背景:慢性リンパ球性白血病(CLL)は、軽鎖制限、CD5+、CD19+、dim CD20、CD23+、CD43+、CD200+、CD10-およびCd79B-からなる古典的な免疫表現型を有する。 これは正常なB細胞および他のリンパ増殖性障害(Lpd)と区別されます。 これらの抗原を標的とする抗体は、B細胞LpdのワークアップのためにEuroflow consortiumによって開発された2つの8色フローサイトメトリパネルに含まれています。 これらの抗体を1つの10色のパネルに組み合わせることは、より費用対効果が高くなります。 さらに、新しいCLL療法は深い寛解を誘導することができ、白血球10,000個あたり1個以上の残存白血病細胞を有すると定義される最小残存疾患(MRD)を測定 European Research Initiative o n CLL(ERIC)によって確立されたMRD測定のための現在の国際標準化されたアプローチは、CD3、CD5、CD1 9、CD2 0、CD2 2、CD4 3、Cd7 9BおよびCD8 1を標的とする抗体 しかしながら、これらの抗体−蛍光色素の組み合わせは、Euroflow診断パネルによって使用されるものとは異なる。 従ってMRDのテストの実行を考慮する実験室は3つのパネル(2つの診断および1つのMRD)のための抗体を購入する必要があります。 我々は、Euroflow8色リンパ球スクリーニング管(LST)をCD200およびCD23を含むように拡張し、CLLを1つの10色管で0.01%の低いレベルで検出できるようにした。 この研究の目標は、この新しいパネルを実装する際の潜在的なコスト削減を決定し、それがMRDを検出するのに十分敏感であるかどうかを判断するこ
方法:2018年4月から2019年3月までに改良型10色LST管(凍結乾燥したMLST1)で分析したサンプル数を計算し、標準的な2管Euroflow法と比較して、この方法でlpdおよ また、液体抗体を使用して上記のパネル(MLST2)のバージョンを作成し、結果の一般化性を高め、CD38をCD43に置き換えて、MRD検出が改善されたかどうかを確認しました(下記のパネルを参照)。 MRDのテストのために、私達は白血病細胞のさまざまな集中で60MRDのサンプルを作り出すのに24の異なった患者からのCLLのサンプルを使用しました。 サンプルは、0.1%、0.01%および0.001%のおおよその濃度で正常白血球の懸濁液にCLL細胞をスパイクすることによって調製した。 各試料をアリコートし、3つのパネル:ERIC、MLST1およびMLST2で染色した。 データは、B D Facscanto IIまたはB D Facsaria Fusionを使用して取得し、B D Facsdivaソフトウェアを使用して分析した。 CLL細胞は、キーマーカーの差動発現に基づいて同定され、MRDは、CLL細胞/全白血球の数として計算された。 MRD陽性は≤0.01%と定義した。 パネル間の一致は、Bland−Altmanプロット法を用いて評価した。 …








