comparação dos métodos SEC e CE-SDS para monitorizar a fragmentação das dobradiças nos anticorpos monoclonais IgG1

fragmentação dos anticorpos monoclonais é um atributo de qualidade crítica monitorizado rotineiramente para avaliar a pureza e integridade do produto, desde o desenvolvimento até à comercialização. A clivagem na região da dobradiça superior dos anticorpos monoclonais IgG1 é um padrão de fragmentação comum amplamente estudado pela cromatografia de exclusão dimensional (SEC). A electroforese capilar com dodecilsulfato de sódio (CE-SDS) é uma técnica bem estabelecida comumente utilizada para a monitorização de fragmentos de anticorpos, mas a sua comparabilidade com SEC na monitorização de fragmentos de dobradiças não foi estabelecida até agora. Reportamos uma estratégia de caracterização que estabelece a correlação entre fragmentos de região de dobradiças analisados pela SEC e CE-SDS. Anticorpos monoclonais com fragmentos de dobradiças elevados foram gerados em condições de tensão de baixo pH e analisados por SEC e CE-SDS. As massas dos fragmentos gerados foram determinadas por CL-MS. A migração electroforética dos produtos de fragmentação das dobradiças em CE-SDS foi determinada com base nos seus valores de massa. A avaliação comparativa de fragmentos por SEC e CE-SDS mostrou uma correlação semelhante com o tempo de incubação. Este estudo demonstra que a EC-SDS pode ser utilizada como uma técnica substituta para monitorizar fragmentos da região da dobradiça. Mais importante ainda, a combinação destas técnicas pode ser utilizada para obter uma compreensão abrangente das características relacionadas com fragmentos de produtos proteicos terapêuticos.

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