niniejszy wniosek przedstawia zależność struktura-funkcja białek krzepnięcia krwi zależnych od witaminy K, ze szczególnym uwzględnieniem kwasu karboksyglutaminowego gamma. Ten program, który obejmuje cztery oddzielne, ale powiązane projekty, wyewoluował z poprzednich prac opracowanych w poprzednim okresie. W projekcie nr 1 zbadana zostanie zależność struktura-funkcja czynnika IX i protrombiny. Zmutowane formy tych białek, uzyskane od pacjentów z dziedzicznymi nieprawidłowościami strukturalnymi i czynnościowymi tych białek, zostaną oczyszczone przy użyciu przeciwciał specyficznych dla konformacji, rozdrobnione przez proteolizę, a zmutowane peptydy zsekwencjonowane. Defekt molekularny w każdym zmutowanym białku zostanie ustalony i skorelowany z defektami funkcjonalnymi. W projekcie # 2 nowo odkryte białko błonowe płytkowe KC4 zostanie w pełni scharakteryzowane i zlokalizowane w określonych organelach subkomórkowych. Zostanie określona funkcja i właściwości wiążące tego białka, wyrażone tylko na aktywowanych płytkach krwi. Projekt # 3 określi rolę Gla w protrombinie. Nowy model GLA, metal, i membrana interakcja w protrombina używać immunochemiczny i spektroskopowy podejście Oceniać. Właściwości wiązania błon i rozkład Gla serii częściowo karboksylowanych protrombin powinny dać wgląd w ten problem. Projekt # 4 jest bezpośrednim zastosowaniem klinicznym naszych badań immunochemicznych. Wykorzystując przeciwciała specyficzne dla całkowicie karboksylowanej protrombiny (NPT) I des-gamma-karboksyprotrombiny (APT), będziemy kontynuować badanie kliniczne w celu oceny tych testów jako ulepszonej metody monitorowania doustnej terapii przeciwzakrzepowej. Niedobór witaminy K u noworodków i ich matek zostanie zbadany, z nadzieją na opracowanie prostych racjonalnych podejść do wyeliminowania choroby krwotocznej noworodka. Ponadto, test antygenu KC4, swoistego dla aktywowanych płytek krwi, zostanie zbadany jako metoda wykrywania stanu przedzakrzepowego. Te podstawowe i kliniczne projekty powinny przyczynić się do zrozumienia tej grupy białek, zapewnić nowe sposoby diagnozowania stanu przedzakrzepowego i niedoboru witaminy K oraz opracować dalsze dane uzasadniające stosowanie testu NPT przez czas protrombinowy, co znacznie zmniejszy zachorowalność/śmiertelność związaną z doustną terapią przeciwzakrzepową.