要約
我々は、個々の原始的なリンパ造血前駆細胞が骨髄系またはBリンパ系のいずれかに沿って分化する能力を有することを明確に実証するために、二段階のクローン培養システムを使用している。 高度に濃縮されたマウス骨髄細胞は、pokeweedマイトジェン刺激脾臓細胞条件培地、エリスロポエチン、鋼因子（SF）、およびインターロイキン（IL）7の存在下でマイクロ 単一細胞の四十から五パーセントは、複数の造血系統を発現する一次コロニーを形成した。 個々のコロニーからのアリコートは、SFとIL-7を含む二次メチルセルロース培養で複製されたとき、一次コロニーの41％がリンパ球コロニーを生じさせた。 リンパ球コロニーの細胞は、ｂｌａｓｔ様およびＢ２ ２ ０＋、ＳＩＧ−、Ｍａｃ−１−、Ｇｒ−１−、Ｌｙ−１−、Ｌ３Ｔ４−、Ｌｙ−２−およびＣＤ３−であった。 細胞の三十から70％がThy-1+であった。 アンチセンスＲＮＡプローブを用いたｉｎｓｉｔｕハイブリダイゼーションにより，ほとんどの細胞でｍｕ鎖ｍｒｎａを検出した。 単一細胞由来のリンパ球コロニーをプールし，ｓｃｉｄマウスに個別に注入すると，マウス血清中にドナー型Ｉｇｍが測定可能であり，脾臓にはドナー型Ｂ細胞が含まれていた。 その後、初代培養におけるpokeweedマイトジェン刺激ひ細胞条件培地を置き換える可能性がある成長因子を同定するために成長因子の初期スクリーニングを SFプラスIL-6、IL-11、または顆粒球コロニー刺激因子を含む二つの因子の組み合わせは、すべてのbリンパ電位の維持における初代培養に有効であった。 興味深いことに、IL-3は、初代培養物のリンパ電位をサポートするためにSFと相乗的に置き換えることも作用することもできませんでした。 我々の観察は、以前に骨髄コミットされていると考えられている多くの原始的な前駆細胞もBリンパ電位を持っていることを示しています。 この培養系はリンパ造血の初期段階を調節する機構の解明に有用であると考えられる。