Le proteine adattatori come AP-2, AP180 e CALM (Clatrin-assembly lymphoid myeloid leukaemia protein), che si accumulano all’interno del doppio strato lipidico, sono responsabili del reclutamento del trimero di Clatrina a forma di triskelione. Questo trimero non interagisce direttamente con la membrana, ma forma invece una struttura reticolare di rinforzo che funge da stampo in cui si possono sviluppare vescicole di membrana. La sua influenza sulla curvatura della membrana avviene tramite le proteine dell’adattatore che sono ancorate al doppio strato lipidico. È importante sottolineare che le proteine dell’adattatore partecipano direttamente anche alla flessione della membrana e alla determinazione della dimensione della vescicola .
Proteine AP2 e BAR-domain:
La formazione di pozzi rivestiti di clatrina (CCPs) richiede varie proteine leganti l’actina come quelle appartenenti alla superfamiglia BAR (Bin/Amphiphysin/Rvs). Questi includono amphiphysin ed endophilin in mammiferi e Rvs161p e Rvs167p in lievito . Il ruolo di queste proteine della BARRA è nella deformazione della membrana, essenzialmente promuovendo la sua tubulazione. Legandosi alle membrane caricate negativamente, si ottiene una curvatura positiva che segue la topologia concava del dimero α-elica anfipatico della proteina . Le proteine F-BAR, che appartengono a una sottofamiglia della superfamiglia BAR, possiedono un dominio più ampio che è anche di forma concava, ma meno profondo nella sua curvatura. Queste proteine sono proposte per generare vescicole con un raggio più grande rispetto a quelle proteine con possesso di un dominio BAR . In entrambi i casi le proteine possono agire come sensori di curvatura che riformano la membrana in una forma a cui possono facilmente legarsi . Nel caso dell’endocitosi mediata dalla clatrina, si ritiene che le proteine F-BAR arrivino al sito di formazione del pozzo rivestito di clatrina, prima delle proteine BAR, e come tali possono anche essere coinvolte nella nucleazione del PCC .
Mentre il BAR le proteine di dominio facilitare la perforazione della membrana, l’adattatore di proteine, tra cui AP-2 o coloro che possiedono la epsin N-terminale di omologia (SETTIMO) dominio come epsin , o l’AP-180 N-terminale di omologia (ANTH) domini come AP-180 continuano a reclutare la clatrina triskelion e altre proteine necessarie per le successive fasi del rivestite di clatrina vescicola (CCV) di formazione. Entrambi i domini ENTH e ANTH sono altamente omologhi e legano i fosfolipidi inositolo; in particolare PIP2 . Sebbene entrambe le sottoclassi proteiche stimolino la formazione di una rete di clatrina triskelia, solo le proteine che possiedono il dominio ENTH influenzano la curvatura della membrana, con il reticolo di clatrina prodotto dalla stimolazione AP-180 che ha dimostrato di rimanere piatto . Si ritiene che questa influenza dai domini ENTH derivi dalla formazione di un’ulteriore α –elica ‘α0’ tra il dominio ENTH e la molecola PIP . È stato proposto che l’inserimento di questo dominio tra le teste lipidiche del doppio strato di membrana possa essere sufficiente per alterare la curvatura della membrana da sola; tuttavia può anche essere una risposta sinergica con l’assemblea di clathrin .