Confronto dei SEC e CE-SDS metodi per il monitoraggio cerniera frammentazione IgG1 anticorpi monoclonali

Frammentazione degli anticorpi monoclonali è un critico qualità attributo il monitoraggio di routine per valutare la purezza e l’integrità del prodotto, dallo sviluppo alla commercializzazione. La scissione nella regione superiore della cerniera degli anticorpi monoclonali I1 è un modello comune di frammentazione ampiamente studiato dalla cromatografia di esclusione di dimensione (SEC). L’elettroforesi capillare con dodecilsolfato di sodio (CE-SDS) è una tecnica ben consolidata comunemente utilizzata per il monitoraggio dei frammenti di anticorpi, ma la sua comparabilità con SEC nel monitoraggio dei frammenti di cerniera non è stata stabilita fino ad ora. Riportiamo una strategia di caratterizzazione che stabilisce la correlazione tra frammenti di regione cerniera analizzati da SEC e CE-SDS. Anticorpi monoclonali con frammenti di cerniera elevati sono stati generati in condizioni di stress a basso pH e analizzati da SEC e CE-SDS. Le masse dei frammenti generati sono state determinate da LC-MS. La migrazione elettroforetica dei prodotti di frammentazione delle cerniere in CE-SDS è stata determinata in base ai loro valori di massa. La valutazione comparativa dei frammenti da parte di SEC e CE-SDS ha mostrato una correlazione simile con il tempo di incubazione. Questo studio dimostra che CE-SDS può essere impiegato come tecnica surrogata per SEC per il monitoraggio dei frammenti della regione della cerniera. Soprattutto, la combinazione di queste tecniche può essere utilizzata per ottenere una comprensione completa delle caratteristiche correlate ai frammenti dei prodotti proteici terapeutici.

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