Ceriodaphnia dubia odlades i fyra rekonstituerade vattenformuleringar med hårdhet och alkalinitetskoncentrationer som sträcker sig från mjukt till måttligt hårt vatten som krävs av helutflödestoxicitet (våt) testmetoder för odling av testorganismer. Effekterna av dessa odlingsformuleringar ensamma och i kombination med två nivåer av Cl-, SO4(2 -) och HCO3 – på reproduktion av C. dubia utvärderades med standardtestet med tre kullar. Reproduktionen minskade signifikant när testvatten hade lägre hårdhet än odlingsvatten. Reproduktionen var emellertid inte signifikant annorlunda när djur som odlades i vatten med låg hårdhet utsattes för måttligt hårt vatten. Hårdheten hos kulturvattnet påverkade inte signifikant C. dubias känslighet för de tre anjonerna. Omvänt minskade ökad hårdhet i testvatten signifikant toxiciteterna hos Cl-och SO4(2 -), med HCO3-toxicitet enligt samma mönster. Alkalinitet uppvisade ingen konsekvent effekt på CL-och SO4(2 -) toxicitet. Den fysiologiska stressen att placera djur odlade i måttligt hårt vatten i mjukare testvatten kan bidra till marginella misslyckanden av annars icke-toxiska avloppsvatten. Standard våt protokollet bör revideras för att möjliggöra odling av C. dubia under lägre hårdhetsförhållanden för att bättre representera lokala ytvatten Kemi.