Esta proposta endere輟s a relação estrutura-função da vitamina k-dependentes de coagulação de sangue de proteínas, com especial atenção para a gama carboxyglutamic ácido. Este programa, que envolve quatro projetos separados mas relacionados, evoluiu do trabalho anterior desenvolvido no período anterior. No projecto nº 1, será estudada a relação estrutura-função do Factor IX e da protrombina. As formas mutantes destas proteínas, obtidas de doentes com anomalias hereditárias estruturais e funcionais destas proteínas, serão purificadas utilizando anticorpos específicos da conformação, fragmentados por proteólise, e os peptídeos mutantes sequenciados. O defeito molecular em cada proteína mutante será estabelecido e correlacionado com defeitos funcionais. No projeto # 2, a proteína recém-descoberta da membrana plaquetária KC4 será totalmente caracterizada e localizada em organelas subcelulares específicas. A função e as propriedades de ligação desta proteína, expressas apenas em plaquetas activadas, serão determinadas. O projeto # 3 definirá o papel da Gla na protrombina. Será avaliado um novo modelo de interacção Gla, metal e membrana na protrombina utilizando abordagens imunoquímicas e espectroscópicas. As propriedades de ligação à membrana e a distribuição Gla de uma série de protrombinas parcialmente carboxiladas devem dar uma ideia deste problema. O projecto # 4 é uma aplicação clínica directa dos nossos estudos imunoquímicos. Utilizando anticorpos específicos para a protrombina totalmente carboxilada (TNP) e a des-gama-carboxiprotrombina (APT), prosseguiremos um ensaio clínico para avaliar estes ensaios como um método melhorado de monitorização da terapêutica anticoagulante oral. Deficiência de vitamina K em recém-nascidos e suas mães serão estudadas, com a esperança de desenvolver abordagens racionais simples para eliminar a doença hemorrágica do recém-nascido. Além disso, o doseamento do antigénio KC4, específico para as plaquetas activadas, será explorado como método de detecção do estado pretrombótico. Estes básica e clínica, os projectos devem fazer contribuições para o entendimento deste grupo de proteínas, fornecem novas modalidades para o diagnóstico do prethrombotic estado e a vitamina K dificiency, e desenvolver ainda mais dados para justificar o uso da NPT ensaio sobre o tempo de protrombina reduzir significativamente a morbidade/mortalidade associados com a terapia de anticoagulação oral.