens de peri-ovulatoire periode van ooien die afgebroken. Er is geen onderzoek gedaan naar de incidentie van chronische infecties bij geiten.
de foetus vertoont geen specifieke macroscopische laesie. Kinderen die dicht bij de termijn worden geleverd, kunnen worden gedekt door bruin Materiaal. Helder of met bloed bevlekt diffuus oedeem, met bloed bevlekte vloeistoffen in buik-en pleurale holten en petechiën op de tong, in de buccale holte en op de hoeven worden vaak waargenomen.
overdracht van de ziekte
geïnfecteerde uitgescheiden grote aantallen Chlamydiae in placenta en foetale vloeistoffen op het moment van grapje en op het moment van abortus. Sommige geiten kunnen Chlamydia werpen in vaginale vloeistoffen van meer dan twee weken voor abortus tot meer dan twee weken na abortus. Dit kan de hogere incidentie van abortus in Pas geïnfecteerde kuddes geiten verklaren, aangezien de gevoeligheid voor infectie varieert in relatie tot de fysiologische status van het dier. Geiten die minder dan 100 dagen drachtig zijn, zijn vatbaarder dan die aan het einde van de dracht of die onvruchtbaar zijn. Kleinere hoeveelheden Chlamydiae kunnen ook in urine, melk en uitwerpselen worden afgevoerd gedurende enkele dagen na abortus.
jonge geiten geboren uit besmette moeders kunnen de infectie in het beslag behouden of naar andere beslagen overbrengen. Het onderzoek bij een groep van 27 jaarlingen in een besmette kudde tijdens hun eerste levensjaar toonde aan hoe zij de ziekte konden verspreiden door niet te worden gedetecteerd door hun serologische respons. Deze jonge geiten konden worden onderverdeeld in 3 groepen naargelang de dracht / bevalling. De eerste groep Kidde normaal gesproken een levend kind, de tweede groep was onvruchtbaar of had te vroeg in de dracht geaborteerd om ontdekt te worden en in de derde groep hadden geiten geaborteerd. De complementfixatie (CF) antilichamen van de twee eerste groepen namen toe tot een maximum (1/80 – 1/160) op het moment van fokken, waarna de antilichaamniveaus afnamen tot het moment van een grapje . De derde groep had een CF antilichaamtiter de rol van geslachtelijke overdracht van chlamydiose door mannetjes moet nog onderzocht worden. Echter, genitale infecties bij rammen en stieren resulteren in mannelijke onvruchtbaarheid en steriliteit in plaats van abortus bij vrouwen. De rol die de ziekte speelt in inaparent darminfectie en zijn invloed in de epidemiologie van chlamydiale abortus moet worden onderzocht. De recente identificatie van moleculaire merkers voor capriene darmstammen zou dergelijke studies mogelijk maken.
diagnose
de diagnose wordt meestal uitgevoerd door het opsporen van bacteriën in uitstrijkjes of afdrukken van de placenta in combinatie met een serologische analyse van ten minste tien sera-monsters.
kleuring van Chlamydia door de methode Stamp, Gimenez of Machiavello is snel en kan gemakkelijk worden uitgevoerd in de meeste laboratoria, maar de interpretatie ervan is vaak lastig omdat een ervaren persoon nodig heeft om Chlamydia te onderscheiden van Brucella en Coxiella. Immunofluorescentie met behulp van immunoglobuline conjugaten gemarkeerd met fluorescerend gelabeld isothiocyanaat, verhoogt de gevoeligheid en specificiteit van de detectie van chlamydia in uitstrijkjes of placenta indrukken.
de aanwezigheid van chlamydiale antigenen in gemalen placenta of vaginale swabs die vlak na abortus worden bemonsterd, kan worden gedetecteerd met ELISA met diagnostische kits ontwikkeld voor infecties met C. trachomatis bij de mens .
in de humane geneeskunde worden polymerasekettingreactie (PCR) of variatie daarvan, ligasekettingreactie (LCR) beschouwd als de meest gevoelige diagnostische methoden die beschikbaar zijn voor de diagnose van Chlamydia. Verschillende primers die gemeenschappelijk zijn voor alle soorten Chlamydia, zoals Omp1, het gen dat codeert voor het belangrijkste buitenmembraan-eiwit , of specifiek is voor C. psittaci of C. pecorum of van de serotype-1 C. psittaci-stammen, zijn ontwikkeld voor veterinaire toepassing. Maar deze techniek blijft duur.
de complementbindingstest (CFT) wordt het meest gebruikt en wordt beschouwd als de gouden standaard voor serologische diagnose. CFT is echter niet erg gevoelig en niet specifiek omdat de test een antigeen i gebruikt dat gebruikelijk is bij C. pecorum, dat de meeste geiten in hun darm hebben. Daarom zijn positieve reacties met titers tussen 1: 10 en 1: 40 niet specifiek voor abortus, maar kunnen betrekking hebben op een darminfectie met C. pecorum. De CFT-test moet bij voorkeur 3 tot 6 weken na abortus of lammeren worden uitgevoerd, wanneer de antilichaamrespons op het maximale niveau is. De CFT-test kan niet worden gebruikt voor individuele diagnose of voor het opsporen van infecties bij jonge of mannelijke dieren .
verschillende pogingen werden ondernomen om meer specifieke technieken te ontwikkelen, waarbij een onderscheid zou worden gemaakt tussen C. psittaci-en C. pecorum-infecties. Geen van deze tests was echter voldoende gevoelig en specifiek. Onlangs is een nieuwe indirecte enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) ontwikkeld op basis van een recombinant antigeen dat een deel van een eiwit van 80-90 kDa tot expressie brengt . De test reageert met vroeg opgewekte serumantilichamen tegen deze zeer immunogene multigene familieproteïnen . Deze test heeft hoge gevoeligheid en hoge specificiteit .
behandeling
tetracyclinen beïnvloeden de replicatie van chlamydia en kunnen effectief zijn bij het voorkomen van abortussen. De injectie van 20 mg/kg oxytetracycline toegediend via intramusculaire route op 105 en 120 dagen zwangerschap kan abortus voorkomen, maar kan niet voorkomen dat de chlamydiale afstoten bij een grapje.
vaccinatie
gedode vaccins konden de incidentie van abortus verminderen, maar niet de uitscheiding van Chlamydiae bij grapje. Abortus induceert een sterk genoeg immuniteit om latere uitdagingen te weerstaan, een levend vaccin gevormd met een temperatuurgevoelige mutant van C. psittaci stammen werd ontwikkeld . Vatbare geiten werden gevaccineerd vóór de dekking en er werd geen interferentie met de daaropvolgende dracht waargenomen. Geiten werden beschermd tegen chlamydiale abortus en chlamydiale afstoten bij een grapje werd voorkomen. Wanneer echter alle geiten in een besmette kudde het eerste jaar worden gevaccineerd en alle vervangende dieren in de daaropvolgende jaren worden gevaccineerd, kan het ongeveer 3 jaar duren voordat de abortussen stoppen. Dit is te wijten aan latente infectie bij geiten, geiten die vóór de vaccinatie waren geïnfecteerd maar niet waren afgebroken. Vaccinatie zal het verloop van een latente infectie niet veranderen. Deze geiten kunnen op termijn een gezonde of geïnfecteerde jongen afbreken of kidnappen en Chlamydiae al dan niet afscheiden. Zolang geiten met een latente infectie aanwezig zijn in een kudde, is het niet raadzaam om te stoppen met vaccineren (anders zouden abortussen opnieuw beginnen), noch is het mogelijk om gevaccineerde dieren te verkopen, behalve aan fokkers die hun kudde regelmatig vaccineren.
toekomstperspectieven
de ontwikkeling van een vaccin dat even efficiënt is als het genoemde levende vaccin, dat de serologische detectie van geïnfecteerde geiten in gevaccineerde koppels beschermt en mogelijk maakt, zou zeer nuttig zijn voor de bestrijding van de ziekte. Depletie van het ‘diagnosespecifiek antigeen’ uit het levende vaccin is momenteel geen optie, aangezien er nog geen geschikte genetische en moleculaire methoden beschikbaar zijn en het moeilijk lijkt deze eiwitfamilie te verwijderen. Om deze redenen zou een acellulair vaccin, dat beschermt tegen abortus en uitscheiding van belang zijn. Eerdere studies hebben aangetoond dat zowel T-als B-lymfocyten betrokken zijn bij beschermende immuniteit . In muismodellen spelen CD8+ T-cellen (Lyt 2+ In muis) een belangrijke rol bij de bescherming na overdracht van geprimeerde miltcellen . Tot op heden, C. psittaci T-celantigenen en epitopen zijn onbekend. Hoewel voorzichtigheid geboden is bij het extrapoleren van C. trachomatis resultaten naar C. psittaci, zijn verschillende T-celepitopen geïdentificeerd op C. trachomatis major outer membrane protein (MOMP)
de rol van antilichamen bij het voorkomen van placenta-en foetale infectie door C. psittaci is aangetoond bij muizen. Passieve overdracht van specifieke polyclonale sera induceert significante immuniteit zij het lager dan t celgemedieerde bescherming . Monoklonale antilichamen (Mabs) die C. neutraliseren in vitro geeft de infectiviteit van psittaci een opmerkelijke immuniteit aan zwangere muizen na intraveneuze provocatie, aangezien abortus en foetale kolonisatie worden geëlimineerd . Humorale immuniteit is betrokken bij bescherming. De effectiviteit ervan hangt af van de concentratie van specifieke antilichamen tegen de juiste epitoop. Alle tot op heden geïsoleerde beschermende Mabs reageren met thermosgevoelige conformationele epitopen op een MOMP oligomeer .
daarom zou de MOMP-oligomeer een potentiële vaccincomponent kunnen zijn . Het is echter niet haalbaar om dit antigeen te produceren door extractie uit chlamydiae, aangezien de productiekosten aanzienlijk hoger zouden zijn dan de kosten die een landbouwer voor een geiten-of schapenvaccin betaalbaar zou achten. Daarom moeten alternatieve methoden voor de productie van vaccins worden onderzocht.
de aanmaak van recombinant MOMP-oligomeer kan moeilijk zijn. Het gen dat MOMP codeert, Omp1, is goed gekarakteriseerd, maar expressie op hoog niveau van het volledige gen van een ongereguleerde promotor is giftig voor E. coli. Om deze reden werden verschillende experimentele strategieën voor het genereren van de beschermende epitopen ondernomen. We probeerden de beschermende epitopen na te bootsen met monoclonal anti-idiotypic antilichamen, of constitutionally restricted peptide mimotope, maar geen van hen was efficiënt. We besloten om de vaccinatie van muizen met DNA-vaccin te beoordelen als DNA-vaccinatie met MOMP gen beschermde muizen tegen C. trachomatis en kalkoenen tegen C. psittaci . Tot nu toe werd slechts gedeeltelijke bescherming verkregen, maar verder onderzoek (op doelgen, concentratie van DNA, vaccinatieroute, enz.) is nodig om te weten of muizen met een DNA-vaccin even efficiënt kunnen worden beschermd als met een levend vaccin.