Conversão do colesterol a pregnenolona é mediada pelo colesterol lado a clivagem da cadeia (SCC) enzima P450scc. A deficiência de atividade SCC causa hiperplasia adrenal lipóide congênita (também conhecida como deficiência de 20,22 desmolase), um defeito potencialmente letal na síntese de todos os hormônios esteróides. Para sondar possíveis defeitos genéticos que causam esta doença sintetizamos quatro oligodeoxirribonucleótidos contendo 63 a 72 bases correspondentes a partes da sequência de ADN complementar bovino (cDNA) para o P450scc. Os oligonucleótidos bovinos foram rotulados e utilizados diretamente para sondar bolhas do Sul de DNA genômico humano normal, revelando um padrão indicando que existe um único gene P450scc no genoma humano. A hibridação ao norte de blots normais de ARN mensageiro adrenal humano e bovino indica que o RNA mensageiro p450scc tem cerca de 2 kilobases de comprimento em ambas as espécies. Hibridizações dos oligonucleótidos ao ADN genómico de três doentes não relacionados com deficiência de CSC não detectaram uma deleção no gene humano P450scc. Os oligonucleótidos de sequência bovina foram então utilizados para isolar um clone cDNA p450scc humano. O fragmento cDNA isolado de P450scc contém 818 bases que codificam 239 aminoácidos da proteína, o sinal de terminação da tradução, e 98 bases da Região 3′ não traduzida. A sequência desta metade carboxi-terminal da proteína humana P450scc é 72% homóloga com a sequência bovina e contém um aminoácido adicional não encontrado no p450scc bovino; as sequências dos nucleótidos humano e bovino são 81% homólogas. A repetição dos estudos de coagulação do ADN genómico com a sonda cDNA deu os mesmos resultados obtidos com as sondas de oligonucleótido de sequência bovina, confirmando que a deficiência de CCC não é devida a uma eliminação nas regiões da hibridização P450scc com as sondas. Oligonucleotídeos de sequência heteróloga longa e quimicamente sintetizados contendo números desconhecidos de desfasamentos de base com sequências humanas podem, assim, ser utilizados para estudar genes humanos de modo que o acesso a um cDNA não seja necessário para tais estudos.