această propunere adaugă relația structură-funcție a proteinelor de coagulare a sângelui dependente de vitamina k, cu o atenție deosebită acidului gamma carboxiglutamic. Acest program, care implică patru proiecte separate, dar conexe, a evoluat de la lucrările anterioare dezvoltate în perioada anterioară. În Proiectul # 1, va fi studiată relația structură-funcție a factorului IX și a protrombinei. Formele mutante ale acestor proteine, obținute de la pacienții cu anomalii structurale și funcționale ereditare ale acestor proteine, vor fi purificate folosind anticorpi specifici conformației, fragmentați prin proteoliză și peptidele mutante secvențiate. Defectul molecular al fiecărei proteine mutante va fi stabilit și corelat cu defectele funcționale. În proiectul # 2, proteina recent descoperită a membranei plachetare KC4 va fi complet caracterizată și localizată la organele subcelulare specifice. Funcția și proprietățile de legare ale acestei proteine, exprimate numai pe trombocitele activate, vor fi determinate. Proiectul # 3 va defini rolul Gla în protrombină. Va fi evaluat un nou model de interacțiune Gla, metal și membrană în protrombină folosind abordări imunochimice și spectroscopice. Proprietățile de legare a membranei și distribuția Gla a unei serii de protrombine parțial carboxilate ar trebui să ofere o perspectivă asupra acestei probleme. Proiectul # 4 este o aplicație clinică directă a studiilor noastre imunochimice. Folosind anticorpi specifici pentru protrombina complet carboxilată (NPT) și des-gamma-carboxiprotrombina (APT), vom continua un studiu clinic pentru a evalua aceste teste ca o metodă îmbunătățită de monitorizare a terapiei anticoagulante orale. Deficitul de vitamina K la nou-născuți și mamele lor va fi studiat, cu speranța de a dezvolta abordări raționale simple pentru eliminarea bolii hemoragice a nou-născutului. În plus, testul antigenului KC4, specific trombocitelor activate, va fi explorat ca metodă de detectare a stării pretrombotice. Aceste proiecte de bază și clinice ar trebui să contribuie la înțelegerea acestui grup de proteine, să ofere noi modalități de diagnosticare a stării pretrombotice și a deficienței vitaminei K și să dezvolte date suplimentare pentru a justifica utilizarea testului NPT pe parcursul timpului de protrombină, reducând semnificativ morbiditatea/mortalitatea asociată terapiei anticoagulante orale.