カトー-カッツスミア、リベリア | Anne Marie

研究

sthの有病率と強度に対するリンパフィラリア症の除去のためのイベルメクチンとアルベンダゾールを用いた大量薬物投与の効果を評価するために、リベリア北西部のFoya地区（Lofa郡）とHarper地区（Harper郡）の3年間の2つの異なる地域で糞便サンプルを収集した。リベリア南東部のメリーランド郡(10)。 我々は、重複したKato-Katz塗抹標本（41mgテンプレート）と顕微鏡（倍率×100）によって被験者あたりの単一の便サンプルを調べた。 ランダムに選択された標本のアリコートをFTAカード（GE Healthcare、Little Chalfont、UK）またはRNAlater（ThermoFisher、Waltham、MA、USA）に保存し、Qpcrによる分析のためにWashington University School of Medicine（St.Louis、MO、USA）に出荷しました。 二つの経験豊富な顕微鏡（L.G.、A.T.Momolu）は、両方の研究分野でKato-Katzスミアによってサンプルを調べた。 ＱＰＣＲによるＳＴＨの検出のために、本発明者らは、≧１ ０ ０ｍｇの便からＤＮＡを抽出し、Ｐｉｌｏｔｔｅらによって記載されたように試験した。 （５）Ｑｕａｎｔｓｔｕｄｉｏ６Ｆｌｅｘ Ｔｈｅｒｍｏｃｙｃｌｅｒ（Ａｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ，Ｃａｒｌｓｂａｄ，Ｃ Ａ，ＵＳＡ）およびＴａｑｍａｎ Ｆａｓｔ Ａｄｖａｎｃｅｄ Ｍａｓｔｅｒｍｉｘ（Ａｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ）を用いた。 順方向プライマー５’−ＴＧＴＧＧＧＡＧＴＣＴＴＴＧＧＴＴＧＴＴ−３’、逆方向プライマー５’−ＣＡＡＣＡＴＧＡＣＴＧＧＧＡＡＣＡＧＧＡ−３’、プローブ５’−ＡＧＧＴＴＣＡＧＧＴＧＧ／ＺＥＮ／ＧＴＧＴＧＴＴＡＣＧＡＡ−３ １ＡＢＫＦＱ−３’を使用した。

Foya地区からKato-Katz塗抹標本によって353便の便サンプルを試験したが、31（8.8％）はA陽性であった。 lumbricoidesの卵、鉤虫の卵のための231(65.4%)、T.trichiura様の卵のための27(7.6%)、およびS.mansoniの卵のための276(78.2%)。 我々は、加藤-カッツ塗抹標本によってハーパー地区から225サンプルをテストし、163（72.4％）A.lumbricoides卵、65（28.9％）鉤虫の卵、および51（22.7％）T.trichiura卵（表1）のために陽性であった。 ハーパー（80.5％-91.6％）からの試験片のためのKato-KatzとqPCR試験の結果との間に良い一致があったが、一般的にqPCRはより高い感度を有していた。 我々の結果は、以前に他の領域（3,11）からのサンプルで報告された結果と一致していた。 Foyaからのサンプルのための2つの診断テスト間の一致は77.3%から92.9%であったが、qPCRの感受性は予想外に低く、回虫およびTrichurisの伝染のために特に本当 Kato-KatzによるAscaris陽性でqPCRによる陰性のサンプルは卵数が低かったのに対し、Kato-KatzによるTrichuris陽性でqPCRによる陰性のサンプルはより多くの数を有し、7サンプルは>1,000バレル形の卵/gの便を含んでいた（表2）。 ＤＮＡ抽出とｑｐｃｒを繰り返し，Ｔに対して代替ｑｐｃｒを用いた。 トリチウラ（3）が、これらのテストは、顕微鏡とqPCRの結果との間の一致を改善しませんでした。

Kato-Katz陽性、qPCR陰性の便サンプルにT.trichiura卵が含まれているかどうかをさらに確認するために、rnalaterに保存された便サンプルの直接塗抹標本を顕微鏡検査（倍率×100および×400）によって調べた（図）。 QPCRによって陽性のサンプルには、典型的なT.trichiura形態を有する卵（6測定）が含まれていた; これらの卵は、52μ m（±2.4μ m）の平均（±SD）長さおよび25.5μ m（±1.3μ m）の幅を有していた。 対照的に、qPCR陰性サンプルには、平均（±SD）長さ51.8μ m（±1.5μ m）および幅32.7μ m（±2.1μ m）の卵（31測定）が含まれていた。 QPCR陰性サンプルはまた、あまり顕著なプラグと厚い、横紋シェル、Capillaria hepaticaの卵と一致する特徴を持っていた（syn。 Calodium hepaticum）およびいくつかの他のCapillaria種（Trichuridae）。 C.philippinensisまたはC.の卵 以前にヒトの便サンプルで観察されているaerophilaは、Lofa（12,13）で見つかった毛細管現象の卵よりも小さいか大きかった。 これらの卵の極性プラグはT.trichiuraの卵よりも目立たず、その形状が時には楕円形または円形であるため、特に少数の卵しか検出されなかった場合、低出力顕微鏡によってA.lumbricoidesの卵と混同することもあります(図)。

リベリアのLofa郡の人からの便サンプルで見つかった蠕虫の卵。 Ａ，Ｂ）Ｋａｔｏ-Ｋａｔｚ塗抹標本およびｑｐｃｒによるＴ．ｔｒｉｃｈｉｕｒａ陽性試料中のＴｒｉｃｈｕｒｉｓｔｒｉｃｈｉｕｒａの卵。 C-F)Capillaria sppの卵。 Kato-Katz塗抹標本ではT.trichiuraは陽性であったが、qPCRではT.trichiuraは陰性であった。 G）Capillaria sppの卵。 サンプルでは、Kato-KatzスミアによるAscari lumbricoidesは陽性であるが、qPCRによるA.lumbricoidesは陰性である。 Ｈ）Ｋａｔｏ-ＫａｔｚスミアおよびｑｐｃｒによるＡ．ｌｕｍｂｒｉｃｏｉｄｅｓ陽性試料中のＡ．ｌｕｍｂｒｉｃｏｉｄｅｓの卵。 スケールバーは20μ mを示します。 qPCR、定量的PCR。

Capillaridae亜科のメンバーは、やや異なるライフサイクルを持つ動物の寄生虫であり、ほとんどは人間に感染しません。 C.hepaticaとの偽感染が起こる;感染させた動物のレバーで消費されたので腰掛けで見つけられる卵はあります。 しかし、c.hepaticaの実際の感染症は、便中の卵の通過につながることはありません（9）。 C.philippinensisのような他の種は、便中に見られる卵による真の感染（および自己感染）を引き起こす。 ヒト毛管症はリベリアからは報告されておらず、サハラ以南のアフリカからは孤立した症例報告のみが発表されている（7-9）。 我々は、より良いFoyaで見つかったキャピラリア種を特徴付けるためにDNA配列決定を行った。 プライマー Kt875351.1（5′-CCCTAGTTGCGACTTTAAACGA-3’）とCapillaria18S1R（5′-TCCACCAACTAAGAACGGCC-3’）を使用して、我々は増幅し、形態学的にCapillaria sppとして同定された卵のみを含むT.trichiura qPCR陰性サンプルから288-bp部分の18s rDNAを配列することができた。 （GenBank加盟no. MG859285）。 ＤＮＡ断片は、ｃ．ｈｅｐａｔｉｃａのオルソログと１ ０ ０％同一であった（ａｃｃｅｓｓｉｏｎ ｎｏ． MF287972.1）、Aonchotheca putorii（C.putorii）（accession no. ２）、およびＰｅａｒｓｏｎｅｍａ ｐｌｉｃａ（Ｃ．ｐｌｉｃａ）（ａｃｃｅｓｓｉｏｎ ｎｏ． MF621034.1)、さまざまなライフサイクルおよびホスト種があるが、それはT.trichiuraのorthologと95%だけ同一であるCapillariaみみず種。

リベリア北西部のヒトに見られるCapillaria種のライフサイクルと医学的重要性は依然として解明されていない。 我々の研究では、いくつかの被験者は偽感染ではなく真の感染を示す可能性がある高い毛細管卵負荷を示した。 しかし、一時的な高い卵数は、偽感染（と人で報告されている7）。 Foyaのブッシュ肉の消費が一般的であるのに対し、C.ピリピネシスの伝達に必要な生または調理不足の魚の消費はまれである。