Estou a encontrar muitos detritos celulares nas nossas células descongeladas. Como se dirigiria?

Esta pergunta faz parte do seguinte Pergunte Ao Especialista sessão:

Cultura de Células Básicas – Evitando a contaminação, crescimento celular e passaging, e o armazenamento adequado de técnicas de

Respondidas por:

Timóteo Fawcett, Ph. D.

Empresa: Instituto Biotecnológico de Maryland

Título da função: Diretor

Resposta

eu suspeito que você está usando células aderentes. Você vê detritos em sua suspensão celular (de tripsinização) a partir do qual você congela as células. Se estiver a granular células de um grande volume contendo detritos nele, pode estar a granular os detritos e a concentrá-los eficazmente. Você faz uma mancha de viabilidade antes e depois de congelar. Se você vê escombros, mas muito alta viabilidade, então essa é provavelmente a origem dos escombros. Também tenho notado que o crescimento de fibroblastos tendem a produzir mais detritos ou pedaços de membranas do que outros tipos de células. Se estas são as razões para os destroços, então não se preocupe com isso. Uma maneira de remover alguns dos detritos é permitir que suas células para anexar, em seguida, lavá-los com uma solução equilibrada de sal ou meio para lavar alguns detritos, se isso o incomoda.

Este post é patrocinado pela Life Technologies.

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