jämförelse av SEC-och CE-SDS-metoder för övervakning av gångjärnsfragmentering i IgG1 monoklonala antikroppar

fragmentering av monoklonala antikroppar är ett kritiskt kvalitetsattribut som rutinmässigt övervakas för att bedöma produktens renhet och integritet från utveckling till kommersialisering. Klyvning i det övre gångjärnsområdet av IgG1 monoklonala antikroppar är ett vanligt fragmenteringsmönster som studeras allmänt av storlek uteslutningskromatografi (SEC). Kapillärelektrofores med natriumdodecylsulfat (CE-SDS) är en väletablerad teknik som vanligtvis används för övervakning av antikroppsfragment, men dess jämförbarhet med SEC vid övervakning av gångjärnsfragment har inte fastställts förrän nu. Vi rapporterar en karakteriseringsstrategi som fastställer korrelationen mellan gångjärnsregionfragment analyserade av SEC och CE-SDS. Monoklonala antikroppar med förhöjda gångjärnsfragment genererades under låga pH-stressförhållanden och analyserades av SEC och CE-SDS. Massorna av de genererade fragmenten bestämdes av LC-MS. Elektroforetisk migration av gångjärnsfragmenteringsprodukterna i CE-SDS bestämdes baserat på deras massvärden. Jämförande bedömning av fragment av SEC och CE-SDS visade liknande korrelation med inkubationstid. Denna studie visar att CE-SDS kan användas som en surrogatteknik för att SEC för övervakning av gångjärnsregionfragment. Viktigast, kombination av dessa tekniker kan användas för att få omfattande förståelse av fragmentrelaterade egenskaper hos terapeutiska proteinprodukter.

Lämna ett svar

Din e-postadress kommer inte publiceras.