タンパク質の分離を考えるとき、ゲルを使ってタンパク質を分離することを考えていますか？ 具体的にはSDS-PAGEを使用しますか？ あなたが”はい”と答えた場合、それは正当な理由です。 SDS-PAGEは蛋白質の分離でよいので分子生物学の実験室で遍在しています。 しかし、SDS-PAGEは多くの時間がかかり、労働集約的です。 それでは、あなたのツールボックスを展開し、タンパク質を分離する別の方法を見てみましょう：キャピラリゲル電気泳動。
キャピラリーゲル電気泳動（CGE）別名キャピラリーふるい電気泳動a.k.A.SDS-キャピラリーゲル電気泳動は、分離媒体で満たされたカラムを介してゲル中のタンパク質を分離する。
機器の要件
キャピラリーゲル電気泳動では、より身近なSDS–PAGEとは異なり、電界の引っ張り力によって、分析物（研究したいタンパク質）が電解液を通って毛細血管を通って移動します。 CGEを行うためには必要とする:マトリックス、毛管コラム、オンコラムの探知器、データ出力および処理装置および高圧電源をふるうサンプルガラスびん、
簡単なプロトコル
CGE実験では、サンプルは元のバイアルから始まり、目的地のバイアルに向かいます。 手順は以下の通りです:
ステップ1:供給元と供給先バイアル、およびそれらを接続するキャピラリーは、電解液で満たされ、サンプルはキャピラリーに導入されます。
ステップ2：電界が印加されると、分析物は供給元バイアル側から供給先バイアル側に移行する。
ステップ3：カラム上の検出器（当然のことながら）は、カラム上の検出を可能にする。 検出器は、コンピュータなどのデータ出力および処理装置にデータを送信する。
ステップ4：このデータは、電気泳動図として表示されます。 あなたのanalytesはさまざまな保持時間のピークとして読まれる。
これがどのように機能するかの詳細については、UC Davisの有用な資料を参照してください。
マトリックスの詳細
ふるいマトリックスは、架橋ポリアクリルアミド、デキストラン、ポリ（エチレングリコールまたはエチレンオキシド）を含む多くの重合材料で構成することができる。 あなたのコラムは通常取り替え可能なふるうポリマーからなされる。 あなた自身のコラムを作るか、またはそれらを買えばそれはあなたまでそれからある。 Beckman Coulter、Agilent Tech、およびBio-Rad Laboratoriesはふるい分けキットを販売していますが、CGE機器も使用する必要があることを知っています。
なぜあなたはCGEを使用する必要があります
今、あなたはCGEが何であるかについて聞いた、なぜあなたはそれを使用する必要がありますか？
- 操作時間が短くなっています。 Cgeを動かすことは平板のゲルの電気泳動より完了する10-100倍のより少ない時間を取ります。
- CGE実験では、SDS-PAGE実験よりもステップが少なくなります。 これは，ＣＧＥ実験の最終結果が装置に接続されたコンピュータによって与えられるためである。
- CGEは、従来のSDS-PAGEよりも小さなタンパク質にも適しています。
- CGEでリアルタイムでタンパク質を分析できます。
- CGE装置は繰り返し使用することができます、無限のゲルを作る必要はありません。
- 最後に、プロセスの多くは自動化されています。 あなたのサンプルを追加した後、あなたは完了です！ これはゲルが動くとすぐゲルをするか、または特別な検出装置に持って来るようにプロセスを指示する必要がないことを意味します。
なぜCGEを使用すべきではないのですか
まあ、真実は言われますCGEは十年以上にわたって現在の形で存在しており、多くの技術的進歩が行われていますが、CGEはまだ再現性の問題に苦しんでいます。 別の問題は、CGE分離が直列に実行されることです。 これはCGEと便利に車線を比較できないことを意味する。 最後に、2Dゲルに関しては、CGEは従来の2D分離と競合することはできません。
要約すると、一部の研究者はcge技術の使用を誇らしげに叫んでいますが、それにはまだ多くの問題があります。 しかし、まだCGEを却下しないでください！ この分野の最も最近の押しは高速蛋白質の分析のための多くの約束を示すmicrochip CGEである。 次にタンパク質の分離について考えるときは、CGEを忘れないでください。
CGEを試したことがありますか？ SDS-PAGEと比較してどのように気に入っていますか？