材料と方法
患者からの書面によるインフォームドコンセントを受けた後、妊娠中期（妊娠22-26週）または妊娠後期（妊娠34-38週）にクロニジンを受けた17人の妊婦の血漿中の経口投与クロニジンの定常状態薬物動態を調べた。 これらの女性の六つは、クロニジン濃度の測定のための配信時に母体および臍帯（動脈および静脈）血漿サンプルコレクションに参加しました。 妊娠期間は、最後の月経期間または初期の超音波デートに基づいていました。
主題選択。 この研究は、ワシントン大学の調査レビュー委員会によって承認されました。 被験者は、妊娠していて、18歳で、ヘマトクリット≥28％を有し、母体高血圧のために経口クロニジンを受けていた場合に参加する資格があった。
経口クロニジン療法は研究目的のために変更されなかった。 投与量は、分割用量で与えられた一日あたり0.15から0.30mgの範囲であった。 薬物動態学的研究の期間は、被験者の投与間隔に依存しており、これは6-12時間の範囲であった。3日間、研究の前に、同じ製造ロットからの経口クロニジン錠が提供された。 被験者は、研究カレンダーに各用量の時間を記録した。 被験者は午前8:00の30分以内に朝のクロニジン用量を服用した。 その後の用量は、予定された投与時間の30分以内に採取した。 薬物動態学的研究の朝に、被験者は、透明な液体を除いて、クロニジン投与前に5時間、投与後に1時間まで速くするように求められた。
サンプルコレクション。 連続プラズマ試料は、以下の時間に収集された: 0, 0.5, 1, 1.5, 2, 3, 4, 6, 8, 10, の投与間隔に対応するように切断するか、または切断して投与することを特徴とする。 クロニジン腎クリアランスとクレアチニンクリアランスを決定するために、一つの投与間隔にわたって尿を収集しました。 血漿サンプル、母体および臍帯（動脈および静脈）を、クロニジン濃度を定量するために送達時に収集した。 すべての試料は、試料分析まで-80℃で保存した。
クロニジン濃度。 血漿クロニジン濃度は、検証された液体クロマトグラフィー/質量分析（LC/MS）アッセイを用いて定量した。 要するに、250μ lの血漿試料を、500μ lの炭酸ナトリウム（0.1M）（pH=9.3）および3mlのヘプタン/イソアミルアルコール（98.5：1.5）中の500pgの内部標準（クロニジン-d4） 標準はとの空白血しょうをスパイクすることによって準備されました0, 12.5, 25, 50, 100, 200, 250, 375, 500, そして750pgのクロニジン。 試料を水平シェーカー上で室温で１ ５分間振盪した。 遠心分離後（１ ５ ０ ０ｇを１ ０分間）、試料をドライアイス上で凍結させ、有機層を清浄な培養管にデカントした。 2ミリリットルの硫酸アリコート(0.05M)を有機層に加え、再び15分間振盪した。 遠心分離後（１ ５ ０ ０ｇを１ ０分間）、試料をドライアイス上で凍結させ、有機層を廃棄した。 200μ lの29のアリコート。29％水酸化アンモニウム水溶液を3mlのヘプタン／イソアミルアルコール（98.5：1.5）と共に水層に加え、15分間振盪した。 遠心分離後（１ ５ ０ ０ｇを１ ０分間）、試料をドライアイス上で凍結させ、有機層を清浄な培養管にデカントした。 残渣を７ ５μ ｌのギ酸（１ ２ｍ Ｍ）／メタノール（６ ０：４ ０）で再構成し、その１ ０μ ｌをＬＣ／ＭＳシステム上に注入した。＜9926＞＜3096＞250μ lの尿サンプルを、250μ lのギ酸（12mM）および50ngの内部標準（クロニジン-d4）と混合した。 標準はとの空白の尿をスパイクすることによって準備されました0, 1.25, 2.5, 6.25, 12.5, 18.75, そして、それぞれ25ngのクロニジン。 ＜９ ９ ２ ６＞＜３ ０ ９ ６＞ＬＣ／ＭＳシステムは、バイナリポンプ、オートサンプラー、カラムコンパートメント、および質量分析計からなるＡｇｉｌｅｎｔ１ １ ０ ０ＭＳＤ（Ａｇｉｌｅｎｔ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ，Ｓａｎｔａ Ｃｌａｒａ，Ｃ Ａ）であった。＜９ ９ ２ ６＞＜３ ０ ９ ６＞ＬＣ／ＭＳシ 高速液体クロマトグラフィーカラムは、Phenomenex Synergi Polar RP80A、250mm×2であった。０ｍｍ，４μ ｍ（Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ，Ｔｏｒｒａｎｃｅ，Ｃ Ａ）。 移動相成分は、１ ２ｍ Ｍのギ酸（Ａ）およびメタノール（Ｂ）であり、初期流量は０． 最初の移動相は1分間維持され、血漿サンプルの場合は40％B、尿サンプルの場合は35％Bで構成されていた。 Bの割合は、血漿のための90％と尿のための60％に次の4分にわたって直線的に増加し、その後、尿および血漿のための0.3ml/分に直線的な流れの増加と1分 戻り勾配については、次いで、Ｂの割合を、１分にわたって直線的に４ ０％（血漿）または３ ５％（尿）に減少させ、次いで、これを一定に維持した。 流量を0.3ml/分で1分間維持し、次いで1分にわたって直線的に0.25ml/分に減少させ、次いで一定に維持した。 総実行時間は12.5分でした。 血しょうおよび尿の試金のために、質量分析計は肯定的なelectrosprayモードで作動し、各イオンのための289msecの滞留時間のm/z230（クロニジン）およびm/z236（クロニジン-d4）の選択的なイオン監視のために置かれた。
薬物動態パラメータ。 定常状態の薬物動態パラメータは、標準的なnoncompartmental技術を用いて決定した。 １回の投与間隔にわたる血しょうクロニジン濃度−時間曲線下の面積（Ａｕｃｔ）を線形台形則を用いて計算した。 見かけの経口クリアランス（ＣＬ／Ｆ）は、ＣＬ／Ｆ＝用量／Ａｕｃｔによって計算した。 クロニジン腎クリアランス（CLrenal）は、CLrenal=Ae,λ/AUCtによって計算され、ここで、Ae,λ=一つの投与間隔にわたって尿中に変化しない排泄されたクロニジンの量である。 クレアチニンクリアランスはＣｒｃｌ＝（Ｖｏｌｕｍｅｕｒｉｎｅ×Ｃｒｅａｔｉｎｉｎｅｕｒｉｎｅ）／（Ｃｒｅａｔｉｎｉｎｅｅｒｕｍ×λ）で計算した。 糸球体濾過率（ＧＦＲ）について調整されたクロニジン腎クリアランスは、ｇｆｒ＝Ｃｌｒｅｎａｌ−ｆｕ×Ｃｒｃｌについて調整されたＣｌｒｅｎａｌによって計算され、ここで、血漿中の非結合画分（ｆｕ）は、０．, 1979). 全ての被験者において、比較的短い投与間隔は、非妊娠の健康な成人において11.1±3.3および10.8±2.2hであることが以前に報告されているクロニジン半減期の正確な推定を可能にしなかった(Cunningham et al. ら、１ ９ ９ ４；Ｆｕｊｉｍｕｒａ ｅ ｔ ａ ｌ．, 1994).
妊娠中の私たちのクロニジン薬物動態パラメータは、健康な、非妊娠ボランティアで以前に公開されたパラメータと比較した（CL/F、Porchet et al. ら、１ ９ ９ ２；Ｃｕｎｎｉｎｇｈａｍ ｅ ｔ ａ ｌ． ら，１ ９ ９ ４）（Ｃｌｒｅｎａｌ，Ｆｕｊｉｍｕｒａ ｅ ｔ ａ ｌ．, 1994). クレアチニンクリアランスとクロニジン腎クリアランスとの相関を決定するために線形回帰を用いた。 対になっていない学生のtテストは、妊娠したグループと非妊娠グループを比較するために使用されました。 P値<0.05が有意であると考えられた。 すべての結果は平均±S.D.
として報告されます。