Il ceppo casper di zebrafish è ampiamente utilizzato in studi che vanno dal cancro alle neuroscienze. casper offre il vantaggio della trasparenza relativa in tutta l’età adulta, rendendola particolarmente utile per l’imaging in vivo mediante epifluorescenza, confocale e microscopia a foglio leggero. casper è stato sviluppato dall’allevamento selettivo di due mutanti pigmentati recessivi precedentemente descritti: 1) madreperla, che ospita una mutazione inattivante del gene mitfa, rendendo il pesce privo di melanociti pigmentati; e 2) roy orbison, un mutante con una causa genetica finora non identificata che manca di iridofori riflettenti. Per chiarire la natura molecolare della mutazione di roy orbison, in modo tale che possa informare gli studi usando casper, abbiamo intrapreso uno sforzo per clonare posizionalmente la mutazione di roy orbison. Troviamo che roy orbison è causato da un difetto intronico nel gene mpv17, che codifica una proteina di membrana mitocondriale interna che è stata implicata nella sindrome da deplezione del DNA mitocondriale umano. La mutazione di roy orbison è fenotipicamente e molecolarmente notevolmente simile ad un altro mutante iridoforo zebrafish chiamato trasparente. Usando crispant indotti da Cas9 e mutanti germinali con un frame di lettura aperto mpv17 interrotto, mostriamo negli embrioni trans-eterozigoti che i nuovi alleli frameshift di mpv17, roy orbison e transparent non riescono a completarsi a vicenda. Il nostro lavoro fornisce prove genetiche che sia roy orbison che transparent influenzano il locus mpv17 da una lesione genetica simile se non identica. L’identificazione dei mutanti mpv17 consentirà ulteriori lavori per sondare la relazione tra funzione mitocondriale e pigmentazione, che fino ad oggi ha ricevuto poca attenzione.