Sto trovando un sacco di detriti cellulari nelle nostre cellule scongelate. Come ti rivolgeresti?

Questa domanda è parte dei seguenti Chiedi agli Esperti sessione:

Cella Cultura di base – Evitando la contaminazione, la crescita cellulare e seminando, e la loro corretta conservazione tecniche

Rispose:

Timothy Fawcett, Ph. D.

Azienda: Istituto di Biotecnologia del Maryland

Titolo di Lavoro: Direttore

Risposta

ho il sospetto che si sta utilizzando cellule aderenti. Vedi detriti nella tua sospensione cellulare (dalla tripsinizzazione) da cui congeli le cellule. Se si sono pelleting cellule da un grande volume contenente detriti in esso si può essere pelleting i detriti e efficacemente concentrandolo. Fai una macchia di vitalità prima e dopo il congelamento. Se vedete detriti ma molto alta vitalità allora che è probabilmente l’origine dei detriti. Inoltre ho notato che i fibroblasti in crescita tendono a produrre più detriti o frammenti di membrane rispetto ad altri tipi di cellule. Se questi sono motivi per i detriti poi non ti preoccupare. Un modo per rimuovere alcuni dei detriti è quello di consentire alle cellule di attaccare poi lavarli con una soluzione salina equilibrata o media per lavare via alcuni detriti se ti dà fastidio.

Questo post è sponsorizzato da Life Technologies.

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