scrisori de Oncologie

Introducere

cancerul pulmonar este cel mai frecvent cancer după cancerul de sân și de colon, la nivel mondial (1). Incidența cancerului pulmonar este similară cu ratele de mortalitate pentru această boală din cauza fatalității ridicate a cancerului pulmonar. Potrivit datelor disponibile de la Agenția Internațională pentru cercetare onCancer, decesele anuale de cancer pulmonar sunt așteptate să crească la aproximativ 10 milioane până în 2030 (2).Cel mai frecvent tip de cancer pulmonar este histologicadenocarcinom, care reprezintă aproape 50% din toate cancerele pulmonare(3).

histologic există două tipuri principale de cancer pulmonar, carcinom pulmonar cu celule mici (SCLC) și non-SCLC (NSCLC). SCLCaccounts pentru approximatley 20% din toate cazurile de cancer pulmonar, în timp ce contulensclc pentru aproape 80% din cazurile de cancer pulmonar (4). Există trei subtipuri histologice de NSCLC: i) carcinom cu celule scuamoase (SCC), ii) adenocarcinom, andiii) carcinom pulmonar cu celule mari, fiecare reprezentând 25, 40 și, respectiv, 15% din totalul cazurilor NSCLC (5).

în ciuda recunoașterii cancerului pulmonar ca fiind unul dintre cele mai agresive tipuri de cancer, există progrese lente în rezultatele clinice, chiar dacă sunt disponibile un număr mare de medicamente noi. Cele mai importante probleme pentru acest dezavantaj în manipularea clinică a cancerului pulmonar este indisponibilitatea markerilor tumorali serici validați, care sunt utili atât în diagnosticul cât și înprognoza bolii (6). Multe tipuri de malignitate provoacă revărsări pleurale, iar cancerele care metastazează cel mai frecvent la pleură sunt carcinoamele pulmonare și mamare și limfoamele. Chiar dacă examinarea citologică a pleuralefuziei este considerată o abordare standard pentru diagnostic, sensibilitatea acesteia este de obicei de numai 50-70% (7,8).

un număr de markeri tumorali, inclusiv antigenul carcinoembrionar (CEA), antigenul carbohidrat 125 (CA125) și CYFRA21-1,un fragment de citokeratină 19 (CK19), au fost evaluate ca markeri tumorali mai buni și mai exacți în ser, precum și în lichidul pleural în multe studii (7,8). De asemenea, s-a observat că o combinație de doi sau mai mulți markeri este mai puternică decât un singur marker. Cu toate acestea, puterea reală diagnosticpredictibilitatea acestor markeri nu a fost evaluată în multe dintre aceste studii, deoarece prezența citologică a celulelor tumorale a fostdetectat în revărsările pleurale ale pacienților (9-11). Mulți dintre markerii menționați mai sus s-au dovedit a fi crescuți în pleuralefuziile pacienților cu cancer comparativ cu pleuralefuziile benigne (7). Celulele cancerului pulmonar uman derivate din efuziune pleurală s-au dovedit a fi mai invazive și metastatice decât celulele canceroase din leziunile primare și această diferență poate fi legată de tranziția epitelio-mezenchimală(EMT).

EMT, care de obicei joacă un rol important în morfogeneza țesutului embrionar și în fibroza post-leziune(12,13), este reactivat necorespunzător în timpul hrănirii în anumite condiții patologice, cum ar fi cancerul și contribuie la metastazele tumorale (13). Se știe că EMT mediază multealterațiile și modulația fenotipului rezultat în arhitectura tumorală. EMT se caracterizează prin perturbareaaderența intercelulară, motilitatea crescută a celulelor tumorale, scăzutăsusceptibilitatea la anoikis și apoptoză și în eliberarea celulelordin țesutul epitelial (9-11). Celulele tumorale eliberate, care sunt rezistente la anoikis, presupun fenotip mezenchimal care poate fi supus migrației, invaziei și diseminării, toate contribuind la progresia metastatică. În multe cazuri, gradulde EMT a celulelor canceroase determină severitatea cancerului (14). EMT a fost, de asemenea, demonstrat a fiimplicat în rezistența la anoikis, care este critică îninhibarea metastazelor cancerului în diferite tumori solide (15).

Citokeratinele (CKs) sunt markeri tumorali comuni și suntprincipalele elemente structurale ale citoscheletului în epiteliicelule și, pe baza proprietăților structurale CKs, există 20subtipuri. Dintre acestea, CK19 este un CK solubil și acid de tip I și este exprimat în mucoasa epitelială a arborelui bronșic și este cunoscut a fi supraexprimat în țesuturile cancerului pulmonar (16). Există o degradare crescută a CK19 încelulele epiteliale transformate neoplastic datorită creșterii activității caspazei-3, iar fragmentele proteolitice,în special CYFRA21-1, sunt eliberate în sânge. CK19 este considerat a fi strâns asociat cu cancerul pulmonar; cu toate acestea, unele studii au raportat că expresia ck19 este negativă în anumite tipuri de cancer pulmonar (9-11). Expresia ck19 în unele linii celulare de cancer pulmonar a fost redusă ca urmare a factorului de creștere de transformare (TGF)-EMT indusă de impl (17). Nivelurile circulante ale fragmentelor CK19, inclusiv CYFRA21 – 1, reflectă probabil amploarea formării citoscheletului în celulele canceroase și se pot asocia, de asemenea, cu gradul de diferențiere tumorală față de epiteliul scuamos (16).

în studiul de față, au fost utilizate probe tumorale de la 111 pacienți cu cancer pulmonar și a fost investigată incidența ck19-expessers negativi în diferite tipuri de cancer pulmonar, precum și dacă inducerea EMT în celulele de focalizare primară influențează expresia CK19. De asemenea, am examinat dacăcancerele pulmonare negative kk19 au fost mai invazive și metastatice.

pacienți și metode

General

toți cei 111 pacienți au fost selectați în conformitate cu stadializarea TNM a 7-a Versiune, descrisă de Comitetul mixt american onCancer și Uniunea pentru controlul internațional al cancerului în 2007 (9-11). Pacienții cu cancer pulmonar diagnosticați cu diferite tipuri de cancer pulmonar în stadiul IV și tratați cu inhibitori de tirozin kinază sau platină(75 mg/m2) și docetaxel (75 mg/m2) au fost recrutați în studiul de față. Pacienții au fost internați la Spitalul popular Subei în perioada ianuarie 2013-decembrie 2014.

studiul a fost aprobat de Comitetul de etică al Spitalului popular Subei. A fost obținut consimțământul informat scrisde la fiecare participant. Acest studiu este în conformitate cu codul de etică al Asociației Medicale Mondiale (Declarația de la Helsinki, 1964).Cei 111 pacienți au cuprins 90 de bărbați (44-82 ani) și 21 de femei(40-75 ani). Caracteristicile pacientului sunt prezentate în tabelul I. au fost identificate în total 56 de cazuri de adenocarcinom, 21scc, 32 SCLC și 2 cazuri de carcinom adenosquamos.Pacienții înrolați au îndeplinit următoarele criterii: Karnofskyscore cu o speranță de viață >60 de ani de > 3 luni, fără boli ale sistemului imunitar, electrocardiogramă normală, funcție normală a ficatului și rinichiului și fără tratament antitumoral în decurs de o lună înainte de studiu. Cazurile tratate cu inhibitori de tirozin kinază au fost de tip adenocarcinom.

probele de sânge au fost colectate de la toți paciențiiși serurile au fost separate și înghețate până la analiza ulterioară.Probele de efuziune pleurală au fost colectate urmând procedurile aprobate și au fost examinate citologic și prelucrate pentru imunohistochimie.

imunohistochimie

probele de țesut tumoral (focare primare) au fost procesatepentru imunohistochimie pentru detectarea CK19, e-cadherin șivimentin. Probele de țesut de focalizare primară au fost fixate în formalină șiînglobate în blocuri de parafină. Pentru analiza imunohistochimică s-au utilizat secțiuni Multiple (4 mm) din fiecare eșantion. Probele au fostcolorate cu hematoxilină și eozină. Anticorpii Anti-CK19, anti-e-cadherin și anti-vimentin au fost achiziționați de la TIYO BiotechnologyCorporation (Shanghai, China). Anticorp policlonal anti-ck19 iepure (Nr.catalog. Z98123) a fost utilizat la o diluție de 1:50;anti-e-cadherin ck19 policlonal de iepure (Nr.catalog. Z86603) anticorpul a fost utilizat la o diluție de 1:100; și anticorp policlonal anti-vimentin CK19rabbit (catalog nr. Z40651) a fost utilizat la o adiluție de 1:500, urmată de incubare cu anti-IgG conjugat cu horseradishperoxidase (Beijing Cellchip Biotechnology Co., Ltd., Beijing, China) la o diluție de 1:100. Dezvoltarea culorii a fostefectuată folosind substrat de 3,3 ‘ – diaminobenzidină.

apariția particulelor tan în membrana celulară și citoplasma a fost considerată pozitivă pentru CKl9, e-cadherin și, respectiv, vimentin. Rezultatele imunohistochimice au fost confirmatede doi patologi folosind o metodă dublu-orb.

analize Marker

un analizor automat de chemiluminescență Cobas Roche E601 (Roche Diagnostics, Basel, Elveția) a fost utilizat pentru a măsura CEA serică, CA125, enolază specifică neuronilor (NSE),fetoproteină (AFP) și CYFRA21-1 în serurile și pleuralefuziile pacienților. CYFRA21-1 >3,3 ng/ml, NSE >15,2 ng/ml, CEA >5,0 ng/ml, CA125 >35,0 ng/ml și AFP >7 ng/ml au fost luate în considerarevalori pozitive.

EMT indusă de TGF-XV1 în celulele tumorale pulmonare

celulele tumorale au fost izolate din țesuturile de focalizare primară obținute de la pacienți. Celulele primare au fost izolate din țesutul tumoral primar și revărsatul pleural de la același pacient și au fost cultivate. Celulele au fost izolate în două etape: I) centrifugarea prin mediu de separare a limfocitelor (specificgravity de 1.077), urmată de cultivarea în RPMI-1640 mediu care conține 20% ser fetal bovin (Beijing Lablead BiotechnologyCorporation, Beijing, China) timp de 2 zile. ii) ulterior 40/20% Percoll (Beijing Solarbio Science & Technology Co., Ltd., Beijing, China) a fost folosit ca centrifugare în a doua etapă pentrusepararea celulelor. Celulele colectate au fost cultivate din nou în mediul de cultură rpmi-1640 conținând 20% ser fetal bovin și incubate la 37 de centi c Sub 5% CO2 atmosferă până la 70-80% confluență. Celulele au fost tratate cu TGF-XV1 (achiziționate de la Shanghai Kexing Biotech Co., Ltd., Shanghai, China) la 5 ng/ml pentru24 h. celulele au fost apoi spălate și prelucrate. Analiza imunohistochimică pentru e-cadherin, CK19 și vimentin, a fost efectuată înainte de și după tratamentul cu TGF-XV1, așa cum este descris mai sus. Prezența sau absența acestor markeri a fost marcată ca pozitivă sau,respectiv, negativă.

analiza statistică

P< 0,05 a fost considerată statistic semnificativă.

rezultate

caracteristicile pacientului

cei 111 pacienți au cuprins 90 de bărbați și 21 de femei, cu o distribuție similară a vârstei (40-80 de ani). Pacienții au fost diagnosticați cu cancer pulmonar în stadiul IV. Din punct de vedere histologic, majoritatea cazurilor au fost de tip adenocarcinom, urmate de SCLC și SCC, atât la pacienții de sex masculin, cât și la cei de sex feminin (TableI). Au existat doar două cazuri de carcinom adenosquamos înacest eșantion de pacient. La majoritatea pacienților li s – a administrat chimioterapie pe bază de platină și docetaxel, în timp ce la cei cu mutări ale funcției receptorilor factorului de creștere epidermică li s-a administrat terapie cu inhibitor de tirozin kinază (TKI) (Gefitinib). Doar un număr mic de pacienți (5 bărbați și 1 femeie)nu au primit aceste terapii din cauza constrângerilor financiare.

histologia țesutului tumoral primar

țesuturile tumorale de la 111 pacienți au fost examinateimunohistochimic pentru expresia CK19. În timp ce în anumite tipuri de cancer pulmonar s-a observat o creștere a expresiei Ck19, o pierdere a CK19 este probabil asociată cu EMT (17). În studiul de față, expresia CK19 a fost absentă în multe tumori SCLC,>50% la bărbați și 100% la femei. Ca atare, expresia CK19 a fostrelativ scăzută în tumorile SCLC în comparație cu alte cancere pulmonare (Fig. 1). Dinadenocarcinoame, aproximativ 31% din tumorile de la pacienții de sex masculinau fost negative pentru CK19, care a fost mult mai mic pentru femei (7%).În general, țesuturile tumorale SCLC au prezentat o probabilitate mai mare de Emtcaracteristici (tabelul I). A existat o reducere aparentă a proporției tumorilor primare ck19-negative, precum și a celulelor de efuziune pleurală în urma Tkiterapiei, în comparație cu tumorile netratate sau tratate cu chimioterapie, în toate tipurile de cancer pulmonar (Fig. 2).

nivelurile CYFRA21-1

seric și pleural efuziune nivelurile CYFRA21-1 sunt considerate markeri importanți ai malignității pentru multe tipuri de cancer, în special pentru cancerul pulmonar. Deoarece CYFRA21-1 este frică de CK19, am examinat nivelurile de efuziune serică și pleurală cyfra21-1 în funcție de pierderea expresiei CK19 în celulele de efuziune pleurală. Rezultatele au arătat că atunci când CK19 a fost exprimat puternic în focalizarea primară și în celulele de efuziune pleurală,nivelurile CYFRA21-1 au fost ridicate și când expresia CK19 a fost pierdută în tumorile primare și/sau în celulele de efuziune pleurală, nivelurile CYFRA21-1 au scăzut semnificativ în toate tipurile de cancer (Fig. 3). În plus, nivelurile de CYFRA21-1 au fost mult mai mari în efuziunea serică și pleurală a pacienților cu tumori SCC ck19-pozitive în comparație cu alte tipuri de tumori(Fig. 2). Nivelurile ridicate de cyfra21-1 în serul pacientului SCC și revărsatul pleural reflectă probabil prezența puternică a CK19 în tumorile pozitive (Fig. 1). Rezultatele au sugerat, de asemenea, că nivelurile de ser CYFRA21-1 au fost crescute doar marginal în cancerele pulmonare comparativ cu nivelurile benigne de bază (1,3–2,6 ng/ml), cu excepția SCC, unde creșterea a fost mult peste intervalul normal (Fig. 3). Cu toate acestea, nivelurile CYFRA21-1 au fost mult crescute peste intervalul benign (6,5–35 ng/ml)(18) la revărsatul pleural al pacienților cu cancer pulmonar, sugerând că măsurarea revărsatului pleural al CYFRA21-1 este un marker tumoral optim.

alți markeri serici

markeri ai malignității tumorale incluzând CA125, CEA,NSE și AFP au fost măsurați în serurile câtorva dintre pacienți și au existat variații considerabile între pacienți și niveluri.Astfel, pentru pacienții cu ADC, media CA125, CEA, NSE și AFPwas 23.6±10.9, 48.3±39.7, 10.1±2.4, și 2.1 0.6, respectiv. Pentru pacienții cu SCC, media CA125, CEA, NSE și AFP a fost57.1±31.5, 5.6±2.7, 20.8±2.5, și 2,6 0,4, respectiv, nici unul dintre markeri nu a fost semnificativ diferit de intervalul normal (Fig. 4).

inducerea EMT în celulele focale primare de către TGF-ctf1

TGF-ctf1 atunci când sunt incubate cu tumori pulmonare cu focalizare primară celulele au creat modificări relevante pentru EMT, în multe cazuri. Astfel, în aproape 40% din tumorile adenocarcinomului, focuscelulele primare CK19-pozitive au fost induse să piardă expresia CK19 și să fie supuse EMT bytgf-XV1. Această proporție de tumori a fost de 28% pentru SCC și 50% pentru SCLC(Fig. 5). Astfel, celulele focale primare SCLC sunt inductibile pentru a fi supuse mai ușor EMT de TGF-XV1. După cum s-a menționat mai sus, celulele primare SCLC prezintă un nivel mai ridicat de EMT chiar și fără inducție de către TGF-XV1 (TableI).

un alt set de markeri importanți ai EMT este pierderea ofE-cadherinei și câștigul expresiei vimentinei. E-cadherin a fost găsit tobe negativ în aproape 37,5% din celulele tumorale primare ale adenocarcinomului,52,3% din celulele tumorale SCC și 22% din celulele tumorale SCLC (Fig. 6), înainte de a fi tratat cu TGF-XV1. Bycontrast, expresia vimentinei în aceste tumori a fost pozitivă în 23,2% din celulele tumorale adenocarcinom, 33,3% din celulele tumorale SCC și 31,3% celule tumorale SCLC (Fig. 7). Ca urmare a tratării celulelor de focalizare primară a tumorii pulmonare cu TGF-XV1, pierderea expresiei e-cadherinei a fost întotdeauna asociată cu o creștere a expresiei invimentinei (Fig. 8). Procentul de tumori SCC care au prezentat acest răspuns la TGF-CTX1 (40% modificare a expresiei e-cadherinei și 57% în expresia vimentinei) a fost mai mare decât cel pentru adenocarcinom și SCLC (Fig. 6).

discuție

expresia comparativă a CK19 în țesuturile primare de cancer pulmonar și în revărsările pleurale poate fi utilă în evaluarea capacității de metastazare a acestor celule canceroase. Astfel, celulele pleurale ale pacientului ifa au un nivel mai ridicat de expresie negativă a CK19 în comparație cu țesuturile primare ale aceluiași pacient, se presupune că expresia ck19 negativă este asociată cu invazia și metastazele (19). Astfel, în studiul de față, o proporție mare de pacienți cu tumori SCLC a avut țesut tumoral cu noexpresie de CK19 și celulele de efuziune pleurală la acești pacienți a arătat o lipsă de Expresie CK19, indicând un grad ridicat de metastază în acest tip de cancer pulmonar, care este un tipic caracteristic SCLC (20). Au fost sugerate mai multe motive pentru pierderea expresiei CK19, inclusiv expresia modificată și degradarea proteolitică îmbunătățită (21).

deoarece CYFRA21-1 este un fragment de CK19, nivelurile serice și pleurale de efuziune CYFRA21-1 sunt considerate markeri importanți de malignitate pentru multe tipuri de cancer, în special pentru cancerul pulmonar (7,21). Cu toate acestea, este dificil să fii sigurîn ceea ce privește diagnosticul de cancer bazat pe nivelurile circulante de CYFRA21-1, deoarece există cazuri de cancer pulmonar în care există niveluri scăzute de CYFRA21-1, în timp ce există o creștere a altor cazuri (7,21).Cu toate acestea, din constatările actuale, nivelurile serice CYFRA21-1 au scăzut cu posibilitatea crescută de EMT, așa cum a fost detectată de pierderea expresiei CK19 în revărsările pleurale în comparație cu țesutul tumoral primar corespunzător. Astfel, nivelurile serice CYFRA21-1împreună cu starea de Expresie CK19 a celulelor canceroase din focalizarea primară și revărsările pleurale pot identifica pozitiv capacitatea de invazie și metastază a celulelor canceroase pulmonare. Alți markeri, inclusiv CA125, CEA, AFP și NSE, care sunt utilizate în mod obișnuit pentru diagnosticul cancerului, nu au fost consecvenți în această evaluare.

capacitatea de metastazare este conferită celulelor canceroase primare prin EMT și unul dintre factorii primari care pot induce EMT este TGF-CT1. Cu toate că TGF-XV1 funcționează în mod normal ca aninhibitor al proliferării celulelor epiteliale, din cauza căilor de semnalizare modificate în multe celule canceroase, TGF-XV1 acționează pentru a spori proliferarea celulelor canceroase, inclusiv a celulelor canceroase pulmonare(22). În plus față de creșterea creșterii celulelor canceroase, TGF-XV1 este cunoscut pentru a promova EMT în celulele canceroaseși contribuie astfel la invazia celulelor canceroase și la metastaze. S-a sugerat că, în stadiile incipiente ale dezvoltării primare a tumorii în țesuturile epiteliale, TGF-XV1 acționează ca un inhibitor al creșterii tumorii prin stoparea ciclului celular și apoptoză (23,24).Cu toate acestea, pe măsură ce se produce progresia tumorii, în etapele ulterioare de dezvoltare a tumorii, există fie inactivarea căii de semnalizare TGF-CTX1, fie reglarea aberantă a ciclului celular, iar celulele canceroase devin rezistente la inhibarea creșterii de către TGF-CTX1(23,24). În aceste condiții, se utilizează TGF-XV1 ca promotor de creștere de către celulele canceroase (25). Expresia ARNm și a proteinei dintgf-XV1 a fost mult crescută în multe tipuri de cancer, inclusiv cele ale pancreasului, colonului, stomacului, plămânului, endometrului, prostatei,sânului, creierului și osului (26).

având în vedere că tendința de a suferi EMT este îmbunătățită în prezența unei citokine, cum ar fi TGF-XV1, care este cunoscută a fi crescută la pacienții cu cancer pulmonar, am examinat Emtinductibilitatea celulelor de focalizare primară, ex vivo, de către TGF-XV1.În funcție de markerul EMT utilizat, tumorile SCLC și SCC au avut o capacitate mai mare de a fi supuse EMT induse de TGF-XV1. Celulele focale primare SCLC sunt inductibile pentru a fi supuse EMT de către TGF-XV1 mai ușor, dacă luăm în considerare pierderea expresiei CK19. Există, de fapt, un grad mai marede EMT, în ceea ce privește lipsa CK19 în celulele tumorale primare SCLC. Bycontrast, celulele primare ale tumorii SCC răspund prin pierderea expresiilor e-cadherin și vimentin crescute. Reglarea în jos a e-cadherinei,împreună cu reglarea în sus a n-cadherinei caracterizează procesul EMT și aceste modificări ale expresiei acestor proteine sunt asociate cu dobândirea rezistenței la apoptoză și anoikis (27,28).

în rezumat, rezultatele studiului de față sugereazăcă invazia și metastazele celulelor tumorale pulmonare pot fi evaluate având o imagine completă a CYFRA21-1 seric împreunăcu starea expresiei CK19 a celulelor de focalizare primară și a efuziunii pleurale. Această evaluare poate fi îmbunătățită în continuare prin examinarea densității celulelor de focalizare primară izolate care urmează să fie supuse EMT induse de GFF-XV1 în culturi celulare.

Mulțumiri

autorii ar dori să recunoască asistența tehnică din partea Dr.Yong Chen și Dr. Jixin Jiang.

	Jemal a, Bray F, Centrul MM, Ferlay J, Warde și Forman D: statistici globale privind cancerul. Ca Cancer J Clin.61:69–90. 2011. Vezi articolul: Google Scholar: PubMed / NCBI
	haghgoo SM, Allameh A, Mortaz e, GarssenJ, Folkerts G, Barnes PJ și Adcock IM: Farmacogenomică șiterapia țintită a cancerului: concentrându-se pe cancerul pulmonar cu celule mici.Eur J Pharmacol. 754:82–91. 2015. Vezi articolul: Google Scholar: PubMed / NCBI
	Morales-Oyarvide V și Mino-Kenudson M:Adenocarcinoame pulmonare de grad înalt cu micropapilare și / sau solidemodele: o revizuire. Curr Opin Pulm Med. 20:317–323. 2014.Vezi articolul: Google Scholar: PubMed / NCBI
	Burdett S, Stewart LA și Rydzewska L: revizuire sistematică și meta-analiză a literaturii: chimioterapie și chirurgie versus chirurgie singură în cancerul pulmonar cu celule mici. Jthorac Oncol. 1:611–621. 2006. Vezi articolul: Google Scholar: PubMed / NCBI
	Travis WD: patologia cancerului pulmonar. ClinChest Med. 2365–81. (viii) 2002. Vezi articolul: Google Scholar: PubMed / NCBI
	Bastawisy ae, Azzouny ME, Mohammed G, Allah AA și Behiry e: fragment de Citokeratină serică 19 în avanscancerul pulmonar: am putea avea în cele din urmă un marker tumoral seric?Ecancermedicalscience. 8:3942014.PubMed / NCBI
	Hsieh TC, Huang WW, lai CL, Tsao SM și SuCC: valoarea diagnostică a markerilor tumorali în revărsările pleurale citologic negative asociate cu lungadenocarcinomul.Cancer Cytopathol. 121:483–488. 2013. Vizualizare Articol: Google Scholar : PubMed / NCBI
	Liang QL, shi HZ, Qin XJ, Liang XD, JiangJ și Yang HB: precizia diagnosticului markerilor tumorali pentru revărsatul malignpleural: o meta-analiză. Torace. 63:35–41. 2008.Vezi articolul: Google Scholar: PubMed / NCBI
	Miedouge M, Rouzaud P, Salama G și colab.: evaluarea a șapte markeri tumorali în lichidul pleural pentru diagnosticul efuziunilor maligne. Br J Cancer. 81:1059–1065. 1999.Vizualizare Articol: Google Scholar : PubMed / NCBI
	Huang WW, Tsao SM, lai CL, Su CC și TsengCE: valoarea diagnostică a nivelurilor Her-2/neu, Cyfra 21-1 și carcinoembrionicantigen în revărsările pleurale maligne ale lungadenocarcinomului. Patologie. 42:224–228. 2010. Vezi articolul: Google Scholar: PubMed / NCBI
	Riantawan P, Sangsayan P, BangpattanasiriK și Rojanaraweewong P: valoare aditivă limitată a nivelului antigenului fluidcarcinoembrionic pleural în revărsatul pleural malign.Respirație. 67:24–29. 2000. Vizualizare Articol: Google Scholar : PubMed / NCBI
	Hay ED: celula mezenchimală, rolul său în embrion și mecanismele remarcabile de semnalizare care o creează.Dev Dyn. 233:706–720. 2005. Vezi articolul: Google Scholar: PubMed / NCBI
	Guarino m, Micheli P, Pallotti f șigiordano F: relevanța patologică a plasticității epiteliale și mezenchimalfenotipice. Pathol Res Pract. 195:379–389. 1999.Vezi articolul: Google Scholar: PubMed / NCBI
	Guarino M, Rubino B și Ballabio G: Terolul tranziției epiteliale-mezenchimale în patologia cancerului.Patologie. 39:305–318. 2007. Vezi articolul: Google Scholar: PubMed / NCBI
	Chunhacha P, Sriuranpong V șichanvorachote P: tranziția epitelial – mezenchimală mediază rezistența la anoikis și îmbunătățește invazia în celulele cancerului pulmonar uman derivate din pleuralefuziune. Oncol Lett. 5:1043–1047.2013.PubMed / NCBI
	Kosacka M și Jankowska R: Compararea expresiei citokeratinei 19 în țesutul tumoral și serul CYFRA 21 – 1niveluri în cancerul pulmonar cu celule mici. Pol Arch Med Wewn. 119:33–37.2009.PubMed / NCBI
	Xu GP, Li QQ, cao XX, Chen Q, Zhao ZH, Diao ZQ și Xu ZD: efectul transferului de gene TGF-CT7 și Smad7 asupramodificări fenotipice ale celulelor epiteliale alveolare de șobolan. Celula MolBiol Lett. 12:457–472. 2007. Vezi Articolul : Google Scholar : PubMed/NCBI
	Romero S, Fernández C, Arriero JM, EspasaA, O Candela, Martin C și Sánchez-Payá J: CEA, CA 15-3 și CYFRA21-1 în ser și lichid pleural al pacienților cu revărsări pleurale.EUR Respir J. 9: 17-23. 1996. Vezi articolul: Google Scholar: PubMed / NCBI
	Fujisue m, Nishimura R, Okumura Y, TashimaR, Nishiyama Y, Osako T, Toyozumi Y și Arima N: Clinicăsemnificația cancerului de sân negativ ck19. Cancer (Basel).5:1–11. 2012. Vezi articolul: Google Scholar: PubMed / NCBI
	Pietanza MC, Byers LA, Minna JD și RudinCM: cancer pulmonar cu celule mici: Progresele recente vor duce la îmbunătățireieșiri? Res.21:2244-2255. 2015. Vezi articolul: Google Scholar: PubMed / NCBI
	Ono a, Takahashi T, Mori K, Akamatsu H, Shukuya T, Taira T, Kenmotsu H, Naito T, Murakami H, Nakajima T, etal: impactul Prognostic al CYFRA seric 21-1 la pacienții cu adenocarcinom pulmonar avansatun studiu retrospectiv. Cancer BMC. 13:3542013.Vezi articolul: Google Scholar: PubMed / NCBI
	Bachman KE și Park BH: Duel natura ofTGF-beta semnalizare: supresor tumoral vs. promotor tumoral. Curr OpinOncol. 17:49–54. 2005. Vezi articolul: Google Scholar: PubMed / NCBI
	Wakefield LM și Roberts AB: TGF-xvsignaling: efecte pozitive și negative asupra tumorigenezei. CurrOpin Genet Dev. 12:22–29. 2002. Vezi articolul: Google Scholar: PubMed / NCBI
	Akhurst RJ și Derynck R: TGF – semnalizarea în cancer-o sabie cu două tăișuri. Tendințe Cell Biol. 11: S44–S51. 2001. Vezi articolul: Google Scholar: PubMed / NCBI
	Jakowlew SB: Transformarea growthfactor-beta în cancer și metastaze. Metastaza Cancerului Rev. 25:435-457. 2006. Vezi articolul: Google Scholar: PubMed / NCBI
	Gold LI: rolul transformării growthfactor-beta (TGF-beta) în cancerul uman. Crit Rev Oncog. 10:303–360.1999.PubMed / NCBI
	Guadamillas MC, Cerezo a și Del Pozo MA: depășirea anoikis-căi către ancorare-incancer de creștere independent. J Cell Sci. 124:3189–3197. 2011. Vizualizare Articol: Google Scholar : PubMed / NCBI
	Ko H, Kim s, Jin CH, Lee E, Ham s, Yook JIand Kim K: Protein kinaza cazein kinaza 2-mediată upregulation ofN-cadherin conferă rezistență anoikis pe carcinomacells esofagiene. Res.10:1032-1038. 2012. Vezi articolul: Google Scholar: PubMed / NCBI