Cholinacetyltransferas (ChAT) – en användbar immunhistokemisk markör för morfologiska studier av neuroner

Cholinacetyltransferas (ChAT) är enzymet som är ansvarigt för biosyntesen av neurotransmittorn acetylkolin. Majoriteten av acetylkolin syntetiseras lokalt vid nervterminaler där ChAT katalyserar överföringen av en acetylgrupp från acetylkoenzym A till kolin, en process som äger rum i ett enda steg. ChAT uttrycks av kolinerga neuroner i centrala nervsystemet (CNS) och perifera nervsystemet (PNS) (4), som distribueras i många olika regioner i hjärnan, ryggraden och näthinnan och deltar i inlärning, minne, rörelse och syn (2,4).

Chattuttryck i ryggmärgsneuroner i råtta, IHC immunohistokemi fritt flytande: Kolinacetyltransferas/Chattantikropp – IHC på råtta ryggmärgen med Kaninantikropp mot råtta, muschatt (Kolin O-acetyltransferas): hela serum vid 1: 2000 utspädning. Pre-absorption av antikroppen med den immuniserande peptiden avskaffar fullständigt immunfärgning (ej visad).

Läs mer om neuronala markörer

ChAT-antikroppsfärgning används ofta i morfologiska studier av kolinerga cellpopulationer. I däggdjurshinnan uttrycks till exempel Chatt av delmängder av både amakrin-och ganglionceller (2). Dessa ChAT-positiva neuronala populationer kan identifieras med hjälp av anti-ChAT antikroppar i samband med immunhistokemiska (IHC) analyser. När det utförs i näthinnan producerar ChAT IHC ett karakteristiskt dubbelbandat färgningsmönster i det inre plexiformskiktet där kolinerga amakrin-och ganglioncelldendriter bildar två distinkta synaptiska skikt (2). En av Novus ChAT-antikropparna har använts för att kvantifiera kolinerg cellöverlevnad i däggdjurshinnan efter proteinkinashämning i mussjukdomsmodeller (1). Novus ChAT-antikroppar har också använts i ett antal cellodlingssystem för att bedöma differentiering och överlevnad av kolinerga neuroner efter olika manipuleringar. Till exempel har Novus-antikroppen (NBP1-30052) använts för att identifiera differentierade kolinerga neuroner i cellstudier som syftar till att definiera ett kulturbaserat experimentellt system som inte är beroende av primära neuroner (3). Medan en annan Novus Anti-ChAT-antikropp (NB110-89724) användes för att kvalitativt bedöma överlevnaden av kolinerga neuroner i ryggmärgsexplanter (5).

Novus Biologicals erbjuder Chattreagenser för dina forskningsbehov inklusive:

  • chatta antikroppar
  • Chatta lysater
  • Chatta proteiner
  • Chatta RNAi

PMID:

  1. 21498608
  2. 9786999
  3. 23095258
  4. 10594838
  5. 23674184

  • Burugula, B., Ganesh, Bs och Chintala, S. K. (2011). Curcumin dämpar staurosporinmedierad död hos retinala ganglionceller. Investera Oftalmol Vis Sci 52, 4263-4273.
  • Jeon, CJ, Strettoi, E. och Masland, R. H. (1998). De viktigaste cellpopulationerna i musens näthinna. J Neurosci 18, 8936-8946.
  • Liu, J., Tu, H., Zhang, D., Zheng, H. och Li, yl (2012). Spänningsstyrd natriumkanaluttryck och aktionspotentialgenerering i differentierade ng108-15-celler. BMC Neurosci 13, 129.
  • Oda, Y. (1999). Kolinacetyltransferas: struktur, distribution och patologiska förändringar i centrala nervsystemet. Pathol Int 49, 921-937.
  • Schizas, N., Rojas, R., Kootala, S., Andersson, B., Pettersson, J., Hilborn, J., och Hailer, NP (2014). Hyaluronsyrabaserad hydrogel förbättrar neuronal överlevnad i ryggmärgsskivkulturer från postnatala möss. J Biomater Appl 28, 825-836.

Lämna ett svar

Din e-postadress kommer inte publiceras.