Clenbuterol é um agonista β2 prescrito em doentes asmáticos em alguns países. Com base nos seus efeitos anabólicos e lipolíticos observados em estudos sobre roedores e animais destinados à produção de alimentos, o clenbuterol é abusado por bodybuilders e atletas à procura de suavidade. A análise do clenbuterol urinário faz parte da análise de rotina do doping. No entanto, a coleta de amostras de urina é demorada e pode ser intimidante para os atletas. A mancha de sangue seca (DBS) parece atraente como uma matriz alternativa, mas a detecção do clenbuterol em seres humanos através da DBS não foi investigada. Este estudo avaliou se o clenbuterol podia ser detectado na DBS e na urina colhida em seis homens saudáveis após a ingestão oral de 80 µg de clenbuterol. As amostras de DBS e urina foram recolhidas às 0, 3, 8, 24 e 72 horas após a ingestão, com recolhas adicionais de urina nos dias 7 e 10. Utilizando CL-MS / MS, foi demonstrado que o clenbuterol podia ser detectado em todas as amostras de DBS durante 24 horas após a ingestão e com 50% de sensibilidade 3 dias após a ingestão. O método DBS foi 100% específico. A avaliação da estabilidade do analito mostrou que o clenbuterol é estável em DBS durante, pelo menos, 365 dias à temperatura ambiente, quando se utiliza dessecante e se evita a exposição à luz. Na urina, o clenbuterol foi detectável durante pelo menos 7-10 dias após a ingestão. Em alguns indivíduos, 24 horas após a administração, observaram-se concentrações de clenbuterol urinário inferiores a 5 ng/mL. Colectivamente, estes dados indicam que a DBS é adequada para a análise de controlo de dopagem de rotina do clenbuterol com uma janela de detecção de, pelo menos, 3 dias após a administração oral de 80 µg.